abf6b436_zan_9_stom_mikrofl_p-ti_rta_uirs_1_den_2024_okonch

1.

МИКРОФЛОРА
ПОЛОСТИ РТА
УИРС, 1 день

2.

ЭКОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ – наука,
изучающая взаимосвязи между микроорганизмами в
условиях среды их обитания.
ЭКОСИСТЕМА - биологическая система, состоящая из
сообщества живых организмов (биоценоз), среды их
обитания (биотоп), системы связей, осуществляющей
обмен веществом и энергией между ними.
НОРМАЛЬНАЯ МИКРОБИОТА – естественная
совокупность микробных популяций, наиболее часто
выделяемых из организма здорового человека,
колонизирующих различные биотопы и не
причиняющих ему видимого вреда.

3.

МИКРОБИОЦЕНОЗ- совокупность
микроорганизмов, населяющих
территорию с одинаковыми условиями
существования.
БИОТОП — относительно однородный по
абиотическим факторам среды участок,
заселённый живыми организмам.
CИМБИОЗ –взаимодействие и
сосуществование представителей разных
биологических видов.

4.

Типы симбиоза между
микро- и макроорганизмом:
КОММЕНСАЛИЗМ
МУТУАЛИЗМ
ПАРАЗИТИЗМ

5.

Типы симбиоза
между микроорганизмами
САТЕЛЛИЗМ
СИНЕРГИЗМ
НЕЙТРАЛИЗМ
МЕТАБИОЗ
АНТАГОНИЗМ

6.

Синергизм
Бифидо- и лактобактерии
при брожении углеводов
образуют органические
кислоты, для их размножения
оптимальная pH 5-6.

7.

Сателлизм
Фузобактерии образуют
N-ацетилмурамовую кислоту –
фактор роста для T. forsythia

8.

Метабиоз
F. nucleatum разрушает
коллаген соединительной ткани,
образуются низкомолекулярные
азотсодержащие продукты,
которые усваиваются
T. vincentii

9.

Антагонизм
Вейлонеллы расщепляют
органические кислоты,
повышают pH, что тормозит рост
и размножение
кариесогенных
стрептококков и
лактобактерий

10.

ОСНОВНЫЕ БИОТОПЫ
ПОЛОСТИ РТА
•слизистая оболочка полости рта
•протоки слюнных желез с находящейся
в них слюной
•десневая жидкость и зона десневого
желобка
•ротовая жидкость
•зубная бляшка

11.

Биопленка сложное, трехмерное,
высокоорганизованное,
непрерывно меняющееся
сообщество микроорганизмов,
заключенных в
экзополимерный матрикс.

12.

Состав биопленки
1. Микроорганизмы 5-35%
Большая часть в фазе покоя. В центре
биопленки 1-5% клетки-персистеры. Их
назначение – депонирование и
сохранение генетического материала,
чаще в виде плазмид. Регулирование всех
физиологических процессов в биопленке,
в том числе вирулентности. Биопленка –
фактор патогенности.
Вторая группа микробов - активные,
находятся на периферии биопенки,
выделяются в окружающую среду –
«планктонные», способны
колонизировать новые биотопы.

13.

Состав биопленки
2. Матрикс – сложная смесь ЛПС,
гликопротеидов, полисахаридов,
пептидов, липидов, ДНК, 80-96% воды. В
матриксе зубной бляшки содержатся
леваны и декстраны. Имеет каналы, по
которым поступают питательные
вещества, О2, выводятся продукты
обмена. Обеспечивает стабильность,
защиту от неблагоприятных физических,
химических, биологических факторов
( антибиотики, дезинфектанты,
бактериофаги).

14.

2 типа биопленок в полости рта:
1 тип – биопленка, ассоциируемая со
здоровыми зубами и пародонтом
«Микробиологический портрет»
здоровой биопленки
S. sanguis
S. mitis
S. oralis
S. salivarius
Veilonella spp.
Actinomyces spp.

15.

2 тип – биопленки, ассоциированныe с
кариесом, пародонтитом,
периимплантитом.
Биопленка, ассоциированная с кариесом
эмали. Доминируют ацидогенные,
ацидофильные и ацидотолерантные
бактерии:
Streptococcus spp.
Lactobacillus spp.
Actinomyces spp.
Leptotrichia

16.

Биопленки на поверхности
реставраций:
- наиболее агрессивные на поверхности
пломб из цемента: Fusobacterium,
Peptosrtreptococcus, Actinomyces;
- на поверхности амальгамы и
макрофильных материалов: оральные
стрептококки (S. mutans, S. sanguis,
S. mitis);
- на поверхности гибридных,
микрофильных материалов: S. salivarius.

17.

Стадии образования биопленки
Адгезия
Колонизация
Созревание: Quorum sensing
Матрикс
Дисперсия (планктонное состояние)

18.

19.

Адгезия - прикрепление микробов
к биотическим и абиотическим
поверхностям.
Колонизация - образование
микроколоний в матриксе,
расселение микробов в биотопе.

20.

