Физиология тромбоцитов. Понятие о системе гемостаза. Тромбоцитарно-сосудистый гемостаз

1. Тема лекции: Физиология тромбоцитов. Понятие о системе гемостаза. Тромбоцитарно-сосудистый гемостаз. План лекции: 1. Строение и

функции тромбоцитов.
2. Определение системы гемостаза,функциональные
звенья, понятие о РАСК-системе.
3. Основные этапы тромбоцитарно-сосудистого
гемостаза.
Цель лекции: создать представление о системе гемостаза
с учетом двойственности эффектов; указать место
тромбоцитарного гемостаза в ее архитектуре. Определить
последовательность стадий тромбоцитарного гемостаза с
указанием значения отдельных морфологических
составляющих тромбоцита в реализации их.

2.

Тромбоциты – под различными названиями
были известны с XIX века; через 40 лет после
их открытия было подтверждено и описано их
участие в реакциях ТСГ; итальянский ученый
Дж. Биццоцеро описал их морфологию.
Ультраструктура тромбоцита
В неактивном состоянии безъядерные
пластинки округлой формы с диаметром 0,75-1
мкм (в 7 раз меньше эритроцита).
N-150-400 Г/л (гига/литр)
Наиболее частая патология – тромбоцитопения
30 Г/л – выраженная кровоточивость
100 Г/л – петехиальные кровоизлияния
Продолжительность жизни: 5-11 сут.
Образуются в ККМ; разрушаются в селезенке,
легких, печени.
Тромбоцит в сравнении
с эритроцитом

3.

По уточненным данным 1 мегакариоцит образует 3-4 тыс. тромбоцитов в
течение 3-5 дней, причём отшнуровка происходит не постоянно, а залпами.
Поэтому в миелограмме обнаруживается ОДИН мегакариоцит, окруженный
СОТНЯМИ тромбоцитов. Они представлены в виде шлейфа кометы, вслед за
сдвинутым при производстве мазка мегакариоцитом. В остальные дни
тромбоцит «отдыхает», накапливая ячейки для образования следующей
порции тромбоцитов. За сутки в организме образуется 175 Г/л тромбоцитов
Тромбоцитарный пул:
•активные 30-40%
•неактивные 60-70%
Тромбопоэтины:
•кратковременного действия – действует,
ускоряя отшнуровку цитоплазмы;
•долговременного действия – способствуют
созреванию мегакариоцитов.

4.

Ультраструктура тромбоцита
1. Периферическая зона:
• внешняя оболочка;
• мембрана;
• подмембранное пространство.
2. Зона «золь-гель».
3. Зона органелл.
4. Зона мембран.
+ОКС

5.

Периферическая зона – отвечает вцелом за межклеточное
взаимодействие.
ОКС (CS) – открытая канальцевая система.
В периферическую зону открывается множество канальцев. Через ОКС в
тромбоцит поступают элементы плазмы крови и выделяются продукты,
генерируемые тромбоцитами.
Выделение тромбоцитарных продуктов через ОКС называется реакцией
высвобождения.
1. Периферическая зона
• внешняя оболочка
Содержит гликопротеины, специфические для
тромбоцитов, как правило, состоит из
нескольких субъединиц и работают в комплексе.

6.

ГП I
ГП I b – рецептор к фактору FW, необходим
для связывания тр-в с эндотелием
ГП I a
Ia/IIa – рецептор к коллагену
ГП II a
ГП II
ГП II b
ГП III
ГП III a
IIb/IIIa – рецептор для коллагена и
фибриногена, вызывает адгезию
тромбоцитов
ГП IV – стимулирует резистентность к
трипсину и химотрипсину
ГП V – необходим для
осуществления тромбагрегации
ГП VI – необходим для
контакта тр-в со стенкой
сосудов и между собой

7.

