Задачи почвенной микробиологии в широком контексте междисциплинарных проблем современной науки
Методы определения микробной биомассы– классификация по принципу получения аналитического сигнала
I. Методы, основанные на анализе биомаркеров
Метод жирных кислот фосфолипидов (ЖКФ) - phospholipid fatty acids (PLFA) profiling
Метод PLFA (жирных кислот)
Выделение ДНК из почвы
Выделение ДНК из почвы
Выделение ДНК из почвы
II. Биоцидные методы
Фумигационный метод
Фумигационный метод
Фумигационный метод
Фумигационный метод
Фумигационный метод: «прямая экстракция» (Setia et al., 2012)
Фумигационный метод: «прямая экстракция» (Setia et al., 2012)
Регидратационный метод
Регидратационный метод
Фумигационный и регидратационный методы
Фумигационный и регидратационный методы
Фумигационный и регидратационный методы
Фумигационный и регидратационный методы
Фумигационный метод
III. Методы, основанные на определении дыхательного отклика микробного сообщества
Метод субстрат-индуцированного дыхания (СИД) – Substrate induced respiration (SIR)
Метод СИД (SIR)
Метод СИД (SIR)
Метод СИД (SIR)
Метод СИД (SIR)
Важнейшее следствие недоразумений с пересчетными коэффициентами в FE, FI и SIR:
Главная проблема при использовании любых методов определения микробной биомассы в почве :
Кинетический метод – kinetics of substrate-induced response (KSIR)
Кинетический метод – kinetics of substrate-induced response (KSIR)
Кинетический метод – kinetics of substrate-induced response (KSIR)
Илья Витальевич Евдокимов
БЛАГОДАРЮ ЗА ВНИМАНИЕ!
15.67M
Категория: БиологияБиология

Методы определения микробной биомассы в почве

1.

Методы определения
микробной биомассы в
почве
И.В. Евдокимов

2. Задачи почвенной микробиологии в широком контексте междисциплинарных проблем современной науки

Определение запасов и
потоков биофильных
элементов через
микробную биомассу
Определение
дыхательной и
ферментативной
активности микробного
сообщества
Определение
структуры микробного
сообщества
Роль микробиоты в
регуляции потоков
парниковых газов и,
таким образом, в
глобальных изменениях
климата
Функционирование
ризосферы и
дриллосферы как
гологеномов
Определение
взаимосвязей между
структурой и
функциями микробного
сообщества

3. Методы определения микробной биомассы– классификация по принципу получения аналитического сигнала

I. Методы, основанные на анализе биомаркеров :
PLFA-PLEL (ЖК фосфолипидов), LPS,
гликолипидов, эргостерола, хинонов и др. Анализ
ATФ, ДНК и РНК - неспецифических биомаркеров.
II. Биоцидные методы - фумигационный (FI, FE),
регидратационный (RI, RE).
III. Методы, основанные на дыхательном отклике
микробного сообщества –
субстрат-индуцированного дыхания (СИД, SIR),
кинетический ( KSIR).

4. I. Методы, основанные на анализе биомаркеров

5. Метод жирных кислот фосфолипидов (ЖКФ) - phospholipid fatty acids (PLFA) profiling

Метод жирных кислот фосфолипидов (ЖКФ) phospholipid fatty acids (PLFA) profiling
Принцип метода:
Метод PLFA основан на анализе жирных кислот фосфолипидов
(ЖКФ), входящих в состав мембран. ЖКФ не входят в состав
запасных веществ клетки, а после смерти клетки подвергаются
быстрому биохимическому разложению под действием
внеклеточных ферментов. Это делает PLFA (ЖКФ) отличными
маркерными веществами, а полученные по результатам
анализов PLFA (ЖКФ) микробные профили могут быть
использованы для качественного и количественного анализа
микробного сообщества почвы.

6.

Метод PLFA (жирных кислот фосфолипидов)
Структура микробного
сообщества (выделение
больших групп):
Мембранные
липиды
Микоризные грибы
Прочие грибы
Грам - бактерии
Грам + бактерии
«Неспецифическая»
информация:
общее кол-во липидов
(биомасса)
Актиминоцеты
Архебактерии
Простейшие

7.