Неспецифическая адгезия
Механизмы
- Химические связи между поверхностями
макро и микроорганизмов (ионные,
гидрофобные, водородные)
- Высокомолекулярные полимеры (клейкие
мукополисахариды: гликокаликс, слизь;
леваны, декстраны оральных стрептококков)

21.

Специфическая адгезия
Адгезины Грам- бактерии
Пили (фимбрии), фибриллы
БНМ (белки наружной мембраны)
ЛПС
Капсула
Адгезины Грам+ бактерий
Пили
Поверхностные белки (М-белок стрептококков)
Липотейхоевые кислоты
Капсула

22.

Quorum sensing • феномен коллективного
или социального
поведения
микрорганизмов в
биопленке

23.

Зубная бляшка

24.

Зубная бляшка
Ранняя зубная бляшка
Образование 1-4 часа.
Микробное число 100-5 000 микробов/г
Динамическая зубная бляшка
Образование 4-5 суток
Микробное число 1-10 млн./г
Зрелая зубная бляшка
Образование 6-7 суток
Микробное число 10-100 млрд./г

25.

Зрелая зубная бляшка
Зрелая стабильная
Имеет окончательный состав симбионтов
Зрелая нестабильная – прогрессирующая
Образуется при отрицательном гигиеническом
состоянии полости рта; может индуцировать
развитие гингивита, пародонтита. Резко
увеличивается число Грамспоронеобразующих анаэробов: превотелл,
порфиромонад, фузобактерий, бактероидов;
актинобацилл, актиномицетов,
пептострептококков.

26.

Ранние колонизаторы
зубной бляшки
S. mutans
S. sanguis
S. orale
S. mitis
S. gordonii
A. naeslundii
A. israelii
V. parvula, V. atypica

27.

Промежуточные колонизаторы
зубной бляшки
Fusobacterium nucleatum

28.

Поздние колонизаторы
зубной бляшки
P. intermedia, P. denticola
P. gingivalis
T. forsithya
Peptostreptococcus
T. denticola
Aggregatibacter
actinomycetemcomitans

29.

Ротовая жидкость
Важнейший биотоп полости рта, осуществляет
взаимодействие между микробиотой всех
биотопов.
Количество микробов 43 млн. - 5,5 млрд./мл
S. salivarius, S. mitis
Neisseria spp.
Veilonella spp.
Treponema spp.
Mycoplasma spp.

30.

Десневой желобок, десневая жидкость
Облигатные анаэробы:
Porphyromonas
Prevotella
Fusobacterium
Bacteroides
Leptotricia
Actinomyces
Spirochetales
Редко: Candida
Mycoplasma
Простейшие

31.

Слизистая оболочка
Наиболее обширный и разнообразный биотоп.
На слизистой твердого и мягкого неба, небных
дужках, миндалинах: стрептококки,
коринебактерии, нейссерии, Candida.
В подъязычной области, на внутренней
поверхности щек, в складках и криптах –
анаэробы: вейлонеллы, пептострептококки,
лактобактерии, S. mitis.
В буккальном эпителии внутриклеточно:
P. gingivalis, A. actinomycetemcomitans.

32.

Спинка языка
В области сосочков микрофлора защищена от
механического удаления
S. salivarius, S. mitis
Veilonella spp.
Peptostreptococcus spp.
Actinomyces spp.
Bacteroides

33.

Протоки слюнных желез, слюна
Из-за высокой бактерицидной активности
продуктов метаболизма, лизоцима,
секреторных иммуноглобулинов практически
стерильны. Незначитльное количество
облигатных анаэробов: вейлонеллы,
пептострептококки.

34.

Микрофлора полости рта
Аутохтонная – собственная.
Виды, максимально приспособленные к
существованию в данном биотопе:
а)резидентная (индигенная, облигатная)
постоянно обитающие виды – 95%;
б)факультативная (сопутствующая,
добавочная) – 1-2-5%. Поступает из других
биотопов. Встречается редко, при
заболеваниях; индивидуальная
микрофлора. Пример,
коагулазоположительные стафилококки.

35.

Микрофлора полости рта
Аллохтонная < 5%
(транзиторная, необязательная,
случайная, заносная), не способная к
длительному существованию в данном
биотопе. Поступает из окружающей среды
и других биотопов макроорганизма
(кишечника). При снижении защитных сил
задерживается и вызывает заболевания в
полости рта.

36.

Резидентная микрофлора
(факультативные анаэробы, аэробы)
Стрептококки
Коринебактерии
Стафилококки
Лактобактерии
Нейссерии
Грибы кандида

37.

38.

Семейство:
Streptococcaceae
Род:
Streptococcus
Виды:
S. mutans
S. mitis
S. oralis
S. parasanguinis
S. salivarius
S. sanguinis…

39.

40.

Семейство:
Corynebacteriaceae
Род:
Corynebacterium
Виды:
С. рseudodiphtheriticum
С. ulcerans

41.

42.

Семейство:
Neisseriaceae
Род:
Neisseria
Виды:
N. sicca
N. flava
N. perflava

43.

Биотоп нейссерий
Слизистая оболочка полости рта

44.

