Исследование антиоксидантных и антипролиферативных свойств некоторых полифенолов

1.

ИССЛЕДОВАНИЕ АНТИОКСИДАНТНЫХ
И АНТИПРОЛИФЕРАТИВНЫХ СВОЙСТВ
НЕКОТОРЫХ ПОЛИФЕНОЛОВ
Выполнила: магистрант 2 курса Нигматова К

2.

АКТУАЛЬНОСТЬ РАБОТЫ
• Цель : исследование антиоксидантных и антипролиферативных свойств
некоторых полифенолов
• Задачи:
-изучить антиоксидантные свойства кверцетина, дигидрокверцетина,
рутина и их супрамолекулярные комплексы с ГК
-изучить антипролиферативные свойства кверцетина,
дигидрокверцетина, рутина и их супрамолекулярные комплексы с ГК
Объект : кверцетин,дигидрокверцетин, рутин, печени крыс
• Актуальность темы: использование антиоксидантных и
антипролиферативных свойств полифенолов в медицине

3.

АКТУАЛЬНОСТЬ

4.

АКТУАЛЬНОСТЬ РАБОТЫ

5.

ПОЛИФЕНОЛЫ

6.

7.

Глицирризиновая кислота

8.

АНТИОКСИДАНТНЫЕ СВОЙСТВА
• Полифенолы (в основном, флавоноиды и фенольные кислоты) обладают
сильной антиоксидантной активностью. Их изучают во многих странах, всего
идентифицировано в растениях более 8000 полифенолов. Согласно этим
исследованиям антиоксидантная активность зависела, от числа и положения
гидроксильных групп в молекулах флавоноидов, наличие двух гидроксильных
групп в положении орто в бензольном кольце.

9.

АНТИПРОЛИФЕРАТИВНЫЕ
СВОЙСТВА
• Они могут проявлять антипролиферативную
активность, вызывая в опухолевых клетках арест
клеточного цикла за счет снижения уровня
циклинов и циклин-зависимых киназ и
активации ингибирующих их белков.
Растительные полифенолы способны также
модулировать активность участвующих в
апоптозе белков и оказывать
проапоптотическое действие. Кроме того, они
могут ингибировать метастазирование и
ангиогенез опухолей. В основе действия
полифенолов на опухолевый рост лежит их
способность вмешиваться в систему
внутриклеточной сигнальной трансдукции и
оказывать положительное либо отрицательное
влияние на экспрессию генов, контролирующих
развитие опухоли. Эпигаллокатехин-3-галлат
вызывает остановку клеточного цикла в клетках
многих опухолей человека. В большинстве
случаев она происходит на стадии G1. В клетках
карциномы поджелудочной железы ЭГКГ
останавливает клеточный цикл в фазе G1,
регулируя уровень циклина D1, киназ CDK4,
CDK6, ингибиторов CDK р21 и р27.

10.

МЕТОДЫ
• Выделение митохондрий и их очистка
• Определение концентрации малонового диальдегида (МДА)

11.

Выделение митохондрий из печени крыс

12.

13.

Определение концентрации
малонового диальдегида (МДА)
Неферментативные Fe2+/аскорбатзависимые добавляли в среду инкубации, содержащую 125 мМ
KCl, 10 мМ Трис-HCl, pH=7,4 с 0,5 мг белка в 1 мл среды инкубации, 10-5 М FeSO4 и 2*10 - Мы
добавили за счет 4 М аскорбата. Исследуемые соединения добавляли в реакционную смесь после
добавления суспензии митохондрий. Инкубацию проводили в течение 30 мин на водяной бане при
37°С при постоянном перемешивании. Останавливали реакцию добавлением 200 мл 70%-ной
трихлоруксусной кислоты (ТХУ). Пробирки центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 мин для
удаления белковых осадков. К 2 мл надосадочной жидкости добавляли 1 мл теплого ТБК и кипятили
пробирки в течение 15 минут. После охлаждения образцов их объем доводили до 3 мл и проводили
калориметрию при длине волны 535 нм на спектрофотометре Agilent Technologies Cary-60. Молярный
коэффициент экстинкции (1,56×10-5 М-1/см-1) использовали для расчета количества
продуцируемого МДА, а концентрацию МДА определяли как нмоль МДА на 1 мг белка в среде
инкубации

14.

15.

АНТИПРОЛИФЕРАТИВНАЯ И
АНТИОКСИДАНТНАЯ АКТИВНОСТЬ НОВЫХ
ПРОИЗВОДНЫХ ДИГИДРОКВЕРЦЕТИНА
• Изучено влияние девяти новых производных дигидрокверцетина (таксифолина)
на жизнеспособность культивируемых нормальных и опухолевых клеток, их
антиоксидантную активность и взаимосвязь антиоксидантной активности с
химической структурой. Среди этих производных дигидрокверцетина
максимальную антипролиферативную активность на модели культуры
фибробластов крысы проявляли соединения КН-2, КН-4, КН-7 и КН-8, а
соединения КН-7 и КН-8 также проявляли максимальную активность на модель
культуры клеток опухоли MCF-7 (рак молочной железы человека). Максимальная
общая антиоксидантная активность наблюдалась у нативного дигидрокверцетина
и соединения КН-8. Существует сильная корреляция (с коэффициентом
корреляции 0,93) между антипролиферативным действием производных
дигидрокверцетина на фибробласты кожи мышей и клетки MCF-7 (рак молочной
железы человека).