3. Калибровка. оборудование

1.

Калибровка. Оборудование

2.

вопросы
В чем отличия колориметрического и ультрафиолетового
методов анализа
В чем принципиальные отличия между группами понятий
конечная точка/кинетика/псевдокинетика и колориметрия/UV
назовите наборы с методом анализа
-
Колориметрический по конечной точке
Колориметрический кинетический
Колориметрический псевдокинетический
Ультрафиолетовый по конечной точке
Ультрафиолетовый кинетический
Ультрафиолетовый псевдокинетический

3.

Калибровка измерительных систем - установление
зависимости между показаниями средства измерительной
техники (прибора) и размером измеряемой величины.
Метод сравнения стандартного и опытного образца: расчет по
стандарту – одноточечная калибровка
Измерение по калибровочной кривой - построение
калибровочного графика по стандартным (калибровочным)
растворам: расчет по калибровочному графику –
многоточечная калибровка (линейная и нелинейная)
Методы определения аналита без использования калибратора:
расчет по фактору

4.

Одноточечная линейная калибровка
(расчет по стандарту)
При расчете по стандарту используется уравнение:
Cпробы = ОПпробы ⋅ Cкал / ОПкал ,
Cпробы – концентрация аналита в пробе
ОПпробы – оптическая плотность пробы
Скал – концентрация калибратора
ОПкал – оптическая плотность
калибратора

5.

Многоточечная калибровка
(линейная и нелинейная)
Линейная: одно-, двух-, многоточечная калибровка
Нелинейная: многоточечная калибровка
Многоточечная линейная калибровка (В 01.01, В 02.01, В 06.03,
В 03.12, В 09.02) и нелинейная ()
Многоточечная нелинейная (40.11, 41.01, 42.01, 43.01, 44.01,
45.01, 46.01, 52.01, 15.11): Spline, LogitLog4P, LogitLog5P,
Exponential 5P, Polynomial 5p, Parabola
Многоточечная калибровка используется когда концентрация
аналита не ПРЯМОпропорциональна оптической плотности
Многоточечная нелинейная калибровка: по оси абсцисс
(линейная) – концентрация аналита в калибровочном
растворе, по оси ординат (логарифмическая) - оптическая
плотность соответствующих калибровочных проб

6.

Logit Log 5P

7.

Многоточечная
линейная

8.

Полиномиальная 5Р

9.

Spline

10.

Расчет по фактору
При расчете по фактору используется уравнение:
A = F x ∆ОП/мин,
А- активность фермента, измеряемая в международных единицах (МЕ или
Е или U), определяется как количество фермента, которое катализирует
превращение 1 микромоль (мкмоль) субстрата в 1 минуту.
Каталитическая активность фермента выражается числом единиц,
рассчитанных для 1 литра биологической жидкости (Е/л).
∆ОП/мин – изменение оптической плотности за 1 мин

11.

V × 1000
F = ----------------------ε×l×v
V - объем реакционной смеси, мл;
1000 - коэффициент перерасчета миллимоль в
микромоль;
ε – миллимолярный показатель поглощения
(для НАДН составляет 6,22 л/(ммоль × см);
l - длина оптического пути (1 см);
v - объем пробы (сыворотки крови или другого
материала), мл;

12.

Когда калибровать?
Идеально:
- в каждой серии измерений
Реально:
- по мере необходимости,
- когда не проходит контроль качества,
- когда меняется серия,
- когда готовится новый рабочий реагент, вскрываются новые
реагенты
- когда долго не использовали (неделя, месяц)
- после проведения ремонта/технического обслуживания
измерительного оборудования
- при ручной постановке ежедневно

13.

Многоточечная линейная калибровка
01.01
расчет по ближайшей точке
02.01
расчет по ближайшей точке
03.12
для ручной постановки расчет по ближайшей точке,
для автоматов - калибровка по 1 точке и другая схема
добавления реагентов
09.02
для ручной постановки расчет по ближайшей точке,
для автоматов - калибровка по 1 точке
06.03
для ручной постановки и на автомате только - многоточечная
калибровка
27.03/
27.04
двухточечная

14.

Оборудование
Фотоколориметр (в отличие от спектрофотометра,
измерения ведутся в луче не монохроматического, а
полихроматического узко спектрального света, формируемого
светофильтром, Ф. просты, недороги и обеспечивают точность)
Спектрофотометр: с термостатированием (+37Сº) и
без (+25Сº)
Полуавтоматический анализатор:
наливная/проточная кювета, с термостатированием (+37Сº) и без
(+25Сº)
Автоматический анализатор

15.