1. Периферическмй слой:
• внешняя оболочка;
• мембрана
Мембрана периферического слоя состоит из слоя фосфолипидов (ФЛ).
Функции мембраны:
1. ФЛ являются матрицами для белков коагуляционного гемостаза.
2. ФЛ являются субстратом для инициации тромбоцитарных ферментов,
инициирующих продукцию тромбоксана А2, являющегося важнейшим
мощным фактором тромбагрегации.
3. Передают сигналы с поверхности клетки во внутриклеточную среду.
Механизм передачи: При активации тромбоцитов агонист (активатор)
связывается со специфическим рецептором и запускает цепь
последовательных событий:
Увеличивается[Ca2+] в цитоплазме результатом этого является феномен
сокращения-расслабления с участием контрактильных белков по типу
мышечного сокращения.
В результате тромбоцит принимает клиновидно-сферическую форму.
Активаторы: серотонин, АДФ, тромбоксаны, коллаген, бактерии и вирусы

8.

2. Зона «золь-гель»
Представлена вязким веществом внутри тромбоцита, состоит из белков,
объединенных в волокнистые структуры. В зоне «золь-гель» находится
кольцо из микротрубочек.
При активации тромбоцита микротрубочки сокращаются, смещая при
этом гранулы к центру тромбоцита («централизация гранул»); сжимает
их, вызывая секрецию содержимого через систему ОКС в плазму.
Сокращение кольца микротрубочек позволяет образовывать
псевдоподии, что увеличивает их способность к агрегации.
3. Зона органелл.
Содержит гранулы
Гранулы
Альфа-гранулы
Альфа-гранулы I
Электронно-плотные гранулы
Альфа-гранулы II (содержат
лизосомальные ферменты)

9.

4. Зона мембран.
Твёрдая система мембран, состоящая из микротрубочек.
Функция:
• депонирование Са++, необходимого для процессов трансформации
тромбоцита,
• содержит гормональную систему для синтеза простагландинов.
Функции тромбоцитов:
1. Ангиотрофическая.
2. Ангиоспастическая
3. Участие в ТСГ
4. Участие в КГ
5. Принимают участие в системе фибринолиза
6. Защитная функция:
• обладают фагоцитарной активностью;
• содержат IgG
• являются источником лизоцима и бета-лизина
• в стенке тромбоцита обнаружены вещества, вызывающие превращение
нулевых лимфоцитов в Т- и В-лимфоциты (реализуется при травме)

10.

Тромбоцитарные факторы – обозначаются буквой Р (от plateled - пластинка)
нумеруются арабскими цифрами; являются эндогенными факторами,
обозначаются арабскими цифрами.
Р1 – тромбоцитарный акселератор - глобулин, идентичный V плазменному
фактору, находится в неактивном состоянии, активируется следами
тромбина.
Р2 – акселератор тромбина, ускоряет превращение фибриногена в фибрин.
Р3 – тромбоцитарный тромбопластин – осколок клеточной мембраны.
Р4 – антигепариновый фактор.
Р5 – свёртывающий фактор, идентичный фибриногену.
Р6 – антитромболитический, задерживает фибиринолиз.
Р7 – антитромбопластический фактор.
Р8 – ретрактозим – представляет собой сократительный белок,
напоминающий актомиозин мышечных волокон.
Р9 – серотонин.
Р10 – котромбопластин.
Р11 – фибрин-стабилизирующий фактор.
Р12 – АДФ – активатор агрегации тромбоцитов.

11.

Гемостаз – эволюционно сложившаяся защитная реакция организма,
функциональной особенностью которой является с одной стороны –
предупреждение и остановка кровотечения путем поддержания структурной
целостности сосудов путём его локального тромбирования, а с другой стороны –
поддержание крови в жидком агрегатном состоянии.
Всилу двойственности определения, систему гемостаза принято изображать в
виде условного равенства:
предупреждение
и остановка кровотечения
гиперкоагуляция
• труднодоступность вен
• тромбоз иглы при
венопункции
поддержание крови в жидком
агрегатном состоянии
гипокоагуляция
• петехиальные кровоизлияния
• склонность к кровотечениям

12.

