Corynebacterium diphtheriae

1. Corynebacterium diphtheriae

дифтерия

2. Таксономия

• Prokaryota
Superregnum: Bacteria
Regnum: Bacteria
Group: Terrabacteria group
Phylum: Actinobacteria
Classis: Actinobacteria
Ordo: Corynebacteriales
Familia: Corynebacteriaceae
Genus: Corynebacterium,

3. род: Corynebacterium виды:

C. accolens – C. afermentans – C. ammoniagenes – C. amycolatum –
C. appendicis – C. aquilae – C. argentoratense – C. atypicum – C. aurimucosum –
C. auris – C. auriscanis – C. betae – C. beticola – C. bovis – C. callunae –
C. camporealensis – C. capitovis – C. casei – C. caspium – C. ciconiae –
C. confusum – C. coyleae – C. cystitidis – C. diphtheriae – C. durum – C. efficiens –
C. equi – C. falsenii – C. fascians – C. felinum – C. flaccumfaciens – C. flavescens –
C. freneyi – C. glaucum – C. glucuronolyticum – C. glutamicum – C. halotolerans –
C. hoagii – C. ilicis – C. imitans – C. insidiosum – C. iranicum – C. jeikeium –
C. kroppenstedtii – C. kutscheri – C. lipophiloflavum – C. liquefaciens –
C. macginleyi – C. mastitidis – C. matruchotii – C. mediolaneum –
C. michiganense – C. minutissimum – C. mooreparkense – C. mucifaciens –
C. mycetoides – C. nebraskense – C. nigricans – C. oortii – C. paurometabolum –
C. phocae – C. pilosum – C. poinsettiae – C. propinquum –
C. pseudodiphtheriticum – C. pseudotuberculosis – C. pyogenes – C. rathayi –
C. renale – C. resistens – C. riegelii – C. sepedonicum – C. simulans – C. singulare –
C. sphenisci – C. spheniscorum – C. striatum – C. suicordis – C. sundsvallense –
C. terpenotabidum – C. testudinoris – C. thomssenii – C. tritici –
C. tuberculostearicum – C. ulcerans – C. urealyticum – C. variabile –
C. vitaeruminis – C. xerosis

4. Наиболее значимые виды

C.diphtheriae biovar gravis
C.diphtheriae biovar mitis
C.diphtheriae biovar belfanti
C.diphtheriae biovar intermedidius
C.kutscheri
C.pseudodiphtheriticum
И др указаны в пособии

5. морфология C.diphtheriae

• Молиморфизм
• в культуре одного штамма могут быть
длинные, изогнутые и изящные палочками
и короткие,
• толстые со вздутиями на одном или обоих
концах, придающими им сходство с
булавой или булавкой,
• ветвящиеся формы с зернами волютина и
без них.

6. Мазки чистой культуры C.diphtheriae

• неравномерно окрашеные клетки иззв
наличию в них метахроматических гранул
(или зерен волютина), которые
воспринимают любой анилиновый
краситель более интенсивно, чем
протоплазма. Более интенсивно
окрашиваются места скопления зерен
волютина, что делает их похожими на бусы.
• (См. рис 1 в пособии)

7.

Морфологические свойства

8. Культуральные свойства рода Corynebacterium

• Оптимальная температура роста t° 35-37°
• факультативные анаэробы (регенерируют энергию, используя
как молекулярный О2, так и органические соединения
• C.diphtheriae не растут на простых питательных средах, для
роста требуется питательная основа, богатая аминокислотами,
пуриновыми и пиримидиновыми основаниями,
• требует добавки добавляют 10-15% крови барана, лошади,
морской свинки, крупного рогатого скота или донора.
• С.diphtheriae не в состоянии утилизировать белки крови, т.к. не
имеют соответствующих экзопротеаз, но эти биосубстраты
микроб использует как источник аминокислот, ростовых
факторов и железа. С этой целью в питательные среды
добавляют гемолизированную кровь.

9. Морфология колоний

• Представители C.diphtheriae обладают
способностью восстанавливать теллур из
теллуритовых солей, это подавляет
нормальную микрофлору носа и ротоглотки.
• а в средах металлический теллур с
образующимся сероводородом приводит к
образованию на теллуритовом агаре колоний,
черный цвет различной интенсивности.
• См. пособие

10.

Морфология колоний

11.

Морфология колоний на КТА C.diphteriae
var. gravis
var.mitis

12.

Морфология колоний на кровяно-теллуритовом агаре

13.

Культурально-морфологические дифференциальные признаки биовариантов gravis, mitis и intermedius
признак
биовар
биовар gravis
биовар mitis
биовар intermedius
Морфология
Короткие,
беспорядочно
располагающиеся палочки
Длинные,
искривленные,
плеоморфные
палочки
Длинные, полосатые, плеоморфные палочки
Метахроматические гранулы
Мало метахромати-ческих гранул
Много метахромати-ческих
гранул
Мало метахромати-ческих гранул
Колонии на КТА
Серые или с черным центром, бледной
периферией с радиальной
исчерченностью, неровными
краями. Размер колоний через 24
ч 2-3 мм, кроша-щиеся при
прикос-новении петлей.
Темно-серые,
черные,
гладкие с ровными
краями.
Размер
колоний 1-2 мм через
24 ч.роста мягкие,
легко снимаются с
агара.
Серовато-черные, шероховатые или гладкие,
мелкие. Размер колоний менее 1 мм
через 24 ч.роста.
Рост на бульоне
Поверхностная
пленка,
бульон
прозрачен, на дне осадок.
Диффузное помутнение с
образованием осадка
Тонкое
гранулярное
помутнение,
с
последующим оседанием гранул на дно
Ферментация крахмала
+
-
-
+
+
-
-
+
-
-
-
+
Гемолиз на КА с эритроцитами:
1)кроличьим
2)бычьими
Липофильность
(способность
уси-ливать рост на среде с
добавлением 0,3% твина 80).

