Хроматография. История хроматографии

1.

ХРОМАТОГРАФИЯ
.
Хроматография это
не наука,
а - искусство!
Народная мудрость
1

2.

Хроматография [гр. сhrömatos − цвет +
graphö − пишу] — метод разделения и
анализа веществ, основанный на
перемещении зоны исследуемых веществ
вдоль слоя сорбента в потоке подвижной
фазы с многократным повторением
сорбционных и десорбционных актов. При
этом разделяемые вещества
распределяются между двумя
несмешивающимися фазами: подвижной и
неподвижной.
2

3. История Хроматографии

М.С. Цвет
3

4. История хроматографии

1937 г. Шваб с сотр. – анализ катионов и анионов;
С 1938 г. Н.А.Измайлов и М.C.Шрайбер - метод
тонкослойной хроматографии;
В 1941 г. английские ученые Мартин и Синдж
предложили метод распределительной хроматографии в
жидкостно-жидкостном варианте.
В 1948 г. русские ученые Е.H. Гапон и Т.Б. Гапон
предложили осадочную хроматографию, основанную на
различной растворимости осадков в подвижной фазе
1949г. Н.М. Туркельтауб, Россия - первая работа по
газовой хроматографии;
1952 г. Джеймс и Мартин применили газожидкостную
хроматографию к анализу жирных кислот.

5. Значение и роль хроматографии

В конце своего 100-летия хроматография
представляет собой:
самый распространенный и совершенный
метод разделения смесей;
уникальный метод качественного и
количественного анализа сложных
многокомпонентных смесей;
самостоятельное научное направление и
важный физико-химический метод
исследования и измерения;
препаративный и промышленный метод
выделения веществ в чистом виде;
мощную отрасль научного приборостроения.
5

6. Хроматография используется для:

для очистки веществ;
концентрирования веществ из сильно
разбавленных растворов;
разделения сложных смесей
органических и неорганических
веществ;
идентификации веществ;
определения количественного состава.
6

7. Хроматографическое разделение компонентов смеси

7

8. Классификация хроматографических методов основана на принципах:

1. агрегатное состояние фаз;
2. механизм взаимодействия сорбент –
сорбат;
3. аппаратурное оформление (техника
выполнения) процесса
хроматографирования;
4. цель хроматографирования;
5. способы проведения
хроматографического анализа.
8

9. Классификация хроматографических методов по агрегатному состоянию фаз

.
Хроматографи
я
газовая
жидкостная
жидкостьжидкостная
газожидкостная
жидкостьтвердофазная
газо-твердофазная
(газо-адсорбционная)
9

10. По механизму разделения веществ выделяется хроматография:

адсорбционная
распределительная Коэффициент распределения (К) –
это отношение концентраций вещества в неподвижной (Сs) и
подвижной (Сm) фазах: К = Сs/Сm
ионообменная хроматография
эксклюзионная хроматография (гель-
хроматография)
аффинная хроматография
осадочная хроматография,
адсорбционно-комплексообразовательная
10

11. Тонкослойная хроматография

Метод ТСХ основан на перемещении
зоны вещества в плоском слое сорбента
небольшой толщины, нанесенного на
инертную подложку из стекла,
металлической фольги или
синтетической пленки
Бумажная хроматография- зона
вещества перемещается в листе
специальной бумаги.
11

12. Плоскостная хроматография

хроматографические камеры
хроматографические пластинки
пульверизатор
12

13. Набор для тонкослойной хроматографии (ТСХ)

13

14. Процесс хроматографирования (восходящая ТСХ)

14

15. Процесс хроматографирования

15

16. Процесс хроматографирования (горизонтальная (круговая) БХ и ТСХ)

16

17. Вещества в ТСХ характеризуются подвижностью: Rf – относительная скорость перемещения компонентов в тонком слое.

Величины Rf рассчитываются из экспериментальных данных
Rf =
l1
l2
l1 – расстояние от
стартовой линии до центра
пятна,
l2 – расстояние,
пройденное растворителем
от стартовой линии до
границы фронта
растворителя
17

18. Значение Rf

Rf характеризует положение пятна на
хроматограмме.
Это константа для данного вещества на данном
сорбенте в данной системе растворителей.
На величину Rf влияют:
качество и активность сорбента, его
влажность,
толщина слоя,
качество и природа растворителя,
техника эксперимента (способ нанесения
пробы, способ детектирования) и др. факторы.
По значению Rf идентифицируют вещества
Rfх = Rfст.
18

19. Качественный анализ

Хроматограмма 10 эфирных масел,
проявлена ванилином
19

20. Детектирование аминазина и его метаболитов различными реагентами (реактив Марки, реактив Фреде, УФ-свет,реактивДрагендорфа)

20

21. Идентификация веществ методом ТСХ

1) Сравнение значений Rf и окраски пятен
испытуемого вещества с табличными
данными Rfх = Rfст.табл. ;
2) Расчет и сравнение значений Rfотн.
R f ,отн
R f ,i
R f ,ст
3) Метод свидетелей
Rfх = Rfст.

22. Схема разделения смеси методом восходящей тонкослойной хроматографии

линия фронта
L
li
линия старта
Смесь
А
В
С
Rf
li
L
22

23. Количественное определение веществ методом ТСХ

S
C
S
Sx
1
2
3
x
Хроматограмма
1
2
3
C
Калибровочный график
23

24. Бумажная хроматография

24