Общая токсикология

1. ТОКСИКОЛОГИЯ

Toxikon (греч.) - яд
Logos – учение
Учение о ядах

2.

Токсикология изучает яды и их
воздействие на физиологические
механизмы здорового организма.

3.

В токсикологии используются данные
и концепции следующих дисциплин:
фармакологии;
математики;
химии;
экологии;
зоологии;
ботаники.

4.

Различают:
сельскохозяйственную,
ветеринарную, промышленную,
судебно-медицинскую, боевых
отравляющих веществ,
биогеоценотическую, радиационную
токсикологию.

5.

Ветеринарная токсикология – наука,
изучающая действие ядовитых веществ
на организм животных, птиц, рыб, пчел с
целью разработки методов диагностики,
лечения и профилактики отравлений

6. Ветеринарная токсикология

Общая токсикология
Понятие о яде
Классификация ядов
Общие вопросы
токсикокинетики и
токсикодинамики ядов
Диагностика отравлений
Общие принципы лечения
отравлений
Профилактика отравлений
Частная токсикология
Химические токсикозы
Кормовые токсикозы
Фитотоксикозы
Микотоксикозы
Отравления, вызываемые ядами животного
происхождения
Поражение животных отравляющими веществами
Отравления полихлордибензодиоксинами (ПХДД)
и полихлорированными бифенилами (ПХБ)
Токсикологическое значение,
токсикодинамика, клинические признаки
отравления, прогноз, патологоанатомические
изменения, лечение, профилактика,
ветсанэкспертиза

7. Общая токсикология

8. Что такое яд?

С точки зрения общей токсикологии
«Любое вещество ядовито – доза
делает вещество ядом»
Парацельс

9. Что такое яд?

С биологической точки зрения
Яд – всякое химическое вещество,
которое при взаимодействии с
животным организмом вызывает со
стороны последнего патологический
процесс, иногда заканчивающийся
смертью.

10. Что такое яд?

С юридической точки зрения
Яды – химические сильнодействующие
вещества, включенные в законодательный
список, могущие в повышенных дозах
вызывать заболевание или смерть, а
поэтому подлежащие особому хранению,
учету и применению

11. Принадлежность химических веществ к ядам определяется их токсичностью

Токсичность – способность химических
веществ вызывать отравление
Отравление – патологический процесс,
возникающий в результате воздействия
на организм животного ядовитых
веществ, поступающих любыми путями
(часто это ксенобиотики)

12. Критерии токсичности веществ

Для мелких животных
ЛД50 (СК 50)
ЛД (СК)16
ЛД (СК)84
Для крупных животных
ТД50 –доза , вызывающая видимые признаки
интоксикации у 50% особей при однократном
введении внутрь или наружном применении

13. Критерии токсичности веществ

Максимально недействующая доза или концентрация (макс. НД
или макс. НК )
Максимальная доза или концентрация не вызывающая токсического эффекта (по
наиболее чувствительным тестам)
Минимально действующая доза или концентрация (мин. ДД или
мин. ДК )
Пороговая доза или концентрация вещества, вызывающая начальные признаки
интоксикации (по наиболее чувствительным тестам)
Коэффициент функциональной кумуляции
ЛД50 при многократном введении ве-ва внутрь
ЛД50 при однократном введении ве-ва внутрь
Коэффициент материальной кумуляции
уровень содержания остатков вещества в ткани в мг/кг массы
уровень его содержания в корме
Кожно-оральный коэффициент
ЛД50 (ТД50) при однократном наружном применении
ЛД50 (ТД50) при однократном введении внутрь

14. КЛАССИФИКАЦИЯ ЯДОВ

15. Химико-биологическая классификация ядов (по С.Н.Голикову)

Яды не биологической природы
Неорганические
Органические
вещества
соединения
Простые вещества:
металлы и
неметаллы
(ртуть, свинец,
мышьяк и др.)
Углеводороды и их галогенопроизводные:
метан, этан, четыреххлористый углерод и др.
Спирты и гликоли: метанол,
этиленгликоль и др.
Химические соединения:
соединения металлов (соли тяжелых
металлов и др.),
соединения
неметаллов
(кислоты,
основания, цианиды
и др.)
Эфиры, альдегиды и кетоны
(формальдегид, ацетон и др.)
Циклические и гетероциклические соединения:
амидо- и нитросоединения
бензола (фенол, пиридин,
пиперидин и их производные и др.)
Элементоорганические
соединения: ФОС, ХОС и др.
Полимеры: акрилопласты,
фенопласты и др.
Яды биологической природы
Бактерий
Низших
растений
Ботулиновый,
Столбнячный, дифтерийный,
холерный,
токсины и
др.
Грибов и
паразитических
грибов
Животных
Беспозвоночных:
простейших,
кишечнополостных, членистоногих.
Позвоночных:
рыб, земноводных,
пресмыкающихся

16. Классификация биологически активных веществ по целевому назначению

Пестициды
Микотоксины
Токсичные металлы и их соединения
Токсичные металлоиды
Полихлорированные и полибромированные
бифенилы (ПХБ, ПББ)
Соединения азота
Натрия хлорид
Яды растительного происхождения
Лекарственные средства и премиксы
Полимерные и пластические материалы
Корма новых видов

