Методы измерения
План презентации
Принципы детекции
Мультиволновая светодиодная технология
Принцип измерения (подробное описание)
Методы измерения
Клоттинговый метод
Хромогенный метод
Иммунотурбидиметрический метод
Алгоритмы измерения
Алгоритмы измерения
Percentage detection method
Percentage detection method
Percentage detection method
Percentage detection method
Rate method
Rate method
1.87M
Категории: МедицинаМедицина ФизикаФизика

Методы измерения PUR

1. Методы измерения

2. План презентации

01
Принципы детекции
03-2
Rate Method
02
Методы измерения
03-3
VLin Integral Method
03
Алгоритмы измерения
03-1
Percentage Detection Method

3. Принципы детекции

01
Принципы детекции

4. Мультиволновая светодиодная технология

Фотодиод
Галогеновая
лампа
Источники света:
• 340 нм
• 405 нм
• 575 нм
• 660 нм
• 800 нм
Оптическое
волокно

Свет от галогеновой лампы
рассеивается на длинах волн: 405, 575,
660, 800 нм с помощью 4 видов
фильтров.

Оптическое волокно переносит
спектроскопический свет к детектору,
через кювету с реакционной смесью.

Каждые 0,1 секунды фотодиод
улавливает проходящий свет и
преобразует его в электронные
сигналы.

Микропроцессор преобразует эти
сигналы в dOD/мин (дельта оптической
плотности/мин) и время свертывания
крови (в зависимости от метода
измерения).

5. Принцип измерения (подробное описание)

02
Методы измерения

6. Методы измерения

Клоттинговый метод
■ Основан на определении времени



образования сгустка.
Измеряется изменение светопоглощения.
Мутность изменяется, когда фибриноген
превращается в фибрин под действием
тромбина.
Определяется активность отдельных
звеньев системы свертывания и
фибринолиза.

7. Клоттинговый метод

Хромогенный метод
■ Целью этих анализов является измерение



концентрации определенной молекулы в
плазме крови пациента.
Реагенты содержат:
Активатор: активирует определенный
фермент
Субстрат: является мишенью
активированного фермента. После
активации он изменяет цвет.
Фермент образует комплекс с искомым
веществом, после чего происходит
изменение интенсивности окраски, которая
прямо пропорциональна концентрации
искомого аналита.
Измеряется поглощение света.
28.03.2019 • 8

8. Хромогенный метод

Иммунотурбидиметрический метод
■ Плазма содержит антигены в неизвестной



концентрации.
Реагент содержит латекс, покрытый
антителом.
Комплексы [АГ-АТ] образуются в кювете и
визуализируются латексом. Плазма
становится более мутной с увеличением
образования комплексов [АГ-АТ].
Измеряется поглощение света.
28.03.2019 • 9

9. Иммунотурбидиметрический метод

03
Алгоритмы измерения

10. Алгоритмы измерения

Алгоритм
Percentage detection method
Описание
Алгоритм используется для оценки клоттинговых
тестов. Измеряется время свертывания
Rate method
Алгоритм используется для оценки хромогенных и
иммунотурбидиметрических тестов. Рассчитывается
разница в светопоглощении
Vlin integral method
Алгоритм используется для оценки
иммунотурбидиметрических тестов. Рассчитывается
разница в абсорбции.

11. Алгоритмы измерения

Percentage detection method
Инициирование образования сгустка
■ Регистрируемое пропускание света находится на
самом высоком уровне, поскольку бедная
тромбоцитами плазма и диспергированные
частицы фибрина пропускают свет. Стартовые
реагенты добавляются для того, чтобы начать
реакцию.
Образование сгустка
■ Регистрируемое светопропускание находится на
самом низком уровне, так как фибриноген
блокирует световой поток.

12. Percentage detection method

Анализ




Отслеживание различий в
интенсивности света останавливается,
как только будет идентифицирована
конечная точка реакции или после
отсутствия изменений в интенсивности
света.
В конце измерения фиксируется
начальная точка реакции (= базовая
линия, bH, 0%) и конечная точка
реакции (= 100%).
Определение точки считывания для
свертывания и времени свертывания
крови по оси абсцисс.
Выдача результата в [с], или в других
единицах, например, в %.
стартовая точка
реакции
50% время свертывания
конечная точка реакции
Время (секунды)

13. Percentage detection method

Rate method
Инициирование хромогенной реакции
■ По истечении времени инкубации образца плазмы с
низким содержанием тромбоцитов и промежуточных
реагентов, добавляют субстратный реагент. Субстрат
расщепляется его ферментом (параметр измерения или
продукт измеряемого параметра).
Хромогенная реакция
■ Когда субстрат расщепляется, раствор образца-реагента
меняет цвет на желтый пропорционально объему
расщепленного субстрата. Свет, попадающий в кювету,
поглощается или рассеивается. Меньшее количество
света достигает детектора и соответствует количеству
расщепленного субстрата.

14. Percentage detection method

Rate method



Каждая комбинация тест-реагент имеет
свой определенный диапазон измерения,
в котором реакция является линейной.
Эта область ограничена начальной и
конечной точками. Анализатор
вычисляет разницу в интенсивности
света (оптической плотности) в
определенном временном отрезке.
Разница (в dOD) переносится на
калибровочную кривую и конвертируется
в выдаваемые единицы измерения,
такие как %.
Данный метод используется для оценки
хромогенных и иммунологических тестов.
Светопропускание (%)
Анализ
Линейный
участок
конечная
точка
реакции
стартовая
точка
реакции
Время (секунды)

15. Percentage detection method

Vlin integral method
Добавление латексных частиц, покрытых антителами
■ Латексные частицы, покрытые антителами добавляют после
инкубации образца плазмы бедной тромбоцитами с
промежуточными реагентами. Множество мелких частиц
практически полностью блокирует проходящий свет.
Формирование комплексов AГ-AТ
■ Антитела (AТ) из образца взаимодействуют с латексными
частицами, покрытыми антигенами (AГ) и образуют
комплексы AГ-AТ (AГ в избытке). Свет проходит между
комплексами AГ-AТ и попадает на датчик.

16. Rate method

Vlin integral method
Анализ
Регистрация изменений в
интенсивности света на протяжении
всего заданного времени измерения
(=диапазон измерения).

Линейный диапазон кривой (зависит
от образца и реагента) определяется
с помощью касательной линии.

Определение начальной и конечной
точки линейного диапазона.

Вычисление разницы в оптической
плотности (dOD) измерения.
Светопропускание (%)

Измеряемый
диапазон
Линейны
й участок
конечная
точка
реакции
стартова
я точка
реакции
Время (секунды)

17. Rate method

Спасибо за внимание!
English     Русский Правила