Генная инженерия животных. Получение зигот

1. Генная инженерия животных

Практикум
ФББ МГУ – ЦКП ИБГ РАН
2016

2. Получение зигот

• Индукция гиперовуляции
• Проверка оплодотворения
• Извлечение зигот

3. Определение пола у мышей

4. Овогенез и зиготы

5. Эстральный цикл

6. Клеточный состав мазка

7. Состояние эндометрия и внешний вид матки

8. Копулятивная пробка

9. Индукция гиперовуляции

• Фоллимаг
(гонадотропин из
сыворотки лошадей)
• -3 дня
• активность - 40 мE, 200 ul
• Профази
(хорионический
гонадотропин)
• -1 день
• активность - 40 мE, 200 ul

10. Шприцы

• Инсулиновый шприц
объемом 1 мл
• Шкала варьирует

11. Как держать мышь?

12. Иссечение яйцевода

13. Иссечение яйцевода

14. Буфер для работы с яйцеклетками вне СО2-инкубатора

М2
• Антибиотики:
пенициллин и
стрептомицин
• пируват и лактат
• гидрокарбонат
• HEPES
• соли всякие

15. Извлечение яйцеклеток из яйцевода

16. Очистка яйцеклеток

• Гиалуронидаза

17. Внешний вид яйцеклеток в чашке после отмывки

18. Изготовление капилляра

• Капилляры (внешний
диаметр 1мм)
• Вытягивание
• Микрокузница (выбор
диаметра и обработка
кончика)
• Для отмывки яйцеклеток
внутренний диаметр >
100 мкм