17. Классификация химических веществ по их токсичности Показатели токсичности

Единой классификации химических ве-в по
их токсичности для животных нет. Можно
использовать классификацию, принятую для
пестицидов

18. Гигиеническая классификация пестицидов по основным параметрам вредности (Л.И.Медведь, Ю.С.Каган, Е.И.Спыну, 1986)

1.
По степени токсичности при введении в желудок (ЛД50 мг/кг)
Сильнодействующие ядовитые вещества
Высокотоксичные
Среднетоксичные
Малотоксичные
2.
По кожно-резорбтивной токсичности (ЛД50 мг/кг)
Резковыраженная
Выраженная
Слабовыраженная
3.
Менее 500, кожно-оральный коэффициент менее 3
500-2000, кожно-оральный коэффициент 3-10
более 2000, кожно-оральный коэффициент более10
По кумуляции (коэффициент кумуляции, Ккум)
Сверхкумуляция
Выраженная
Умеренная
Слабовыраженная
4.
Менее 50
50-200
200-1000
более 1000
Менее 1
1-3
3-5
более 5
По степени летучести (хронические воздействия)
Резковыраженная
Выраженная
Маловыраженная
Насыщающая концентрация больше или равна токсической
Насыщающая концентрация больше пороговой
Насыщающая концентрация оказывает пороговое действие

19. Гигиеническая классификация пестицидов по основным параметрам вредности (Л.И.Медведь, Ю.С.Каган, Е.И.Спыну, 1986)

5.
По стойкости (период полураспада)
Очень стойкие
Стойкие
Умеренно стойкие
Малостойкие
6.
1- 2 года
От 6 месяцев до года
1- 6 месяцев
До 1 месяца
По бластомогенности
Явно канцерогенные
Канцерогенные
Слабоканцерогенные
Подозрительные на бластомогенность
7.
Известно возникновение рака у людей
Канцерогенность доказана на животных
Слабые канцерогены на животных
По тератогенности
Явные тератогены
Подозрительные на тератогенность
8.
По эмбриотоксичности
Избирательная
Общая
Отсутствие эмбриотоксичности
9.
Известны уродства людей и животных
Наличие экспериментальных данных на животных
Выявляется в нетоксичных дозах для материнского организма
Проявляется одновременно с интоксикацией организма матери
Эффект не отмечается при признаках интоксикаци организма матери
По аллергическим свойствам
Сильные аллергены
Слабые аллергены
Вызывают аллергическое состояние даже в небольших дозах
Вызывают аллергическое состояние у отдельных индивидуумов

20. Степень токсичности ве-в для рыб Дон-Херти (1951); В.В.Метелев и соавт (1971)

Степень токсичности ве-в для рыб определяют по показателю
СК50 – концентрации, вызывающие гибель 50% особей при
72-96-часовом их воздействии
I. Высокотоксичные – до 1 мг/л;
II. Сильнотоксичные – 1-10 мг/л;
III. Умеренно токсичные – 10-100 мг/л;
IV. Слаботоксичные – 100-1000 мг/л;
V. Очень слаботоксичные – более
1000 мг/л;

21. Степень токсичности ядохимикатов для пчел

Степень токсичности ве-в для пчел определяют по величине ЛД50
на пчелу при топикальном нанесении пестицида на
среднеспинку насекомого в виде ацетонового раствора
I. Высокотоксичные – до 1 мкг/особь;
II. Среднетоксичные – 1-10 мкг/особь;
III. Малотоксичные – 10-100 мкг/особь;
IV. Нетоксичные – более 100 мкг/особь;

22. Кожно-резорбтивная токсичность для крупных животных

определяют по коэффициенту безопасности:
Концентрация р-ра пестицида, вызывающая начальные клинические признаки интоксикации
Рекомендованная концентрация препарата для борьбы с эктопаразитами
I. Высокоопасные – коэффициент
безопасности до 3;
II. Умеренно опасные – до 3-5;
III. Малоопасные – более 5;

23. Классификация пестицидов по функциональной кумуляции (Л.И.Медведь, 1977)

Определяют по коэффициенту функциональной кумуляции
ЛД50 при многократном введении ве-ва внутрь
ЛД50 при однократном введении ве-ва внутрь
I. Сверхкумуляция –
коэффициент кумуляции
меньше 1;
II. Выраженная –
коэффициент кумуляции 1-3;
III. Умеренная –
коэффициент кумуляции 3-5;
IV. Слабовыраженная – коэффициент кумуляции
более 5.

24. Классификация пестицидов по материальной кумуляции (Л.И.Медведь, 1977)

Определяют по коэффициенту материальной кумуляции
уровень содержания остатков вещества в ткани в мг/кг массы
уровень его содержания в корме
I. *Сверхкумуляция – коэффициент материальной
кумуляции более 5;
II. **Выраженная –
коэффициент от 1 до 5;
III. Слабая –
коэффициент от0,1 до 1,0;
IV. Очень слабая –
коэффициент меньше 0,1.
___________________________________________
* Не допускаются к применению в ветеринарной практике.
** Допускаются к применению на сельскохозяйственных
животных с установлением регламентов их применения.

25.