Функциональные звенья системы гемостаза
ГЕМОСТАЗ
свертывающее звено:
Факторы плазмы, тканей
Форменные элементы крови
противосвертывающее
звено
антикоагулянтное
звено
Фибринолитическое
звено

13.

РАСК-система:
Система
Регуляции
Агрегатного
Состояния
Крови
В настоящее время считается, что в крови даже в
отсутствие повреждения постоянно происходит
превращение фибриногена в фибрин. За
нормальное агрегатное состояние крови и отвечает
РАСК-система
За счёт чего кровь поддерживается в жидком агрегатном сотоянии?
Эндотелий сосудов
• Синтез простациклина - ингибитора агрегации тромбоцитов.
• Синтезирует, секретирует и фиксирует на своей поверхности с
помощью специальных рецепторов физиологический антикоагулянт
– антитромбин III.
• Способен синтезировать мощный активатор фибриногена АТП.
Одноименность заряда внутренней стенки сосудов и тромбоцитов
Факторы находятся в кровяном русле в неактивном состоянии
Наличие антикоагулянтов
Способность удалять из кровотока активированных факторов их
комплексов, а т.ж. продуктов их протеолиза
Итог: благодаря наличию этих факторов обеспечивается оптимальное
агрегатное состояние крови (текучесть), необходимое для
осуществления жизнеобеспечивающего кровотока.

14.

Тромбоцитарно-сосудистый гемостаз (ТСГ)
В настоящее время гемостаз условно делят на тромбоцитарно-сосудистый
(ТСГ) и коагуляционный (КГ).
ТСГ – первичный гемостаз. Развивается в мелких сосудах, диаметром до
200 мкм, время реализации 1-3 минуты (т.н. время кровотечения).
ТСГ почти целиком обусловлен сужением сосудов и механической
закупоркой.
В реализации его принимают участие: эндотелий, тромбоциты,
тробоцитарные факторы.
В ТСГ выделяют несколько стадий:
1. Спазм сосудов:
первичный спазм;
вторичный спазм.
2. Стадия адгезии:
стадия узнавания;
непосредственно адгезия.
3. Стадия агрегации:
обратимая агрегация;
необратимая агрегация.
Некоторые исследователи
4. Армирование тромба нитями фибрина
стадию 4 и 5 не выделяют как
5. Ретракция сгустка
стадии ТСГ

15.

Норма – тромбоцит и стенка
сосуда заряжены одноименно
(отталкиваются)
Первичный спазм
Повреждение
сосуда
Спазм
Вторичный спазм
I. Спазм
- первичный спазм – длится 10-15 секунд. Возникает сразу после
травмы. Механизм: за счёт активации СНС – т.е. имеет нервную
природу. Происходит выброс из ЦНС сосудосуживающих веществ
– адреналина и норадреналина.
- вторичный спазм – обусловлен активацией тромбоцитов и
отдачей в кровь тромбоцитарных сосудосуживающих агентов.

16.

Физиологический смысл стадии спазма:
- уменьшение диаметра сосудов (что ограничивает область
кровотечения);
- создаются оптимальные условия для адгезии и агрегации и образования
тромбоцитарной пробки;
- увеличивается вероятность цитолиза;
- увеличивается концентрация АДФ – сосудосуживающий агент, агонист
тромбоцитов;
- обнажаются субэндотелиальные, коллагеновые волокна.
В некоторых случаях этого может быть достаточно.
NB: оптимальные условия для адгезии и агрегации создаются не только
при нарушении целостности сосудистой стенки, но и при дисфункции
эндотелия, вызываемой:
острой гипертензией;
продуктами курения;
свободными радикалами;
бактериальными токсинами;
вирусной инфекцией;
цитокинами;
окисленными липопротеинами.

17.