Семейство:
Staphylococcaceae
Род:
Staphylococcus
Виды:
S. warneri
S. auriculus
S. haemolyticus
S. anaerobius
S. epidermidis
S. aureus

45.

Семейство:
Lactobacillaceae
Род:
Lactobacillus
Виды:
L. acidophilus
L. сasei
L. salivarius

46.

Биотоп лактобактерий
Зубная бляшка
Фиссуры зуба
Слизистая оболочка полости рта
(складки слизистой)

47.

Семейство
Pasteurellaceae
Род
Aggregatibacter
Вид
A. actinomycetemcomitans

48.

A. actinomycetemcomitans

49.

Колонии
A. actinomycetemcomitans

50.

Биотоп A. actinomycetemcomitans
Поддесневая зубная бляшка 40-80%
Букккальный эпителий - внутриклеточно

51.

Царство: Грибы
Порядок:
Saccharomycetales
Род:
Candida
Виды:
C. albicans
C. tropicalis
C. krusei…

52.

Биотоп Candida
Слизистая оболочка полости рта

53.

Резидентная микрофлора
(анаэробы)
Вейлонеллы
Пептострептококки
Грам- споронеобразующие анаэробы:
Порфиромонады
Превотеллы
Таннереллы
Бактероиды
Фузобактерии
Актиномицеты
Спирохеты

54.

55.

Семейство:
Acidominococcacee
Род:
Veillonella
Вид:
V. parvula

56.

Семейство:
Peptostreptococcaceae
Род:
Peptostreptococcus
Вид:
Р. anaerobius
Род: Peptococcus
Вид: P. niger

57.

Семейство
Porphyromonadaceae
Род:
Porphyromonas
Вид:
Р. gingivalis
Род:
Tannerella
Вид:
T. forsythia
Семейство Prevotellaceae
Род:
Prevotela
Виды:
Р. melaninogenica,
P. intermedia
Семейство Bacteroidaceae
Род
Bacteroides
Виды
B. odontolyticus

58.

Tannerella forsythia

59.

Грамотрицательные споронеобразующие
анаэробы

60.

Семейство
Fusobacteriaceae
Род
Fusobacterium
Виды
F. nucleatum
F. necroforum
F. periodonticum

61.

Фузобактерии

62.

63.

Семейство:
Actinomycetaceae
Род:
Actinomyces
Виды:
A. israelii
A. viscosus
A. odontolyticus

64.

Порядок
Bifidobacteriales
Семейство
Bifidobacteriaceae
Род
Bifidobacterium
Вид
B. dentium

65.

Семейство:
Род:
Spirochaetaceae
Treponema
Виды:
Т. macrodentium
T. denticola
T. orale
T. vincentii
Род:
Borrelia
Виды:
B. buccalis

66.

Биотоп облигатных анаэробов
Десневая бороздка, десневая жидкость
Зубная бляшка
Фиссуры зуба
Слюна, протоки слюнных желез
Слизистая оболочка полости рта
(карманы, складки слизистой у
основания зуба)

67.

68.

69.

ЖСА:
питательный агар,
7,5-10% натрия хлорида,
желточная эмульсия
Кровяной агар:
питательный агар,
дефибринированная кровь
Среда Сабуро:
питательный агар,
глюкоза или мальтоза,
м.б. добавлен теллурит
калия /натрия или
антибиотик

70.

Протокол. Микрофлора организма человека
Исследуемый материал
Что сделать
1) Мазок-препарат из культуры
Streptococcus sрр.,
окраска по Граму
1) Изучить
морфологию
(демонстрация),
зарисовать.
2) Мазок –препарат из культуры
Lactobacillus sрр,
окраска по Граму
2) Изучить
морфологию
(демонстрация),
зарисовать.
3) Мазок- препарат из культуры
Candida spp., окраска
метиленовым синим
3) Изучить
морфологию
(демонстрация),
зарисовать.
Результат
1)
2)
3)
Выполнил ______________________ Проверил __________

71.

Протокол. Микрофлора ротовой полости (УИРС, 1 день.)
Дата,
день
исслед-я
1 день
Исследуемый
материал
Что сделать
1) Зубная бляшка
Приготовить мазокпрепарат, окрасить по Граму,
изучить микробный состав,
зарисовать
2) Зубная бляшка
в
физиологическом
растворе
Произвести посев взвеси
материала из зубной бляшки
по 0,05 мл (1 капля) на
ЖСА,
кровяной агар,
среду Сабуро
Выполнил ______________________ Проверил __________
Результат

72.

Забор и подготовка материала для
исследования
1. Одним концом экскаватора забрать материал из
зубной бляшки. Сделать мазок, окрасить по Граму.
2. Другим концом экскаватора забрать материал из
зубной бляшки. Приготовить взвесь в стерильном
физиологическом растворе (тщательно растереть
по стенке пробирки весь материал зубной
бляшки). 1 каплю этой взвеси нанести на половину
питательной среды (ЖСА, кровяной агар, среда
Сабуро), рассеять шпателем.
3. Каждый студент делает посев на половину каждой
питательной среды.