• Токсические вещества, поступающие в
организм животных с кормом, а также
лекарственные препараты и премиксы,
должны исследоваться на
острую и хроническую
токсичность,
эмбриотоксичность,
тератогенность
гонадотоксичность и
мутагенность

26. Т.к. биологически-активные вещества могут вызывать отравления у человека и животных, то их применение следует регламентировать

27. Регламенты применения биологически активных ве-в. Принципы их нормирования в кормах и продуктах животноводства

• МДУ в кормах, в продуктах питания – предельно
допустимое количество химического ве-ва в кормах, пищевых
продуктах растительного и животного происхождения в
мг/кг массы корма (при котором ве-во не оказывает отрицательного
влияния на организм, не может содержаться в продуктах питания,
полученных от животного, выше допустимой нормы)
• ПДК в воде, воздухе, кормах - предельно допустимые
концентрации токсических ве-в в питьевой воде, воде
рыбохозяйственных водоемов, в воздухе рабочей зоны, кормах
– мг/л для воды; мг/м3 для воздуха, мг/кг для кормов
• ОБУВ – ориентировочный безопасный уровень вещества в
воздухе (мг/м3).

28. Регламенты применения биологически активных ве-в. Принципы их нормирования в кормах и продуктах животноводства

• мин. ДД - минимально действующая доза
• макс.НД - максимально недействующая (безвредная) доза
• Lim ac – минимальная пороговая доза токсического ве-ва в
мг/кг при однократном введении внутрь или подкожно,
вызывающая у животных нарушения жизнедеятельности,
выходящие за пределы приспособительных физиологических
реакций
• Zac – зона острого токсического действия = KL50/Lim ac. Чем
больше эта величина, тем безопаснее данное химическое
вещество
• Zah - зона хронического действия = Lim ac/Lim ch

29. Регламенты применения биологически активных ве-в. Принципы их нормирования в кормах и продуктах животноводства

• «время ожидания» - срок (в днях) от
момента последней обработки участков
(кормовых культур, лугов, пастбищ) до
уборки урожая на корм животным или их
выгона на обработанное пастбище.
• «сроки убоя» в днях

30.

Основной юридический документ,
регламентирующий применение
пестицидов в сельском хозяйстве –
«Инструкция по технике
безопасности при хранении,
транспортировке и применении
пестицидов в сельском хозяйстве»
- включает перечень и характеристику
основных пестицидов по гигиенической
классификации

31. Классификация химических веществ по степени опасности (ГОСТ 12.1.007-76)

Показатель
Предельно допустимая концентрация (ПДК) в воздухе, мг/кг
Средняя смертельная доза в
желудок, мг/кг
Средняя смертельная доза на
кожу, мг/кг
Средняя смертельная концентрация в воздухе, мг/м3
Коэффициент возможного
ингаляционного отравления
(КВИО)
Зона острого действия
Zac=KL50 /Lim ас
Зона хронического действия
Zah=Lim ac/Lim ch
1-й класс,
чрезвычайно
опасные
2-й класс,
высоко
опасные
3-й класс,
опасные
4-й класс,
незначительно
опасные
Менее 0,1
0,1-1,0
1,0-10,0
Более 10,0
Менее 15
15-150
151-5000
Более 5000
Менее 100
100-500
501 -2500
Более 2500
Менее 500
500 - 5000
5001-50000
Более 50000
Более 300
300 - 30
29 - 3
Менее 3
Менее 6.0
6.0 – 18.0
18.1 – 54.0
Более 54.0
Менее 10.0
10.0 – 5.0
4.9 – 2.5
Менее 2.5

32. Классификация пестицидов по степени опасности, предложенная ВОЗ (1979)

ЛД50 для крыс, мг/кг
Класс
1.а. Крайне опасные вещества
при попадании через
рот
Твердые
вещества
жидкости
5 и менее
20 и менее
10 и менее
40 и менее
20 - 200
10-100
40-400
200-2000
100-1000
400-4000
Более 2000
Более 1000
Более 4000
1.б. Очень опасные вещества
5-50
2. Умеренно опасные вещества
Более 500
Твердые
жидкости
вещества
50-500
3. Малоопасные вещества
при попадании через
кожу

33. Причины и условия отравлений

Причины разные, но главные – нарушения в
- кормлении
- уходе
- содержании животных
Пути проникновения ядов в организм:
через рот
через кожу
через дыхательные пути

34. Клинические признаки отравления

Острая форма отравления
Чаще –однократное поедание в
больших количествах сильно
ядовитых растений, кормов,
воды
Внезапное наступление
болезненных явлений:
расстройства функции ЦНС,
колики, понос, вздутие живота,
нарушение дыхания, чсс, частое
мочеиспускание, сыпь,
слюнотечение, температура тела
как правило нормальная.
В случае летального исхода –
смерть через несколько часов
или 1-2 дня
Хроническое отравление
Как результат многократного
проникновения относительно
небольших доз яда , дающих
материальную или
функциональную кумуляцию
Долгое время может оставаться
незамеченным – медленное
развитие патологического
процесса
Клинические признаки
выражены не ярко – колики,
тимпания, понос или запор и др.
расстройства жкт.
О способности ядов вызывать
хроническое отравление судят по
коэффициенту кумуляции

35. Коэффициент кумуляции Ккум

Ккум =
Суммарная доза ве-ва, вызывающая гибель
50% животных при многократном введении
_________________________
Доза ве-ва, вызывающая гибель 50%
животных при однократном введении

36.