II. Адгезия
1. Узнавание тромбогенной поверхности за счет:
смены заряда;
обнажения субэндотелиальных структур.
2. Непосредственно процесс адгезии
- основной фактор
фактор фон Виллебранда (FW)
- дополнительные факторы
ГП Ia/IIa
ГП VI
Р-селектин
II. 1. Узнавание тромбогенной поверхности стенки кровеносного сосуда.
Происходит случайное прилипание тромбоцитов к субэндотелиальному
матриксу или активированному эндотелию.
-за счет смены заряда – в норме тромбоцит и сосудистая стенка заряжены
одноименно. При повреждении сосуда происходит смена заряда
сосудистой стенки на противоположный (вариант «раневого потенциала».
К поврежденной сосудистой стенке всилу электростатического
взаимодействия начинают притягиваться тромбоциты.
- обнажение субэндотелиальных структур. При повреждении сосудистой
стенки происходит обнажение субэндотелиальных структур, таких как
коллаген. Циркулирующие в крови тромбоциты распознают
субэндотелиальную ткань и прикрепляются к ней.

18.

Далее начинается непосредственно процесс
адгезии с участием фактора фон
Виллебранда (FW).
Откуда берется фактор фон Виллебранда
(FW)?
При активации эндотелия сосудов из
эндотелиальных клеток в кровь и
экстрацеллюлярный матрикс
высвобождается содержимое телец ВейблаПаллада, которые представляют собой
мультимер FW и Р-селектина
ГП Ib
FW
Механизм действия FW
1) Связывает и стабилизирует VIII , тем самым обеспечивает его защиту от
инактивации – этим подтверждается его участие в коагуляционном
гемостазе.
2) Непосредственно участвует в ТСГ, обеспечивая связь между тромбоцитами и
сосудистой стенкой.
FW специфически соединяется с одной стороны с ГП Ia на тромбоците, а с
другой стороны с рецептором на сосудистой стенке.

19.

Фактор фон Виллебранда служит мостиком между коллагеном и
тробоцитами и является необходимым для адгезии тробоцитов к коллагену
при высокой скорости тока крови (Fizgerald, Philips,1987). Данная связь
является очень слабой однако приводит к замедлению движения
(тромбоцита через тробогенную коллаген-богатую поверхность, что делает
возможным взаимодействие других рецепторов тромбоцитов с коллагеном.
Эта связь считается критичной для нормального функционирования систем
по прекращению кровотечения.
Адгезия заканчивается формированием более стабильного
монослоя из тромбоцитов над тромбогенной поверхностью.
II.2 Дополнительные факторы адгезии:
Дополнительно к FW процесс обеспечивается другими рецепторами.
ГП Ia/IIa – поддерживает связь тромбоцитов с коллагеном.
ГП VI – проводит сигнал внутрь клетки для дальнейшей активации
тромбоцитов (данный сигнал является толчком к агрегации)
Р-селектин – обеспечивает адгезию лейкоцитов к месту повреждения.
Зачем? Участие в нейтрализации бактерий, лейкофибринолиз.
В процессе адгезии тромбоциты принимают клиновидно-сферическую форму
(клетки с шиловидными отростками), что увеличивает их способность к
агрегации.

20.

Болезни адгезии (болезни межклеточных
взаимодействий):
Синдром Бернара-Сулье – отсутствие ГПIb
(рецептора к фактору FW) на тромбоцитах, что
приводит к невозможности связывания
тромбоцитов с сосудистой стенкой.
Характеризуется наличием гигантских
тромбоцитов.
Болезнь Виллебранда (по имени больного) –
отсутствие FW. Сопровождается кровоточивостью
слизистой оболочки ЖКТ, кровоизлияниями в
суставы, мозг, появление т.н. «кровавых слёз».

21.

III. Агрегация
1. обратимая;
2. необратимая
Агрегация сначала обратимая.
При инициации обратимой агрегации высвобождаются
и начинают действовать вещества, содержащиеся в
альфа-гранулах: серотонин, сосудосуживающие
агенты – АДФ, Р3, Р4.
В результате действия сосудосуживающих веществ
уменьшается диаметр сосудов, возникает
функциональная ишемия, сосуд перекрывается
массой коллагеновых волокон, однако тромбоциты в
эту стадию способны к спонтанной дезагрегации.

22.

АДГЕЗИЯ
серотонин
адреналин
АГРЕГАЦИЯ
I типа (альфа-гранулы)
АDР, Р3, Р4
обратимая
агрегация

23.