Метод PLFA (жирных кислот фосфолипидов)
Маркеры для групп организмов:
Среди наиболее часто используемых кислот (список – НЕ
исчерпывающий) выделяют следующие классы:
SATFA (saturated fatty acids, насыщенные жирные
кислоты)
Как правило, являются маркерами Г+ бактерий.
Исключения:
циклические PLFA (c префиксом Cy)– являются маркерами Г-
бактерий;
n14:0, n15:0 - неспецифические (встречаются и у Г+, и у Г-);
Длинноцепочечные (длиннее С20) – маркеры эукариот
(простейшие, растения).

8.

Метод PLFA (жирных кислот фосфолипидов)
Маркеры для групп микроорганизмов:
MUFA (mono-unsaturated fatty acids,мононенасыщенные
жирные кислоты)
Как правило, являются маркерами Г- бактерий.
Исключения:
16:1w5 – маркер для арбускулярных микоризых грибов;
18:1w9 – маркер для сапротрофных грибов.

9.

Метод PLFA (жирных кислот фосфолипидов)
Маркеры для групп микроорганизмов:
PUFA (poly-unsaturated fatty acids, полиненасыщенные
жирные кислоты)
Как правило, являются маркерами для сапротрофных грибов.
Наиболее распространенный в почве маркер для
сапротрофных грибов - 18:2w6,9.
Прочие маркеры:
18:1w7 – маркер для метанотрофов;
10Me18:0, 10Me17:0, 10Me16:0 – маркеры для актиномицетов.

10.

Метод PLFA (жирных кислот фосфолипидов)



Преимущества:
Позволяет «напрямую» применить метод стабильных
изотопов (stable isotope probing, SIP) с целью выявления
групп микроорганизмов, ответственных за определенные
процессы/последовательности реакций цикла углерода.
Может быть использован не только для качественного, но и
количественного анализа микробной биомассы в почве.
Соотношения между группами PLFA являются хорошими
индикаторами стресса в почве.
Недостатки:
Не дает возможности определять микроорганизмы до вида
или рода (за исключением актиномицетов).
Необходимость сложных экстракций с токсическими
растворителями – по сути дела, это сложный метод
органической химии с газохроматографическим окончанием.
Сложность с идентификацией пиков и однозначной
привязкой их к стандартам-ЖКФ.

11.

Метод PLFA (жирных кислот фосфолипидов) – «отцыоснователи»

12.

Метод PLFA (жирных кислот фосфолипидов) – «отцыоснователи»

13.

Индикаторы стресса по результатам анализа ЖКФ (stress
indicators as determined by PLFA analyses)
Основные индикаторы
Соотношение «грамположительные бактерии/
грамотрицательные бактерии» (Gram-positive-to-Gram-negative
ratio). Соотношение «насыщенные ЖКФ/мононенасыщенные
ЖКФ» как аналог данного индекса (SATFA/MUFA ratio as an
analogue of that index).
Соотношение trans/cis изомеров (напр., 16:1w7t/16:1w7).
Соотношение «циклические ЖКФ/их моноеновые
предшественники» (cyclopropyl PLFA to monoenoic precursors
ratio) – напр., в парах cy17:0/16:1w7 и cy19:0/18:1w7.
Вспомогательные индикаторы:
Относительное обилие тех или иных специфических ЖКФ –
маркеров микромицетов, бактерий, простейших и т.д.
(abundance of specific PLFA – markers of fungi, bacteria, protozoa
etc). Соотношение «грибы/бактерии» (fungi/bacteria ratio).

14.

Метод PLFA (жирных кислот)
Как это выглядит (стадии экстракции):
Университет г. Гёттинген, Германия

15.

Метод PLFA (жирных кислот)
Как это выглядит (стадии дериватизации):
Университет г. Гёттинген, Германия

16. Метод PLFA (жирных кислот)

Как это выглядит (оборудование):

17. Выделение ДНК из почвы

Как это выглядит (I), стадии 1 – 4 :

18. Выделение ДНК из почвы

Как это выглядит - стадии 5 - 8 (II) :

19. Выделение ДНК из почвы

Как это выглядит - стадия 8 с дальнейшим определением
концентрации ДНК (III) :
Полимеразная цепная
реакция, ПЦР (PCR)

20. II. Биоцидные методы

21. Фумигационный метод

Принцип метода
Почва подвергается воздействию паров фумиганта в
течение 24 ч (чаще всего, хлороформа CHCl3 ), а биомасса
микроорганизмов, убитых этой биоцидной обработкой,
определяется по приросту (flush) в выделении СО2 при
последующей инкубации почвы - метод фумигации
инкубации, fumigation-incubation (FI) (Jenkinson & Powlson,
1976), либо по приросту (flush) растворимых соединений
углерода (в других вариантах - азота, фосфора или серы) –
метод фумигации-экстракции, fumigation-extraction (FE)
(Brookes et al., 1985).

