Паразитологические методы исследования в диагностике гельминтозов, протозоозов, трансмиссивных заболеваний

1.

.
Паразитологические методы
исследования в диагностике
гельминтозов, протозоозов,
трансмиссивных заболеваний
с.231, 238-243. Лекция.

2.

• ЛАБОРАТОРНЫЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ПАРАЗИТАРНЫХ
БОЛЕЗНЕЙ
Паразитологическая диагностика основывается на прямом
обнаружении и идентификации возбудителей. Иногда прибегают к
иммунологическим исследованиям, культивированию паразитов
или заражению ими лабораторных животных (метод биопроб).
Использование любых методов паразитологической диагностики
должно преследовать также цель выявления смешанных (двойных и
более) инфекций/инвазий, что обозначается как полипаразитизм.

3.

• В материале, направляемом на исследование в
лабораторию, паразит бывает представлен в тех
стадиях, с помощью которых он передается
(непосредственно или через переносчика) от
инфицированного индивида окружающим людям
(цисты простейших, яйца или личинки гельминтов,
трофозоиты, гаметоциты), они являются
одновременно и диагностическими.

4.

• Методы лабораторной диагностики инвазий можно разделить на
несколько групп.
• Макроскопические основаны на обнаружении на теле или в
выделениях больных достаточно крупных паразитов или их
фрагментов, видимых невооруженным глазом. Особенность
метода заключается в том, что он может применяться для
самообследования самим больным. Таким образом можно
поставить диагноз педикулеза, некоторых цестодозов,
дракункулеза.

5.

• Микроскопические основаны на микроскопировании
различных биологических сред. Суть метода заключается в
том, что паразиты различных видов имеют характерные
морфологические особенности и определенную локализацию
в организме человека. Для диагностики исследуют
окрашенные мазки фекалий, мокроты, спинномозговой
жидкости (ликвора), крови и др. При локализации паразитов
в плотных тканях проводят микроскопическое исследование
биопсийного материала (биоптатов или пунктатов). Для
биопсии иссекают небольшой участок живой ткани и готовят
из него постоянный или временный микропрепарат.

6.

• • Иммунологические
(серологические) основаны на том, что
антигены паразита вызывают иммунный ответ
организма хозяина. При этом в сыворотке
крови хозяина появляются антитела, которые
обнаруживаются с помощью специальных
иммунных реакций.

7.

• • Инструментальные основаны на
обнаружении паразитов и патологических
изменений с помощью технических средств
(рен-тгеноскопия, магнитно-резонансная
томография, ультразвуковое исследование,
фиброгастродуоденоскопия и др.).

8.

ПРИНЦИПЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГОНОСТИКИ
ГЕЛЬМИНТОЗОВ
• Материалом для исследования служат испражнения, содержимое
двенадцатиперстной кишки, кровь, мокрота, биоптаты тканей и другие
материалы. Сбор материала для исследования производят в чистую
стеклянную или пластмассовую посуду, на которую наклеивают этикетку
с указанием необходимых сведений.
Испражнения для анализов должны доставляться в лабораторию не
позднее одних суток после их выделения, а при подозрении на
стронгилоидоз - немедленно. При невозможности доставить фекалии в
указанные сроки их следует смешивать с 2-5 кратным количеством
консервирующих жидкостей и хранить до исследования в охлажденном
виде.

9.

• Исследование объектов окружающей среды на зараженность
гельминтами.
Анализ воды, почвы, овощей, различных предметов проводят для
определения их роли в передаче яиц гельминтов и заражении
человека, степени загрязненности окружающей среды и выбора
необходимых профилактических мероприятий.
В окружающей среде яйца гельминтов постепенно погибают, и
опасность для человека представляют только жизнеспособные
инвазионные яйца и личинки.
• Поэтому необходимо в каждом случае обнаружения яиц
определить степень и процент их жизнеспособности.

10.

• Это даст возможность правильно оценить роль того
или иного фактора передачи, выяснить условия и
сроки сохранения яиц в окружающей среде,
обосновать определенные мероприятия по
обезвреживанию (д е и н в а з и и) факторов
окружающей среды.
Определение жизнеспособности личинок гельминтов,
обнаруженных в мясе или рыбе, необходимо в
случаях, когда приходится решать вопрос о степени их
опасности для заражения человека или эффективности
обезвреживания загрязненного продукта.

11.

• При обнаружении в мясе финн (цистицерков)
бычьего или свиного цепней их осторожно
извлекают, помещают в подогретую до 40°С смесь
из равных частей изотонического раствора хлорида
натрия и желчи скота.
• Затем переносят в термостат при температуре 37°
С. В течение 10 мин - 1 ч головки начинают
выворачиваться, причем длительно сохраняется их
легкая подвижность. Погибшие финны при
наблюдении в течение 2 ч не выворачиваются.

12.

Подобными специальными методами определяют
жизнеспособность личинок трихинелл, яиц цестод,
личинок описторха, личинок дифиллоботриид и др.

13.

• Экологические основы профилактики инвазий
Профилактика паразитарных болезней - комплекс
мероприятий, направленных на предупреждение
инвазирования человека. Проводится с учетом
биологических и экологических особенностей паразита.
Направлена на определение уязвимого звена в цикле
развития паразита и прерывание цикла.
• Девастация (лат. devastatio - истребление, опустошение) комплекс мероприятий, направленных на уничтожение
паразитов на всех стадиях развития. Термин ввел К. И.
Скрябин в 1944 году. Конечной целью девастации является
уничтожение паразита как биологического вида и полное
освобождение определенной территории от данного
паразита.