Токсичность вещества зависит от
• - фармакокинетики и фармакодинамики ядов
• - внутренних (эндогенных) условий: вид, порода,
пол, возраст, живая масса, масть, общий тонус и
реактивность организма, состояние нервной
системы и т.д.
• - внешних (экзогенных условий): характер
кормления, содержание, уход, эксплуатация
животных, климат, свет, тепло, влага и т.д.

37. Избирательная токсичность

• - различия в чувствительности
животных разных видов к одному и
тому же токсическому веществу

38. Идиосинкразия и привыкание животных к ядам

Идиосинкразия – повышенная чувствительность ,
характеризуется различными болезненными явлениями
(рвотой, поносом, кожными сыпями и т.д.)
Привыкание – развитие устойчивости к яду в процессе
онтогенеза (напр. у аборигенных животных к ядовитым
местным растениям)

39. Антагонизм в действии ядов – основа антидотной терапии

Антагонизм
одно ве-во уменьшает действие другого
Прямой
Косвенный (разные точки приложения)
Конкурентный (обратимый) – эффект ве-ва А
устраняет эффект ве-ва Б
Неконкурентный (необратимый) –эффект вещества А
не устраняет эффект вещества Б
Физический
Химический
Физиологический

40. Токсикокинетика ядов

-
рассматривает закономерности
всасывания, распределения, накопления,
метаболизма (биотрансформации) и
выведения ядовитых веществ при остром
и хроническом отравлении животных
-
См. презентацию по токсикокинетике

41. Токсикодинамика

- влияние токсического ве-ва на организм
Изучает эффекты, механизмы действия,
локализацию действия и виды действия
ядов
См. презентацию по токсикодинамике

42. Диагностика отравлений

Основана на комплексных исследованиях
Анамнестические данные с учетом хозяйственной обстановки;
Анализ клинических симптомов отравления,
морфологических и биохимических изменений крови и
результаты патологоанатомических исследований;
Результаты обнаружения и количественного определения
ядовитых веществ в органах и тканях отравленных животных
в случае их падежа или вынужденного убоя;
Обнаружение и количественное определение ядовитых
веществ в кормах воде, на пастбище и др. объектах внешней
среды, с которыми имели контакт пострадавшие животные.
Особое значение имеет правильное взятие проб, их хранения и
пересылки, соблюдение сроков исследования.

43. Предубойная диагностика отравлений животных

Отличительные особенности (от инфекционных и
незаразных болезней):
внезапное наступление признаков болезни с острым течением и
сравнительно быстрой гибелью животных;
массовость заболевания, которое протекает с одинаковыми
клиническими признаками у животных разных возрастных групп;
массовое заболевание животных обычно совпадает с изменениями в
режиме кормления и содержания животных;
снижение температуры (кроме отравления производными
нитрофенолов).

44. Общие признаки отравления

изменение поведения, выраженная слабость, шаткость в
походке, снижение аппетита, сонливость, опускание
головы, рвота, расстройство центральной нервной
системы, расширение зрачков, синюшность слизистых
оболочек, дрожание, судорожное сокращение мышц,
понос и запор, жажда, скрежет зубами, зуд, повышенная
чувствительность кожи, частое мочеотделение,
слюнотечение, у беременных самок возможен аборт.
Вместе с этим у животных развиваются признаки
поражения органов-мишеней.

45. Послеубойная диагностика отравлений животных

В случаях вынужденного убоя животных с признаками
острого или хронического отравления послеубойный
ветеринарный осмотр органов и туш проводят в обычном
порядке.
Обязательно осматривают голову, селезенку, ливер, почки,
желудок и кишечник, половые органы, вымя и тушу.
Дополнительно на почках делают глубокие продольное
разрезы и исследуют корковый, мозговой слои и почечную
лоханку, вскрывают мочевой пузырь и обращают внимание
на мочу и состояние слизистой оболочки органа,
осматривают содержимое и состояние слизистых оболочек
желудочно-кишечного тракта.

46. Послеубойная диагностика отравлений животных

Патологоанатомические изменения в тушах и органах отравившихся
животных имеют общие признаки с мясом больных инфекционными
болезнями. Состояние места зареза у туш животных, убитых в тяжелой
форме отравления, может быть ровным, слабо инфильтрированным
кровью, окраска мышц зареза такая же, что и у мускулатуры туши,
кровь плохо свертывается. Степень обескровливания туш бывает
удовлетворительной или очень плохой. В связи с этим мясо темнокрасного цвета, на разрезе мышцы сочные, кровянистые, жировая
ткань приобретает розовый цвет, в просвечивающихся под плеврой и
брюшиной кровеносных сосудах обнаруживают остатки крови,
заметно выражено кровенаполнение внутренних, особенно
паренхиматозных органов. В некоторых случаях венозная кровь алая
(отравление синильной кислотой), в других - артериальная - темная
(отравление карбамидами).