22. Фумигационный метод

Этапы определения методом фумигации (I)
Открытые чашки/стаканчики/сосуды с почвой (навески 20 – 40 г в
пересчете на абс.сух.) помещают в эксикатор, дно которого выстелено
фильтровальной бумагой, смоченной в воде. В эксикатор ставят
стаканчик с хлороформом, на дно стакана кладут стеклянные бусы для
предотвращения образования слишком больших пузырьков
хлороформа.
Закрывают эксикатор крышкой, подсоединяют вакуумный насос и
вакуумируют до появления пузырьков хлороформа в стаканчике.
Желательно, чтобы кипение продолжалось не менее 2 мин.
Отсоединяют насос, изолируют атмосферу внутри эксикатора от
внешней атмосферы, оставляют эксикатор в темноте при комнатной
температуре на 24 часа.
Открывают эксикатор, удаляют стаканчик с остатками хлороформа.
Затем подсоединяют насос и вакуумируют систему в течение
нескольких минут, затем открывают краны, заполняя эксикатор
обычным воздухом. Повторяют процедуру 4 – 5 раз с целью удаления
остатков фумиганта в почве. Вынимают емкости с почвой из эксикатора.

23. Фумигационный метод

Этапы определения методом фумигации (II)
Делают солевые экстракты (в 0,25 – 0,5 М растворе K2SO4) из
почвы, подвергшейся фумигации, анализируют содержание
растворимого С (N, P или S).
Из полученных величин С (N, P или S) в растворе (FE) или
выделившемся СО2 (FI) вычитают соответствующие величины,
определенные в контрольной почве. Контролем служит свежая
почва, не подвергшаяся фумигации.
Рассчитывают величину биомассы по формуле
Cbio = (Fc-Ufc) / kc = flushC / kc
(или по аналогичным формулам для других биофильных
элементов),
где Fc – С в фумигированной почве, Ufc – С в контроле, kc –
пересчетный коэффициент (conversion factor), flush C – прирост
(«флаш») растворимого или минерализуемого углерода.

24. Фумигационный метод

Как это выглядит:
Институт почвенной экологии,
Научн.-иссл. Центр
Гельмгольцевского общества,
Нойерберг/Мюнхен, Германия
Университет г. Гёттинген, Германия

25. Фумигационный метод: «прямая экстракция» (Setia et al., 2012)

Принципиальное отличие от фумигации-экстракции и
фумигации-инкубации:
Замена процедуры экспозиции в парах хлороформа на
экстракцию с эмульсией хлороформа в растворе K2SO4.
Длительность экспозиции 1 ч.
Дозировка хлороформа – 1мл/10 г почвы (возд.-сух
вес).
Применяется для анализа С,N и P микробной
биомассы в почве.

26. Фумигационный метод: «прямая экстракция» (Setia et al., 2012)

Преимущества «метода прямой экстракции» по
сравнению с другими вариантами фумигационного
метода:
Отсутствие довольно утомительной и опасной процедуры
вакуумирования эксикатора.
Не нужен специальный вакуумный насос, стойкий к
органическим растворителям (экономия средств).
Экономия времени при проведении анализов: не нужно
тратить сутки на экспозицию; не нужно многократно
вакуумировать эксикатор по окончании экспозиции с
целью избавления от остаточных концентраций
хлороформа в растворе.

27. Регидратационный метод

Принцип метода
Биоцидная обработка фумигантом (как это делается в
фумигационном методе) заменяется на высушивание
почвы при 65 – 70оС в течение 24 ч. По окончании
высушивания прирост (flush) в С и N, вызванный
поступлением в почву убитой биомассы микроорганизмов,
определяется аналогично методу фумигации-экстракции
(FE), или после добавления воды – как в методе
фумигации-инкубации (FI) (Благодатский и др., 1987).

28. Регидратационный метод

Преимущества метода по сравнению с фумигационным:
Не нужно использовать токсические вещества (фумиганты).
Меньшая трудоемкость, отсутствие манипуляций с вакуумным
эксикатором.
Возможность хранить высушенные пробы длительное время,
«накапливая» их для экстракции и анализа на С и N.
Недостатки метода по сравнению с фумигационным:
– Большее количество растворенных органических веществ в
экстракте, имеющих немикробное происхождение (собственно ПОВ
становится более растворимым в результате высушивания).

