Приготовление бактериологического мазка с плотной питательной среды

1.

Департамента здравоохранения города Москвы
Государственное бюджетное профессиональное образовательное учреждение
Департамента здравоохранения города Москвы
«Медицинский колледж №1»
(ГБУЗ ДЗМ «МК №1»)
Приготовление бактериологического мазка с плотной
питательной среды
Специальность: 31.02.03.
Лабораторная диагностика
Преподаватель: Загарских А.Д.
Москва
2024

2.

Цели и задачи
Ознакомиться с понятием «мазок»
2. Ознакомиться с понятием «бактериологическая
петля»
3. Ознакомиться с правилами работы с бак. петлей
4. Разберемся забором колоний с жидкой
питательной среды
5. Ход работы приготовление нативного
1.

3.

Определение
Мазок нативный (лат. nativus естественный, природный) — мазок, не
подвергавшийся окраске, сохраняющий естественную структуру и цвет объекта.
Путем микроскопии в препарате выявляют живые микроорганизмы, оценивают
подвижность и морфологические свойства возбудителя.
Микроскопию нативных препаратов используют в диагностике сифилиса,тифа,
кандидоза или др. грибковых заболеваний.

4.

Бактериальная петля
Микробиологические петли применяются для перевивки жидких культур
микроорганизмов, засева чашек Петри, косого агара, счета колоний, снятия
колоний с агара и взятия биологического материала для бактериологических
исследований. Изготавливают из нихрома или пластика. Представляют собой
палочки с колечком на одном конце и инокулирующей иглой на другой стороне.

5.

Правила работы с бактериальной петлей
Бактериологическую петлю держат за рукоятку правой рукой (как пишущее
перо). Перед взятием микробной культуры рабочий элемент
бактериологической петли тщательно прожигают на пламени горелки, то есть
его фламбируют.
Для забора микробной культуры фламбируют металлический стержень с
ушком.
Затем бактериологической петлей соприкасаются с культурой и захватывают
каплю микробиологического материала. Культура задерживается не только на
поверхности металлического стержня, но и в его ушке. После этого культуру
выносят из пробирки так, чтобы она не прошла над пламенем горелки.

6.

Забор культуры с жидкой питательной среды
Не выпуская из рук пробирки, осторожно возле пламени их открывают свободными пальцами
(мизинцем и безымянным) правой руки. При этом их пробки прижимают мизинцем правой руки к
ладони, и после извлечения их из пробирок держат в руке.
Для забора микробной культуры профламбированный металлический стержень с ушком
бактериологической петли вводят в просвет пробирки, не доходя до микробиологического материала,
где этот рабочий элемент охлаждают. Далее металлический стержень с ушком направляют вглубь
пробирки, при этом направляющие нацеливают так, чтобы они охватывали пробирку по ее окружности.
За счет скоса на концах направляющих облегчается их наползание на пробирку снаружи по ее
окружности. Продвижение рабочего элемента бактериологической петли внутрь пробирки продолжают
на необходимую глубину и если это необходимо, то до упора в ограничители.
Затем бактериологической петлей соприкасаются с культурой и захватывают каплю
микробиологического материала. Культура задерживается не только на поверхности металлического
стержня , но и в его ушке. После этого культуру выносят из пробирки так, чтобы она не прошла над
пламенем горелки.

7.

Оборудование и реактивы
1. Лоток
2. СИЗ
3. Емкость для отходов класса Б
4. Шприцы
5. Спиртовка
6. Бактериальная петля
7. Предметные стекла
8. Пинцет
9. Раствор хлорида натрия

8.

Ход работы
Протереть ламинарный бокс
Подготовить рабочие место
Надеть СИЗ
Подписать предметные стекла
Зажечь горелку правильно
Открыть шприц, провести его над пламенем горелки
Набрать пару миллилитров NaCl
Провести шприц над пламенем горелки и аккуратно вылить на предметное
стекло,создав каплю. Сбросить шприц в емкость для отходов класса Б
9. Прокалить петлю над пламенем горелки
10. Остудить петлю об край чашки Петри и аккуратно собрать исследуемую
колонию
11. Поместить колонию на стекло растеряв ее в капле раствора
12. Подождать естественного высыхания и после провести над пламенем
горелки для фиксации
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.

9.

Учет результатов
Стекло должно:
1. Не лопнуть
2. Биоматериал не подгоревший
3. Материал не отошел от стекла
4. Материал не вытек
5. Материал не вздулся