Биотехнология 2

1. Биотехнология 2

2.

ZFN
«Цинковопальцевые нуклеазы»
нуклеазы на основе белков,
содержащих домен «цинковые пальцы)
TALEN
(Transcription Activator-Like Effector Nucleases;
эффекторные нуклеазы, подобные активаторам
транскрипции)

3.

4.

Создание клонотеки кДНК
Синтез первой цепи
Фермент — обратная транскриптаза

5.

Создание
клонотеки кДНК

6. Клонирование с использованием линкеров

Вставка не содержит
сайтов EcoRI?

7. Технология SMART

8. Технология RACE

9. Создание клонотеки cDNA

cDNA Library
Construction Kit
(Clontech)

10.

GFP-белок

11.

GFP-белок

12.

GFP-белок

13.

14. Phage Display Library

15.

Бактериофаг
М13

16. Строение филаментных бактериофагов E coli (f1, fd, M13)

17. Бактериофаг М13

11 генов
5 кодируют белки капсида;
2 отвечают за репликацию фаговой ДНК;
3 за самосборку фаговых частиц
и секрецию;
1 – за связывание c одноцепочечной
фаговой ДНК в процессе,
предшествующем самосборке
фаговых частиц

18. F-плазмида

19. Жизненный цикл бактериофага

20. Репликация бактериофага М13

21. Жизненный цикл бактериофага Самосборка и секреция фаговых частиц

22.

Фаговый дисплей

23.

24.

108-109 вариантов

25.

Smith (1990)
Аффинная
селекция
(биопэнинг)
фагов

26. Типы фаговых комбинаторных библиотек

3
33
3+3
фаг-помощник
Основные типы
пептидных библиотек
различаются:
1) количеством копий
рекомбинантного
белка с
экспонированным
чужеродным белком по
отношению к белку
дикого типа на одну
фаговую частицу
2) количеством
векторных систем,
обеспечивающих
экспонирование.

27. Что можно «демонстрировать»?

.......
.....
1. Пептиды со случайной последовательностью
5-20 аминокислотных остатков
2. Антитела
3. Фрагменты белков