Нет взаимозаменяемости экстрактов K2SO4 и CaCl2, которая
бывает у образцов многих сельскохозяйственных почв при
использовании метода FE.

Отсутствие апробации метода на широком ряде почв и
экологических условий – этот метод не является «стандартным»,
общепризнанным методом.

29. Фумигационный и регидратационный методы

Способы определения пересчетных коэффициентов (I):
Сравнение с результатами прямого микроскопирования
(Jenkinson & Powlson, 1976).
По результатам определения С или N в биомассе
микроорганизмов, выращенных на искусственных средах
(Van Veen et al., 1987) - «непрямой метод».
Для kEN – расчет по усредненному значению С:N во “flush”
после фумигации (Joergensen & Mueller, 1996) - «непрямой
метод».

30. Фумигационный и регидратационный методы

Способы определения пересчетных коэффициентов (II):
«Прямая калибровка» с внесением 13C или 14C меченого С
субстрата (при определении kEC) или 15N меченого
источника N (при определении kEN) (Brookes et al., 1985;
Jenkinson, 1988; Blagodatsky & Yevdokimov, 1998).
Большинство исследователей выбирает простой путь –
берут наиболее часто встречающиеся в литературе
величины kEC = 0,45 и kEN = 0,54 и считают величины
пересчетных коэффициентов постоянными.
Это – главный источник ошибок при применении
биоцидных методов!!!

31. Фумигационный и регидратационный методы

Способы определения пересчетных коэффициентов
(III):
• «Прямая калибровка» с изотопами с широким
интервалом величин C:N во вносимом субстрате,
либо с широком интервалом величин других
факторов (рН, почвенная влажность и т.д.) При этом
появляется возможность получить эмпирические
уравнения зависимости k от вышеперечисленных
экофизиологических факторов.

32. Фумигационный и регидратационный методы

Способы определения пересчетных
коэффициентов (IV):
• Примеры таких эмпирических уравнений:
kEC = 0,2 (C/N)0,3
C:N в калибровочном эксперименте колебалось от 3,4 до
36,2, при этом kEC варьировали от 0.18 (при максимальной
величине C:N) до 0,62 (при минимальной) (Yevdokimov et
al., 2006).
kEN = (4,7 (1 – kEC) + (C/N) kEC) kEC/(C/N) (Blagodatsky &
Yevdokimov, 1998).
Общая закономерность: чем выше соотношение C:N, тем
ниже пересчетный коэффициент.

33. Фумигационный метод

Трудности при определении фосфора микробной
биомассы в почве:
Необходимо количественно определить сорбцию Рсодержащих соединений.
Необходимо количественно определить изотопный обмен
при определении пересчетного коэффициента в опытах с
радиоактивной меткой азота (32Р и 33Р).
В связи с этим перспективным представляется
использование анионно-обменных смол (anionexchange membranes, AEM).

34.

Экспериментальное
определение
Мечение изотопом
33P
коэффициента сорбции
Rsorp
Ионообменные
мембраны показали
гораздо более
высокое сродство
к фосфатам, чем
поверхность
почвенных частиц,
поэтому…
Экспериментальное
Для всех
типов почв
можно
использовать
0.9
для
Rsorp и
определение
коэффициента
Rexch
изотопного обмена
Rexch
kP следует
Экспериментальное
определение
пересчетного
коэффициента kP на
основе Rsorp
и Rexch
определять
kP показал сильную
специфичность для
каждой почвы,
вероятно, из-за
колебаний соотн.
«грибы:бактерии»,
поэтому…
отдельно для
каждой
почвы,
используя
мечение с
33P

35.

Результаты. Извлекаемость 33P после сорбции и изотопного
обмена во время ионообменной процедуры (%); пересчетные
коэффициенты для расчета микробного P (+ SE)
Извлекаемость с
учетом
Почва
сорбции, %
Извлекаемость с
учетом
изотопного
обмена, %
Пересчетный
коэффициент
Rsorp
Rexch
kp
Phaeozem
87+1 a
87+1 a
0.30+0.02 б
Kastanozem
85+1 a
89+1 a
0.38+0.02 в
Chernozem
92+2 б
88+1 a
0.19+0.01 a
Podzol
91+2 б
98+2 б
0.32+0.01 б
Буквами показаны существенные различия между почвами при P < 0.05,
Yevdokimov et al., 2016
определенные по тесту Тьюки (n=3).

36.

Фумигационный метод: «прямая экстракция» при
определении микробного Р

37.