14.

Биохимические свойства патогенных и некоторых непатогенных
коринебактерий, встречающихся у человека и растущих на
кровяном теллуритовом агаре (КТА).
Вид
C. diphtheriae
Var. gravis
C. diphtheriae
Var. mitis
C. diphtheriae
Var. intermedius
C. diphtheriae
Var. belfanty
C. ulcerans
C.
pseudotberculosis
C. macginley
C. imitans
C. accolens
C. propincuum
цис- пиразин- нитратин
амид
ты
+
+
мочерасщепление
трегавина глюкозы мальтозы сахарозы крахмала лоза
+
+
+
-
гидролиз
желатина
-
+
-
+
-
+
+
-
-
-
-
+
-
+
-
+
+
-
-
-
-
+
-
-
-
+
+
-
-
-
-
+
+
-
в
+
+
+
+
+
+
-
+
-
+
-
+
-
-
сл.
в
в
+
+
+
-
+
+
+
-
+
в
-
+
сл.
-
н. о.
н. о.
н. о.
н. о.
н. о.
н. о.
н. о.
н. о.
н. о.
н. о.
н. о.
н. о.

15.

Характеристика вида C.diphtheriae
Микроорга-низм Нитра- Уреаза
ты
C.diphtheriae
gravis
+
-
Пирази Алкали Глюко Рибо Мальт Сахар Гликог Токсигенн
нанза
за
оза
оза
ен
ость
мидаза фосфа
таза
+
+
+
+
±
C.diphtheriae
mitis
+
-
-
-
+
(+) B +
-
-
±
C.diphtheriae
intermedius
+
-
-
-
+
+
+
-
-
±
C.diphtheriae
belfanti
-
-
-
-
+
+
+
-
+
-

16.

Биохимические свойства патогенных и некоторых непатогенных коринебактерий,
встречающихся у человека и растущих на кровяных теллуритовых средах
Вид
коринебактерий
Разложение
Токсиг
енные
св-ва
Ци
сти
наз
а
Уреа
за
гл
юк
оз
ы
сахар
озы
Редукц
ия
нитрат
ов
кра
хма
ла
Дополнительные
тесты
при идентификации
коринeбактерий
мальт
оза
трегал
оза
гидролиз
желатина
липоф
ильно
сть
С. diphtheriae
var. gravis
+/-
+
-
+
-
+
+
+
-
-
-
С. diphtheriae
var.mitis
+/-
+
-
+
-
-
+
+
-
-
-
С. diphtheriae
var.intermedius
+/-
+
-
+
-
-
+
+
-
-
+
-
+
-
+
-
-
-
+
-
-
-
С.ulcerans
+/-
+
+
+
-
+
-
+
+
+
-
C.pseudotuberculosis
+/-
+
+
+
В
-
В
+
-
-
-
С. diphtheriae
var.belfanti
чаще
чаще
-
C.pseudodiphtheriticum
(C. hofmani)
-
-
+
-
-
-
+
-
-
-
-
С. хerosis
-
-
-
+
+
-
+/-
+
-
-
-

17.

Определение сахаролитической активности
расщепление глюкозы
1
2
1.
2.
3.
4.
3
4
Отрицательный контроль
C.diphtheriae gravis
C.diphtheriae mitis
C.ulcerans

18.

Определение сахаролитической активности
расщепление крахмала
1
1.
2.
3.
4.
2
3
4
Отрицательный контроль
C.diphtheriae gravis
C.diphtheriae mitis
C.ulcerans

19.

Определение сахаролитической активности
расщепление сахарозы
1
1.
2.
3.
4.
2
3
4
Отрицательный контроль
C.diphtheriae gravis
C.diphtheriae mitis
C.ulcerans

20.

Определение нитратредуктазной активности
1
1.
2.
3.
4.
2
3
4
Отрицательный контроль
C.diphtheriae gravis
C.diphtheriae mitis
C.ulcerans

21.

Определение уреазной активности
1
1.
2.
3.
4.
2
3
4
Отрицательный контроль
C.diphtheriae gravis
C.diphtheriae mitis
C.ulcerans

22.

Определение цистиназной активности
(проба Пизу)
1
1.
2.
3.
4.
2
3
4
Отрицательный контроль
C.diphtheriae gravis
C.diphtheriae mitis
C.ulcerans

23.

Проба на токигенность

24.

• Уважаемые коллеги Вы посмотрли
• Презентацию «Дифтерия»
• Внимательно теперь изучите учебное
пособие ДИФТЕРИЯ (Биологические
свойства, выделение и идентификация
возбудителя дифтерийной инфекции)
• Кратко ответьте на те вопросы ,которые
есть в каждом разделе пособия