Оборудование. Липиды
Комментарии
«+» - постановка возможна
«+ Клиентам не рекомендовать» - если клиент ставит, не нужно
пугать
« + » - рекомендуется ставить на данном типе оборудования
Термостат
СФ
25
13.04
Полуавтомат
37
+
13.05 подогреть реагент
+
13.06 подогреть реагент
+
проточная 25
наливная 25
+
+
проточная 37
Автомат
наливная 37
+ Клиентам не
рекомендовать
+ Клиентам не
рекомендовать
+ Клиентам не
рекомендовать
+
+
+
+
13.11
+
+
+
+
13.12
+
+
+
+
17.01
+
+
+
+
17.02
+
+
+
+

16.

Оборудование. Ферменты
Термостат
СФ
25
01.05
02.05
07.04
09.03
11.02
11.05
23.01
23.02
28.03
28.04
29.03
29.04
60.01
61.01
подогреть реагент
подогреть реагент
подогреть реагент
подогреть реагент
подогреть реагент
подогреть реагент
подогреть реагент
подогреть реагент
подогреть реагент
подогреть реагент
подогреть реагент
подогреть реагент
подогреть реагент
подогреть реагент
01.01
+
+
02.01
+
+
09.02
+
+
11.01
+
+
11.03
+
+
Полуавтомат
37
проточная 25
Автомат
наливная 25 проточная 37 наливная 37
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+ Клиентам не
рекомендовать
+ Клиентам не
рекомендовать
+ Клиентам не
рекомендовать
+ Клиентам не
рекомендовать
+ Клиентам не
рекомендовать
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
+
-
+
-
+
-
+
-

17.

Оборудование. Субстраты
Термостат
04.02
04.04
04.06
04.08
04.05/
04.09
05.01
05.02
05.03
СФ
подогреть реагент
подогреть реагент
подогреть реагент
+
+
+
Полуавтомат
наливная 25
проточная 37 наливная 37
+
+
+
+
+
+
+
подогреть реагент
+
+
25
+
37
проточная 25
+
+
+
+
+
+
+
+
+
05.04
+
+
+
06.01
06.03
06.04
08.01
+
+
+
термостат 100
+
+
+
+
08.02
+
+
+
+
+
+
+ Клиентам не
рекомендовать
08.03
08.04
12.02
12.03
15.13
19.01
19.03
21.02
15.05
подогреть реагент
подогреть реагент
+ Клиентам не
рекомендовать
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+ Клиентам не
рекомендовать
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
Автомат
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-

18.

Оборудование. Электролиты
Термостат
СФ
25
Полуавтомат
37
проточная 25
Автомат
наливная 25 проточная 37 наливная 37
14.01
+
+
+
+
16.01
+
+
+
+
18.01
+
+
+
+
18.02
+
+
+
+
20.01
+
+
+
+
22.01
+
+
+
+
24.01
+
+
+
+
24.02
+
+
+
24.03
+
+
+
24.04
+
+
+
+
25.01
+
+
+
+
26.01
+
+
+
+
+
+ (псевдокинетика)
27.02
+
27.03
+
27.04
+
27.05
+
+ Клиентам не
рекомендовать
+ Клиентам не
рекомендовать
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+

19.

Оборудование.
Специфические белки
Термостат
СФ
25
Полуавтомат
37
проточная 25
наливная 25
Автомат
проточная 37
наливная 37
40.11
+
+
+
+
41.12
+
+
+
+
42.01
+
+
+
+
43.01
+
+
+
+
44.01
+
+
+
+
45.01
+
+
+
+
46.01
+
+
+
+
52.01
+
+
+
+
15.11
подогреть реагент
+
+
+
+
15.05
+
+
+
49.01
+
+
+
+
53.01
+
+
+
+
54.01
+
+
+
+

20.

вопросы
Что представляет собой калибровка?
Какие типы калибровок используются в наборах компании?
В чем отличия между одноточечной калибровкой и расчетом по фактору?
Приведите примеры
В чем отличия в многоточечной линейной и нелинейной калибровок?
Приведите примеры
Какие рекомендации вы можете дать по калибровке наборов компании?
На каком измерительном оборудовании возможна постановка наборов
компании?
Используя инструкцию по применению (разделы состав, подготовка к
анализу, проведение анализа) определите на каком оборудовании можно
поставить наборы: В 01.01, В 02.05, В 09.02, В 24.04, В 27.05, В 13.05, В 17.01, В
43.01, В 15.11?

21.

Домашнее задание
Наборы из разделов Биохимия и Специфические белки
разделить на 4 группы по типу калибровки
(одноточечная линейная, многоточечная линейная,
многоточечная нелинейная, расчет по фактору)
Наборы из разделов Биохимия и Специфические белки
разделить на 3 группы по типу используемого
оборудования (СФ, полуавтоматический анализатор,
автоматический анализатор)