Фумигационный метод: «прямая экстракция» при
определении микробного Р

38.

Использование концентрации ДНК, выделенной из
почвы, в качестве индекса общей микробной
биомассы
Joergensen (2006) :
Cмик (мкг/г почвы) = FPLFA × PLFA (нмоль/г почвы),
где FDNA – пересчетный коэффициент. Величины пересчетного
коэффициента составили:
FPLFA = 5,8 – при калибровке по методу фумигации-экстракции (FE)
FDNA = 6,0 – “ – “ -
Semenov et al. (2017) :
Cмик (мкг/г почвы) = FDNA × dsDNA (мкг/г почвы),
где FDNA – пересчетный коэффициент. Величины пересчетного
коэффициента составили:
FDNA = 4,4 – при калибровке по методу фумигации-экстракции (FE)
FDNA = 5,1 – при калибровке по методу СИД (SIR)

39. III. Методы, основанные на определении дыхательного отклика микробного сообщества

40. Метод субстрат-индуцированного дыхания (СИД) – Substrate induced respiration (SIR)

Принцип метода
В почву вносят глюкозу и определяют дыхательный
отклик микробного сообщества на внесение
легкодоступного субстрата, продолжающийся в
течение первых 3 - 4 ч (Anderson & Domsch, 1978).
Углерод микробной биомассы рассчитывается с
использованием пересчетного коэффициента.

41. Метод СИД (SIR)

Этапы определения методом СИД (SIR)
В навеску почвы 10 – 40 г вносят раствор глюкозы или
сухую глюкозу, перемешанную с тальком, прокаленным
песком или др. инертным веществом. Почву, обогащенную
углеродным субстратом, помещают в сосуд/ пластиковую
трубку, герметично изолированную от окружающей
атмосферы эластичной крышкой или мембраной, и
инкубируют в течение нескольких часов в термостатических
условиях.
Производят периодическое (каждые 0,5 – 1 ч) определение
скорости выделения СО2 из почвы (почвенного дыхания).
Рассчитывают углерод микробной биомассы y (мкг С/ г) по
следующей формуле:
y = 40,04x + 0,37 ,
где x – интенсивность дыхания (мкл СO2/( г * ч)) – Anderson &
Domsch (1978).

42. Метод СИД (SIR)

Определение скорости выделения СО2:
Газохроматографическое – анализ производится на газовом хроматографе
- gas chromatograph, GC (вручную или с автоматизированной системой
пробоотбора и измерений).
Методом инфракрасной спектроскопии –анализ производится на
инфракрасном газовом анализаторе – infrared gas analyzer (IRGA) (вручную
или с автоматизированной системой пробоотбора и измерений). .
Адсорбционным методом - почва помещается в пластиковые стаканчики,
стаканчики герметически изолируют в микрокосме с емкостью, содержащей
раствор КОН. Измерения проводимости раствора щелочи производятся
автоматически через заранее установленные интервалы времени.
Уменьшение проводимости пропорционально поглощению СО2 из
атмосферы микрокосма.

43. Метод СИД (SIR)

Преимущества СИД по сравнению с биоцидными методами
Не нужно использовать токсические вещества (фумиганты), не
нужно производить измерения растворимых соединений С и N.
Меньшая трудоемкость при использовании автоматической
установки с IRGA или RESPICOND, возможность использовать
большее число повторностей.
Возможность определять микробную биомассу параллельно с
базальным дыханием на той же установке.
Недостатки СИД по сравнению с биоцидными методами

Нельзя определить N, P и S в микробной биомассе.

Нельзя определить изотопный состав микробной биомассы.

44. Метод СИД (SIR)

Пересчетный коэффициент:
Распространенной ошибкой является использование
коэффициента 30 для расчетов, в которых величина х
уже приведена к размерности мкг СО2-С/(г * ч). В этом
случае происходит занижение расчетной величины
микробной биомассы почти вдвое: фактически нужно
подставлять пересчетный коэффициент 56.

45. Важнейшее следствие недоразумений с пересчетными коэффициентами в FE, FI и SIR:

В ряде публикаций величины микробной биомассы,
полученные методом СИД (SIR), оказывались ниже
таковых, полученных фумигационным или
регидратационным методами. Это – следствие
несовершенства методик определения пересчетных
коэффициентов!
На этом основании, а также в связи с тем, что в методе
СИД (SIR) определяется дыхательная активность
микробного сообщества, некоторые авторы до сих пор
утверждают, что метод СИД (SIR) определяет «активную
микробную биомассу». Это – ошибка!!! И биоцидные
методы, и СИД (SIR) предназначены и откалиброваны для
определения одного и того же пула – общей микробной
биомассы.