14.

• Например, полное уничтожение пресноводных
моллюсков - специфических хозяев сосальщиков,
приведет к исчезновению и самих сосальщиков.
Различают полную (тотальную) и частичную
(парциальную) девастацию.
• Тотальная девастация - это полная ликвидация
отдельных видов паразитов. Примером тотальной
девастации можно считать полную ликвидацию
возбудителя дракункулеза в Узбекистане.

15.

• В настоящее время в связи с развитием
экологического направления в паразитологии
более перспективным является парциальная
девастация, создание так называемых коридоров
сдерживания. Коридор сдерживания - это такой
диапазон уровней численностей паразитов,
который сводит к минимуму риск заражения
человека. Примером парциальной девастации
можно считать резкое снижение заболеваемости
гельминтозами в развитых странах.

16.

• Диагностика гельминтозов:
• В острой фазе, когда личинки мигрируют в тканях, используются в
основном иммунологические методы.
• Иммунологические методы используются для диагностики всех
тканевых гельминтозов (трихинеллез, токсокароз (аскариды
собак и кошек), цистецеркоз (личиночная стадия свиного цепня у
человека), эхинококкоз).
• В хронической фазе при кишечных гельминтозах используют
копроскопические методы и специальные методы исследования.
• Метод опроса имеет большое значение при подозрении на
тениидозы

17.

• Копроскопические методы.
• Простые (метод толстого мазка с целлофаном по Като)
• Методы обогащения (метод Калантарян, метод
Фюллеборна и др.)
• Специальные методы (соскоб с перианальных
складок, ректальный соскоб)

18.

Отбор проб:
Фекалии после дефекации отбирают из
разных участков в количестве не менее 50 г
(объем примерно от чайной до столовой ложки).
- Помещают в чистую (прокипяченную), сухую,
стеклянную или пластмассовую посуду с крышками.
- Стерильная стеклянная (пластиковая) посуда
требуется при заборе кала, для исследования
на амебиаз.
- Кал должен быть доставлен в лабораторию
и исследован в день дефекации, поэтому,
как правило, доставляется утренний кал
.

19.

20.

• Для обнаружения вегетативных (подвижных) форм
дизентерийной амебы необходимо кал доставить
и провести исследование не позднее 20 мин после
дефекации или 40 мин, если это время кал
сохранялся при температуре 4°С.
• - Для обнаружения вегетативных форм кишечных
простейших (лямблий, диэнтамебы и др.) в
жидком и полуоформленном "стуле" время от
дефекации до исследования должно быть по
возможности сокращено до минимума (не более 1
- 1,5 ч).

21.

• Отбор проб после лечения:
• После лечения геогельминтозов кишечника кал отбирается
через месяц после проведенного лечения, а после лечения
протозоозов кишечника кал отбирается в зависимости от
выявленного заболевания: при амебиазе, балантидиазе сразу после лечения, при лямблиозе - через неделю.
• - После лечения контактных гельминтозов: при
гименолепидозе кал отбирается через 1 и 6 месяцев после
лечения; при энтеробиозе перианальный соскоб отбирается
через 4 - 6 дней после лечения.

22.

• - После лечения биогельминтозов кал отбирается через 3 - 4
месяца после проведенного курса лечения. При первом
отрицательном результате (исследования фекалий), отбор
проб проводится еще двукратно с интервалом 2 - 4 дня,
после чего ставится окончательный результат лабораторного
анализа.
• - После лечения инвазий желчевыводящих путей контроль
эффективности можно проводить как при исследовании
кала, так и желчи, применяя соотетствующие методы
лабораторного исследования.

23.

• Метод Като:
• На предметное стекло нанести 30 - 50 мг фекалий (размером с горошину).
Растереть индивидуальной палочкой (стеклянной, деревянной).
• - Фекалии накрыть целлофановой полоской, обработанной в растворе Като.
• - Целлофан сверху притереть резиновой пробкой или специальным валиком,
ширина которого соответствует или немного больше ширины предметного
стекла, до получения тонкого, равномерного, прозрачного слоя.
• - Препарат выдержать при комнатной температуре в течение 1 ч или в
термостате при 40°С в течение 20 - 30 мин.
• - Микроскопировать при увеличении: объектив х 8 или х 10, окуляр х 7 или х 10
(для уточнения морфологического строения яиц гельминтов объектив х 40).
• Эффективность метода: позволяет просмотреть в 20 - 30 раз больше фекалий,
чем в нативном мазке. Выявляет яйца кишечных и печеночных гельминтов при
высокой и средней интенсивности инвазии. Менее эффективен для выявления
инвазий низкой интенсивности.

24.

25.

• Метод Калантарян:
• В основе метода лежит разность удельного веса
флотационного раствора NaNO3 и яиц гельминтов,
удельный вес флотационного раствора выше, в
результате яйца гельминтов всплывают на
поверхность жидкости и обнаруживаются в
поверхностной пленке.

26.

27.

28.

• Диагностика малярии:
• Микроскопирование препаратов крови (тонкий
мазок и толстая капля), окрашенных по
Романовскому - Гимзе, до настоящего времени
остается основным методом лабораторной
диагностики малярии.