III.2 Необратимая агрегация.
Для того, чтобы произошла необратимая агрегация необходим ряд событий,
инициируемых тромбином (см. схему)
В конечном итоге в результате
реализации этой цепи реакций
нарабатываются циклические
эндопероксиды (PGG2/PGH2) и
тромбоксан А2 (TxA2) которые и
запускают необратимую агрегацию.
В ходе необратимой агрегации
высвобождаются вещества,
содержащиеся в электронноплотных гранулах.
Вторым продуктом данной реакции
являются лизофосфолипиды,
накопление которых в мембране
ведет к распаду мембраны на
фрагменты – это и есть механизм
наработки P3. В результате
необратимой агрегации тромбоциты
разрушаются

24.

Обратная связь.
Физиологический смысл – увеличить образование тромбина.
Активированные тромбоциты выделяют вещества, которые в свою
очередь вызывают еще большую активацию тромбоцитов.
Действие АДФ – выделяется при образовании эндопероксидов.
Петля обратной связи от Р3 к тромбину.
Эти взаимодействия приводят к тому, что тромбоциты всё сильнее и
сильнее вовлекаются в реакцию, что ведет к лавинообразному
нарастанию процесса.

25.

тромбин
фибриноген
полимеризация
фибрина
фибрин
фибрин-полимер в
виде 3D cетки

26.

II
IIa
I
I
II
Ia
Ia
IIa

27.

I. Образование протромбиназы
внутренний путь
II. Образование протромбина
III. Образование фибрина
внешний путь

28.

Комплекс – активатор тромбина
Xa – протромбиназа – рабочий фермент
Va – ускоритель реакции
Са++ - указывает место на Р3
Р3 - матрица (место для протекания реакции)
внешний путь
внутренний путь

29.

I. Образование протромбиназы
внешний путь
внутренний путь
Xa
Va
Ca++
P3
II. Образование протромбина
III. Образование фибрина

30.

I. Образование протромбиназы
внешний путь
внутренний путь
IIIa
Xa
Va
Ca++
P3
II. Образование протромбина
III. Образование фибрина

31.

IIIa
VIIa
Ca++
P3
р-я
инициации
ФС
Ca++
VIIa
IIIa

32.

IX
XIIa
IXa
VIIa
VII
Va
V
VIIIa
VIII

33.

I. Образование протромбиназы
внешний путь
внутренний путь
IIIa
VIIa
Xa
Va
Ca++
P3
II. Образование протромбина
III. Образование фибрина
VII
X
V

34.

прекалликреин
XII
XIIa
XIIf
калликреин
брадикинин
ВМК
XI
XIa

35.

I. Образование протромбиназы
внутренний путь
XII
XIIa
XI
внешний путь
KKC
IIIa
XIa
VIIa
Xa
Va
Ca++
P3
II. Образование протромбина
III. Образование фибрина
VII
X
V

36.

VIIa
XIa
IX
+
IXa
Кальциевый комплекс
IXa
VIIIa
Ca++
+ P3
Ca++
ТЕНАЗНЫЙ КОМПЛЕКС
IXa – теназа – рабочий фермент
VIIIa
Ca++
P3 – обозначает место для процесса
тромбооразования

37.

I. Образование протромбиназы
внутренний путь
XII
XIIa
XI
внешний путь
KKC
IIIa
XIa
IX
VIIa
IXa; Са++
VIIIa; Р3
Xa
Va
Ca++
P3
II. Образование протромбина
III. Образование фибрина
VII
X
V

38.

Теназный
комплекс
VIIa
X
Xa
V
Va
Са++
Р3
тромбин

39.

I. Образование протромбиназы
внутренний путь
XII
XIIa
XI
внешний путь
KKC
IIIa
XIa
IX
VIIa
IXa; Са++
VIIIa; Р3
X
V
VII
X
V
Xa
Va
Ca++
P3
II. Образование протромбина
II
IIa
III. Образование фибрина
Iа
I