2-й этап БАК метода. Изучение культуральных свойств. Техника посева на скошенный МПА

1.

2й Этап БАК.Метода. Изучение
культуральных свойств. Техника
посева на скошенный МПА.

2.

Вопросы для самоконтроля
• 1.Цель 2-го тапа. Манипуляция.
• 2.Что такое культура
• 3. Что такое чистая культура
• 4. гемокультура
• 5. копрокультура
• 7. Штамм
• 8. Культивирование
• 9. Колония . 8 признаков колоний
• 10.От чего зависит характер роста на питательных
средах
• 11.Характеристика колоний S и R типа.
• 12.S - R диссоциация.

3.

• Культура – это м/о , выращенные на искусственных
питательных средах.
Чистая культура — совокупность м/о одного вида, имеющих
одинаковые морфологические и биохимические свойства.
• Колония – потомство одной микробной клетки.
Изолированные колонии являются скоплениями микробов
одного вида
• Штамм – м/о одного вида, выделенные из определенного
источника в определенное время
• Культуральные свойства – характер роста м/о на
ППС и ЖПС.
Они зависят от :
• Характера среды
• Типа дыхания
Культуральные особенности м/о закреплены на
генетическом уровне и являются
дифференциальным признаком.

4.

Характер роста на ЖПС
1. Облигатные анаэробы (растут и размножаются в
бескислородных условиях) – рост в виде осадка (сверху
пит.среды заливают стерильным вазелиновым маслом)
2. Факультативные анаэробы (отсутствие О2
предпочтительнее) – рост в виде диффузного или
равномерного помутнения среды
3. Облигатные аэробы (присутствие О2 обязательно) – рост
в виде пленки :
А) тонкая, нежная, исчезает при взбалтывании
Б) толстая, влажная, слизистая, прилипает к бак.петле
В) плотная, сухая (кусок кожи), петлей снимается целиком
Г) плотная, сухая, сморщенная, при взятии крошится

5.

6.

Дифференциальный рост
факультативных анаэробов на ЖПС
1. Возбудитель чумы –
«чумные сталактиты» пленка со
свешивающимися нитями,
потом осадок, бульон
прозрачный
2. Возбудитель сибирской
язвы – рост в виде комка
ваты, бульон прозрачный.
3. Возбудитель скарлатиныгноеродный стрептококкрост зернистый, придоннопристеночный , бульон
прозрачный.

7.

Полужидкие питательные среды
Используют для определения подвижности м/о –
посев уколом в столбик, ближе к стенке.
1. Подвижные м/о – диффузное помутнение
среды- прорастание
2. Неподвижные м/о – помутнение только по
ходу укола.

8.

Плотные питательные среды
• Оценивается характер изолированных
колоний по 8 признакам:
1.Величина
2. Форма
3. Консистенция
4. Цвет
5. Контур края
6. Рельеф
Х8
7. Поверхность
8. Структура

9.

10.

11.

Основные свойства м.клеток из S- и R- колоний
S тип : (вязкий рост)
R тип : (сухой рост)
-Колонии гладкие , правильные , - Колонии шероховатые,
выпуклые;
неровные, уплощенные;
- Клетки нормальной
- Клетки короткие, кокковидные
морфологии;
формы;
- У подвижных-жгутики;
- У подвижных – могут
отсутствовать жгутики;
- У капсульных- хорошо
выражена капсула;
- Капсулы отсутствуют;
- Б/Х более активны;
- Б/Х менее активны;
- В антигенном отношении более - В антигенном отношении
полноценны;
неполноценны;
- У патогенных видов выражена - Вирулентность слабая или
вирулентность.
отсутствует
SR-диссоциацией называется такое явление, когда в чистой
культуре, образующей S-формы колоний, появляются R-формы.
Результат мутации.

12.

Выбрать колонии характерные для кишечной
палочки на среде Эндо
1. Размер – 1-2 мм
2. Форма - круглая
3. Контур края - ровный
4. Поверхность – гладкая, блестящая
5. Структура – не просматривается
6. Рельеф - выпуклый
7. Консистенция - вязкая
8. Цвет – малиновый с металлическим блеском или без.

13.

Изучить морфологические, тинкториальные свойства и
чистоту культуры в выбранных колониях
1. Промаркировать характерные колонии по дну.
2. Промаркировать стекло в соответствии с количеством
выбранных колоний.
3. Нанести на стекло физ. раствор
4. Стерильной остуженной петлей от выбранных колоний
отколоть кусочек культуры
5. Приготовить мазки из выбранных колоний
6. 0красить по Граму
7. Для дальнейшей работы выбирают колонию с Грмелкими палочками с закругленными краями

14.

Засеять остатки культуры из выбранной колонии
на скошенный агар
1. Стерильной остуженной петлей снять остатки культуры из
выбранной колонии.
2. Внести культуру в основание скоса
3. Смешать с конденсатом
4. Частыми штрихами засеять всю плоскость скоса.
5. Петлю вынимают из пробирки, пробку и край пробирки
проносят через пламя и закрывают.
Петлю прожаривают в пламени, чтобы
уничтожить микроорганизмы.