47. Послеубойная диагностика отравлений животных

Повреждение мелких кровеносных сосудов способствует попаданию в
кровь различных микроорганизмов из легких и кишечника
(сальмонеллы, эшерихии, стафилококки и др.) и прижизненному
обсеменению этими микроорганизмами внутренних органов и
мускулатуры туши (вторичная или секундарная инфекция).
С развитием интоксикации, и особенно секундарной инфекции, имеют
место выраженные изменения в лимфатических узлах. Лимфатические
узлы бывают набухшими и увеличенными, на разрезе сочными,
сиренево-розового цвета, имеют кровоизлияния и другие признаки
воспаления.

48. Послеубойная диагностика отравлений животных

В зависимости от характеристики яда, дозы ядовитого вещества,
интенсивности отравления при осмотре можно обнаружить различные
изменения во внутренних органах и на туше:
Печень геморрагична, увеличена, дряблая, темно-коричневого цвета или
глинистая, т.е. в состоянии жирового перерождения.
Желчный пузырь увеличен и наполнен вязкой желчью, на слизистой оболочке
желчного пузыря точечные кровоизлияния.
В печени, как и в других органах (почках, сердце, легких), дистрофические
изменения застойной гиперемии и геморрагического синдрома.
При острых отравлениях отмечают отек легких с образованием очагов
ателектаза.
Почки измененной консистенции, как правило, не увеличены в объеме, граница
коркового и мозгового слоев сглажена.

49. Послеубойная диагностика отравлений животных

В желудке или сычуге, а также в тонких кишках на слизистой
оболочке различной интенсивности кровоизлияния и воспалительные
процессы с образованием участков некроза.
Селезенка часто плотная.
Сердце вареного вида,
Отечность мозговых оболочек,
Желтушность жировой ткани,
Некрозы кожи,
Синюшность слизистых оболочек.

50. ЛАБОРАТОРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ С ЦЕЛЬЮ ДИАГНОСТИКИ ОТРАВЛЕНИЙ ЖИВОТНЫХ

Цель –
подтверждение диагноза на отравление
определение остаточных количеств токсического вещества в
мясе и в тканях внутренних органов
определение бактериальной обсемененности продуктов убоя.
Следует строго придерживаться правил отбора проб для
исследований

51. ЛАБОРАТОРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ С ЦЕЛЬЮ ДИАГНОСТИКИ ОТРАВЛЕНИЙ ЖИВОТНЫХ

В зависимости от назначения пробы разделяются на индивидуальные,
средние и контрольные.
Индивидуальная проба — это проба, которую отбирают в один
прием.
Средняя проба состоит из нескольких индивидуальных проб,
отобранных на различных уровнях в одной или нескольких тушах,
тарах и т.д. (определяет среднее количество продукта в одной или
нескольких партиях.
Контрольная проба — без содержания пестицида или с заведомо
внесенным количеством испытуемого препарата.

52. Отбор проб

Для исследования на содержание токсических веществ у живых
животных:
Сыворотка крови (без сгустков) – 5мл;
Цельная кровь – 10 мл;
Рвотные массы
Моча – 50 мл;
Кал
Содержимое желудка или рубца (через зонд) – 150 мл.
Корма
Все подозреваемые вещества
Содержание метгемоглобина необходимо определять в течение часа после взятия крови на
анализ (или смерти животного) либо стабилизировать метгемоглобин гемолизируя
цельную кровь небольшим количеством воды.
Остальные пробы сразу после взятия замораживаются, кровь и сыворотку держат на льду.

53. Отбор проб органов и тканей

Для исследования на содержание в тканях токсических веществ в
отдельной таре направляют 0,5 кг:
- желудка со средней пробой содержимого,
- часть тонкого и толстого кишечника с содержимым,
- часть печени с желчным пузырем,
- одну почку,
- мочу,
- скелетную мускулатуру,
иногда берут часть кожи, часть легких, трахею, часть сердца, селезенки,
головного мозга и кровь.
От мелких животных и птиц посылают целые органы или трупы.

54. Отбор проб органов и тканей

При эксгумации трупа для судебной экспертизы в лабораторию
направляют сохранившиеся внутренние органы (до 1 кг), скелетную
мускулатуру (до 1 кг), землю под трупом и над ним (0,5 кг).
В случае массовой гибели рыб в водоемах отбирают среднюю пробу
воды (до 2 л с разной глубины). Вместе с пробами отравленной рыбы
берут донный ил (0,5 кг), иногда фитопланктон.
При отравлении пчел отбирают 400 — 500 г подмора, рамку с пергой
и сотовый мед (100 г).
Корм (для животных) и его остатки берут из кормушки (по 1 кг).

55. Отбор проб органов и тканей

Для определения ядовитых растений отбирают среднюю пробу
травостоя, в 3 — 5 местах на 1 га вырезают под корень всю
растительность в рамке площадью 1 м2. Растения в свежем или
высушенном виде направляют в коробках или плетеных корзинах.
Иногда направляют пробы минеральных удобрений и ядохимикатов
как источников отравления (50 г).