46. Главная проблема при использовании любых методов определения микробной биомассы в почве :

Определение пересчетного
коэффициента !!!

47. Кинетический метод – kinetics of substrate-induced response (KSIR)

Принцип метода:
В почву вносят глюкозу и определяют динамику выделения
СО2 в течение 16 – 24 ч после внесения легкодоступного
субстрата (Panikov & Sizova, 1996). Общая и активная
микробная биомасса, а также удельная скорость роста
рассчитываются с использованием уравнений
экспоненциального роста. Определения скорости
выделения СО2 производятся в динамике (оптимально – не
реже 1 раза в час) аналогично тому, как это делается в
методе СИД (SIR).

48. Кинетический метод – kinetics of substrate-induced response (KSIR)

Определяемые
параметры:
Уравнения:
vC – скорость продуктивного
дыхания; vU – скорость
)
непродуктивного
дыхания;
µmax – максимальная
удельная скорость роста
v(t) = vu + vc ×exp(µmax×t)
(1),
где v(t) – скорость продукции CO2;
t - время
r0 – фракция «активной»
микробной биомассы
r0= (vC ×0.1)/( vU + vC ×0.1)
(2)
x0=(vC × 0.9 × Yx/p)/(r0 × µmax)
(3),
x0 - общая микробная
биомасса
x’ – «активная» микробная
биомасса
где Yx/p– экономический
коэффициент
x’ = x0 × r0
(Panikov & Sizova, 1996)
(4)

49.

Typical curve of CO2 emission - KSIR method
200
VCO2, mkgCg-1h-1
150
100
50
0
0
5
10
hours
15
20
25

50. Кинетический метод – kinetics of substrate-induced response (KSIR)

Преимущества KSIR перед другими методами определения микробной
биомассы
+ Определение не только общей, но и активной микробной биомассы.
+ Определение параметров микробной кинетики, что особенно важно при
моделировании микробного роста в почве.
+ Большая чувствительность по сравнению с СИД при определении быстрой
динамики микробной биомассы в почве и ризосфере.
+ Не требуется дополнительных лабораторных манипуляций по сравнению с
СИД – кинетику выделения СО2 можно изучать в тех же пробах.
Недостатки KSIR по сравнению с другими методами определения
микробной биомассы
– Привлечение довольно сложного математического аппарата, высокая
трудоемкость расчетов.
– Параметры µmax и vc часто бывают скоррелированными между собой –
результаты расчетов микробной биомассы поэтому получаются не
свободными от субъективизма исследователя.
– Использование фиксированных значений коэффициента CNрезистентного дыхания и экономического коэффициента Y.
– Отсутствие апробации на широком ряде почв и экосистем.

51.

Методы СИД (SIR) и кинетический (KSIR)
Как это выглядит (определение на установке с IRGA):
Технический Университет г. Инсбрук, Австрия

52.

Методы СИД (SIR) и кинетический (KSIR)
Как это выглядит (определение на установке RESPICOND):
Институт почвенной экологии,
Научн.-иссл. центр Гельмгольцевского общества, Нойерберг/Мюнхен, Германия

53.

Название метода
Принцип
получения
аналитического
сигнала
Фумигационный
БИОЦИДНЫЕ
БИОЦИДНЫЕ
МЕТОДЫ
МЕТОДЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
ДЫХАТЕЛЬНОГО
ОТКЛИКА
метод
Регидратационный
метод
Метод
СИДСИД
Кинетический
СИД
метод
АТФ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
БИОМАРКЕРОВ
ЖКФ
ДНК и РНК
Возможности метода
Пригодность для
измерений внутрисуточной
динамики
Низкая трудоемкость
определений
Высокая степень
автоматизации измерений
Ненужность сложного
оборудования для «мокрой
химии»
Совместимость с
изотопными методами
Определение
таксономической
структуры микробного
сообщества

54. Илья Витальевич Евдокимов

Евдокимов И.В. Методы определения биомассы
почвенных микроорганизмов // Russian Journal of
Ecosystem Ecology. 2018. Т. 3. № 3. С. 1-20. DOI:
10.21685/2500-0578-2018-3-5, Q4.
Илья Витальевич Евдокимов
Контакты:
[email protected]
[email protected]

55. БЛАГОДАРЮ ЗА ВНИМАНИЕ!

English     Русский Правила