Серологические методы исследования (serum-сыворотка). Сероидентификация

1.

Серологические методы
исследования
(serum-сыворотка)
Сероидентификация.
Реакция агглютинации

2.

Контрольные вопросы
1. Что такое Сероидентификация?
2. Иммуногенез?
3. Исследуемая сыворотка.
4. Диагностические сыворотки: получение,
классификация (поливалентные,
монорецепторные, адсорбированные)
5. Титр диагностической сыворотки
6. Что такое р-ция агглютинации - название Ат,
Аг и осадка
7. ОРА. Нарисовать стекло и подписать

3.

4.

• Сероидентификация – это идентификация
выделенной чистой культуры по АГ
свойствам
• Иммуногенез – процесс образования
специфических АТ в организме хозяина.
Свойство иммунной системы.
• В образовании АТ участвуют
иммунокомпетентные клетки – клетки,
участвующие в процессе иммуногенеза :
Макрофаги (моноциты крови и гистиоциты
тканей)
Т- хелперы
В- лимфоциты (образование АТ)

5.

6.

• Если активный центр АТ (паратоп)
соответствует детерминанте АГ (эпитоп) –
ГОМОЛОГИЧНЫ! В результате
взаимодействия образуется иммунный
комплекс

7.

Серологическая реакция в две фазы:
1) специфическая невидимая —
непосредственное соединение антигена с
антителом
2) неспецифическая видимая — конечный
результат реакции

8.

В серологии используются сыворотки :
Сыворотка больного (исследуемая) АТ ?
Кровь из локтевой вены на тощак 5-10 мл
1час в термостат для тромбообразования
Центрифуга или холодильник (не более 24ч)
Сыворотка отсасывается пипеткой.
Сыворотка прозрачная (бледно-желтая)
Диагностическая сыворотка АТ!
Иммунизация животных 3х кратно
На высоте иммунного ответа кровь
сыворотка
Определяют титр АТ
Сыворотку в ампулы – лиофильная сушка

9.

Титр АТ в сыворотке – это наибольшее
разведение сыворотки , при котором
серологическая реакция видима глазом.
Виды диагностических сывороток:
Поливалентная – содержит АТ к групповым,
видовым, типовым АГ
Монорецепторная –содержит АТ только к 1
виду АГ, остальные адсорбированы.
Адсорбированная – часть АТ удалена методом
адсорбции. Например : удалены групповые АГ.
Могут быть поливалентными и
монорецепторными

10.

Реакция агглютинации РА
• Склеивание и выпадение в осадок
корпускулярных АГ (микробов или др.клеток)
под действием АТ в присутствии электролита.
Образовавшийся осадок называется
агглютинат.
• АТ – агглютинины
• АГ – агглютиноген
• Осадок – агглютинат.

11.

РА с целью сероидентификации :
Компоненты:
1. Физ. Раствор
2. Выделенная чистая культура - АГ?
3. Диагностическая сыворотка - АТ!
Подготовка диагностической сыворотки:
В асептических условиях вскрыть ампулу
Довести до первоначального объема
Приготовить рабочее разведение Для ОРА – 1:5
ДЛЯ РРА – 1:50

12.

• На первом этапе сероидентификации
ставится ориентировочная реакция
агглютинации – ОРА на стекле.
Требование !!!
Нанесенные на стекло капли не должны
сливаться!

13.

При учете результатов учет начинают с
контролей!
Контроль АГ – к. выделенной чистой культуры
(ставится для исключения спонтанной
агглютинации) – контроль мутный без
хлопьев!
Контроль АТ – к. диагностической сыворотки.
Сыворотка должна оставаться прозрачной!
Учет опыта:
При гомологичности выделенной чистой к-ры и
сыворотки образуется АГГЛЮТИНАТ – хлопья
на фоне просветления.