56. Отбор проб органов и тканей

Для бактериологического и физико-химического исследований в
лабораторию направляют:
часть мышц сгибателя и разгибателя передней и задней конечностей
длиной не менее 8 см или кусок другой мышцы размером не менее
8x8x6 см
лимфатические узлы (поверхностный шейный, наружный
подвздошный) с окружающей их соединительной и жировой тканью
долю печени с печеночным лимфатическим узлом и желчным
пузырем без желчи
почку
селезенку.

57. Отбор проб органов и тканей

o
o
o
Плотные пробы завертывают в целлофановую пленку, лощеную или
пергаментную бумагу, или помещают в чистые стеклянные банки
(содержимое желудков или преджелудков в чистые сухие
стеклянные банки), наклеивают этикетки, нумеруют, завертывают в
общий пакет, в коробку или ящик, перевязывают шпагатом,
пломбируют или опечатывают сургучной печатью.
Упаковка должна гарантировать целостность доставляемого в
лабораторию материала.
Пересылать пробы в лабораторию нужно как можно быстрее, так как
время от взятия пробы до начала анализа может повлиять на
результат исследования. (для анализа на пестициды – не более 1-2
суток, при температуре хранения не выше -4° С)

58. Отбор проб органов и тканей

На отправляемый материал составляют сопроводительный документ, в котором
указывают вид животного, время взятия проб, перечень образцов с указанием их
массы, характера тары и упаковки, причины направления проб в лабораторию.
Необходимо отмечать наблюдаемую клиническую картину отравления, а также
подробно описывать патологоанатомические изменения, обнаруженные в органах
и тканях.
В случаях убоя животных после обработки их пестицидами следует называть
применяемый препарат, кратность его применения и дату последней обработки
скота в хозяйстве. В сопроводительном документе указывают, на какие ядовитые
вещества нужно проводить анализ.
Сопроводительный документ подписывает ветеринарный врач, направляющий
пробы на исследование.
Лаборатория регистрирует прием проб с указанием времени получения,
целостности упаковки и печатей на ней.

59. СХЕМА ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

Присланный материал ориентировочно разделяют на три части
(особенно при массовых отравлениях):
одну часть опечатывают для хранения не менее 6 мес,
две части используют для качественного и количественного
анализа ядовитых веществ

60. СХЕМА ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

Анализ проводят в день поступления по плану:
а) определение наличия специфического запаха (запах чеснока отмечают при
отравлении фосфидом цинка, аммиака — карбамидом, миндаля — цианидами,
мышиной мочи — болиголовом пятнистым);
б) наличие окраски (сине- зеленую содержимого кишечника отмечают при
отравлении солями меди, серовато-черную — соединениями свинца, желтую
— ДНОК, пикриновой или азотной кислотами, соединениями хрома);
в) уровень pH (кислая (по Лакмусу) — сильными кислотами, солями тяжелых
металлов, щелочная — едкими щелочами, солями аммония и карбамидом,
карбаматами и силикатами);
г) наличие посторонних включений (кристаллы солей и пестицидов, кусочки
свинца, семена и другие части ядовитых растений).
Для проведения анализа необходимо иметь реактивы х.ч., ч.д.а., ос.ч. (особой
чистоты).

61. ПОРЯДОК ВЕДЕНИЯ ДОКУМЕНТАЦИИ И ОФОРМЛЕНИЯ ЗАКЛЮЧЕНИЯ

Все химические исследования по каждой экспертизе
выполняет от начала до конца один химик-токсиколог.
Все выполненные операции при проведении анализа в
хронологической последовательности заносят в рабочий
журнал.
В конце исследования составляют акт химикотоксикологического исследования, являющийся
юридическим документом.
Диагноз на отравление ставит практический врач или
комиссионно.

62. Выделение яда из пробы

Сухое озоление проводят под действием высокой температуры (до 500 °С)
в муфельной печи. Этот метод в основном используют для выделения
металлов.
Мокрое озоление проводят при помощи концентрированных
неорганических кислот, чаще всего смеси азотной, серной кислот и
окислителей. (так можно обнаружить ртуть, медь, цинк, мышьяк,
свинец, барий)
Метод отгонки с водяным паром или дистилляции используют для
легколетучих химических соединений (формальдегида, фенола, синильной
к-ты, некоторых ХОС и ФОС, др. ве-в). Пробу тщательно измельчают до
кашицеобразного состояния или же разрушают неорганической кислотой,
разбавляют водой, а затем воду перегоняют, нагревая колбу или подавая в
нее пар от парообразователя. Токсические вещества переводятся в
дистиллят.

63. Очистка и концентрация проб

Освобождение проб от примесей, мешающих
определению (жиры, пигменты, воск, белки, соли и др.)
различными способами очистки: омыление,
вымораживание, осаждение, перераспределение из одного
органического растворителя в другой с помощью
специальных колонок и др.
Для повышения чувствительности метода анализа,
экстракты концентрируют до небольшого объема,
обычно 0,5—5 мл.
Для концентрирования используют специальные аппараты
Кудерна—Данича, вакуум-ротационные испарители.
Концентрирование также можно проводить в токе воздуха или азота.

64. Методы определения токсических веществ в объектах окружающей среды, тканях животных и продуктах животноводства

Биологические методы
Биохимические методы
Химические методы
Физико-химические методы:
- методы хроматографии (колоночная, бумажная, тонкослойная ТСХ, газожидкостная – ГЖХ и жидкостная);
- полярография;
- ультрафиолетовая и инфракрасная спектрометрия;
- атомная абсорбция;
- методы нейтронно-активационного анализа

65. Биологические методы

Основаны на чувствительности низших животных, растений или
тканей к действию токсического вещества. Используют табельных
лабораторных животных: белых мышей, крыс, кроликов,
однодневных цыплят, рыб, культуры тетрахимена пириформис.
Обладают высокой чувствительностью, однако в большинстве своем
они неспецифичны и не позволяют установить вид токсического
вещества.
Применяют для общей токсикологической оценки кормов при
отравлениях животных на первой стадии лабораторного
токсикологического исследования. С помощью этих методов можно
установить отравление и исключить заболевания другой этиологии.

66. Биохимические методы

Основаны на подавлении некоторыми токсическими веществами
активности отдельных биохимических систем.
Например ферментный метод определения фосфорорганических
и карбаматных инсектицидов. Соединения этих групп в условиях in
vitro подавляют активность холинэстеразы. Чувствительность
метода достигает 0,01—0,001 мг/кг.
Обладают групповой специфичностью (позволяют установить всю
группу в целом, не давая возможности установить вид ФОС).
Кроме этого некоторые ФОС, в частности производные тио- и дитиофосфорных кислот, очень слабо ингибируют активность
фермента in vitro и нуждаются в предварительной активации.

67. Химические методы

Основаны на количественном определении осадка или окрашенного
комплекса, образуемого при взаимодействии открываемого
вещества с другим химическим соединением.
Химические методы анализа, применяемые в ветеринарной
токсикологической практике, основаны на
осаждении (определяют некоторые алкалоиды, натрия хлорид, и др ве-ва), низкая чувсвительность, недостаточная специфичность и точность
титрометрии - недостаточно чувсвителен,
колориметрии/фотоколориметрии и
спектрофотометрии - определение интенсивности окраски цветных
комплексов – более чувствителены и точены

68. Физико-химические методы Хроматография

Высокая специфичность, точность, возможность определения сразу нескольких химических
соединений
Тонкослойная хроматография (ТСХ). Определение многих пестицидов, алкалоидов,
микотоксинов, органических соединений тяжелых металлов. Метод прост по технике
использования, не требует сложного оборудования, обладает достаточно высокой
специфичностью и чувствительностью (0,05— 1,0 мкг в пробе).
Газовая хроматография. Для одновременного разделения смеси химических веществ, их
последующей идентификации и количественного определения. (Разделение смеси
осуществляют на стеклянных или металлических колонках длиной 1—3 м, заполненных твердым
адсорбентом с нанесенной на него жидкой фазой). Индикацию разделенных химических веществ
осуществляют с помощью детектора. Абсолютная чувствительность детектирования
различных химических соединений достигает 0,01-0,02 нг в пробе, относительная
чувствительность — 0,1-0,5 мкг/кг. Но не позволяет прямым способом разделить и
идентифицировать вещества, не обладающие летучестью и не способные прямым путём
переходить в газообразное состояние.
Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) принцип тот же, но можно
разделить твердые и жидкие смеси не превращая их в газообразное состояние. Недостаток –
ограниченное число детектирующих систем (1 спектрофотометр)

69. Физико-химические методы Спектрометрия

Ультрафиолетовая спектрометрия - поглощение растворами химических
веществ лучей в ультрафиолетовом спектре.
Инфракрасная спектрометрия основана на поглощении химическим
веществом лучей в инфракрасной области спектра. Применяют главным
образом для расшифровки структуры выделенного химического вещества.
Атомно-абсорбционная спектрометрия основана на поглощении
отдельными атомами химических элементов световых лучей в определенной
области спектра. По степени поглощения лучей определяют количественное
содержание ве-ва. Определение металлов и металлоидов (ртуть, свинец,
кадмий, медь, цинк и др.).

70. Физико-химические методы

Нейтронно-активационный анализ - основан на облучении
пробы нейтронами, в результате чего возникает наведенная
радиация, по степени которой и определяют количественный
уровень содержания исследуемого элемента.
Однако метод требует сложного оборудований поэтому
малоприемлем в практических условиях.

71. Критерии оценки методов определения остатков токсических веществ.

Чувствительность
Точность
Определяемость

72. Критерии оценки методов определения остатков токсических веществ.

Чувствительность метода — наименьшее количество
химического вещества, открываемое при заданных условиях метода.
Абсолютная чувствительность — наименьшее количество
вещества, которое можно определить данным методом или реакцией,
лежащей в ее основе. (Так, с помощью газожидкостной хроматографии можно
определить 0,05 нг ТХМ-3. Однако для исследования используют лишь часть
аликвоты, предназначенной для анализа, которая соответствует определенной части
пробы.) Поэтому для полной характеристики метода целесообразно
ввести такое понятие, как
Относительная чувствительность — чувствительность по
отношению к одному и тому же объему или массе. Обычно
относительную чувствительность принято выражать в мг/кг пробы.

73. Критерии оценки методов определения остатков токсических веществ.

Точность метода — различие между истинной и
экспериментально найденной величиной.
Точность - это величина стандартного относительного отклонения,
установленного по результатам воспроизведения методики при
внесении данного количества вещества в пробу.
Определяемость метода — средняя величина, показывающая
процент открытия вещества в пробе после его внесения из
стандартного раствора в количествах, соответствующих пределу
определения и максимально возможному уровню содержания.

74. ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ ОБНАРУЖЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ МЕТАЛЛОВ И МЫШЬЯКА

Обнаружение цинка. 1—2 мл минерализата разбавляют водой (1:1),
после чего 2 — 3 капли нейтрализуют 25%-ным раствором аммиака (по
лакмусу) и одну каплю наносят на сухую фильтровальную бумагу,
пропитанную ранее насыщенным раствором мочевины. После
выдерживания в течение 1 мин над отверстием банки с 25%-ным
раствором аммиака бумагу высушивают на воздухе и опрыскивают из
пульверизатора свежеприготовленным раствором дитизона в бензоле (5
мл дитизона растворяют в 10 мл бензола). При наличии цинка
появляется красно-малиновое пятно.
Обнаружение меди. Каплю минерализата, обработанного, как описано
выше, наносят па полоску фильтровальной бумаги, пропитанной 4%иым раствором натрия силиката, выдерживают 1 мин над раствором
аммиака, высушивают и опрыскивают спиртовым раствором
рубеановодородной кислоты (0,1 г в 10 мл спирта). При наличии меди
появляется темно-зеленое пятно.

75. ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ ОБНАРУЖЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ МЕТАЛЛОВ И МЫШЬЯКА

Обнаружение ртути. На беззольный фильтр наносят каплю
суспензии йодистой меди (5,3 г калия йодида растворяют в 10 — 15
мл воды), добавляют 40 мл 10%-ного раствора меди сульфата.
Образовавшийся осадок фильтруют, промывают до полного
обесцвечивания и смывают водой в мерную колбу на 50 мл
(суспензия пригодна в течение 6 мес) и через 2 — 3 мин на то же
место помещают каплю разбавленного миперализата. При наличии
ртути появляется красное или красно-оранжевое пятно.

76. ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ ОБНАРУЖЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ МЕТАЛЛОВ И МЫШЬЯКА

Обнаружение бария. Каплю минерализата, обработанного, как при
обнаружении цинка, наносят на сухую полоску фильтровальной бумаги,
пропитанной ранее 4%-ным раствором натрия тартрата, подсушивают па
воздухе и опрыскивают из пульверизатора свежеприготовленным
раствором натрия родизонита (0,05 г на 10 мл воды), затем буферным
раствором с pH 2,8 (1,52 мл раствора натрия гидросульфата, 35,628 г
Na2HP04 • 12 Н20 и до 1 л воды) смешивают с 8,42 мл раствора лимонной
кислоты (21,008 г и до 1 л воды). При наличии бария появляется
оранжево-красное пятно, которое исчезает после нанесения капли 10%ного раствора натрия сульфата.
Обнаружение свинца. Каплю горячего нейтрализованного
минерализата наносят на полоску фильтровальной бумаги, пропитанной
4%-ным раствором натрия тартрата, далее поступают, как при
обнаружении бария. При наличии свинца появляется пятно от краснооранжевого до фиолетового цвета, не исчезающее после нанесения
капли 10%-ного раствора натрия сульфата.

77. ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ ОБНАРУЖЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ МЕТАЛЛОВ И МЫШЬЯКА

Определение мышьяка по Зангеру—Блеку производится в приборе
Зангера — Блека, состоящем из редукционной колбы, насадки со шлифом и камеры для
свинцовой ваты, газоотводной трубки, которая состоит из двух пришлифованных трубок
(между ними помещается реактивная бумажка).
В редукционную колбу вносят минерализат в объеме, соответствующем
известному количеству патматериала, 1—2 г гранулированного цинка, не
содержащего мышьяк, 5—10 мг (на кончике скальпеля) олова хлорида, 40
— 50 мл 15 — 20%- ного раствора серной кислоты и быстро
присоединяют насадку со свинцовой ватой, пропитанной 5%-пым
раствором ацетата свинца, и реактивной бумажкой (фильтровальная
бумага, пропитанная ранее 5%-ным спиртовым раствором ртути
бромида). По окончании реакции (через 1 — 1,5 ч) определяют
количество мышьяка путем сравнения интенсивности окраски (от желтой
до темно-коричневой) бромно-ртутной бумажки со стандартной шкалой,
заранее приготовленной поэтому же методу.

78.

79.

80. Отбор проб

Упаковывают пробы в банки с притертыми пробками, пластмассовые
пакеты и опечатывают сургучной печатью.
К упакованным пробам должны быть приложены: перечень проб и
сопроводительное письмо с описанием симптомов отравления и
указанием предполагаемого токсического вещества, а также акт
патологоанатомического вскрытия.

81. Отбор проб органов и тканей

Для исследования на содержание в тканях токсических веществ:
пробы мышц,
жира,
массой по 200 г
почек
печени
Пробы других органов при наличии в них патологических изменений.
При вынужденном убое животного необходимо направлять содержимое
преджелудков или желудка.