Культивирование бактерий с использованием питательных сред

1. Культивирование бактерий с использованием питательных сред. Дифференцировка разных групп микроорганизмов по их основным свойствам

2.

Культивирование бактерий– это один из основных
приемов в микробиологии. Для роста и развития
бактерийв природе и в лабораторных условиях
необходимо наличие питательных веществ для
энергетических и конструктивных реакций.
Выращивание и поддержание микробных культур в
лаборатории основано на моделировании
естественных условий обитания данного организма
в лаборатории, а также на знании особенностей
обмена веществ.

3. Для культивирования необходимо:

1) соответствующая среда;
2) правильно произведенный посев;
3) оптимальные условия: температура, влажность, аэрация
(снабжение О2) или создание бескислородных условий для
анаэробов;
4) определенной время для выращивания (чаще – 24 час).

4. Требования к питательным средам

а) среды должны быть питательными - содержать все
необходимые для жизнедеятельности вещества;
б) иметь определенное значение рН; для большинства
патогенных микробов оптимальным является рН 7,2-7,4;
в) обладать буферностью – содержать вещества,
нейтрализующие продукты обмена микроорганизмов,
для того чтобы не изменялось значение рН среды;
г) быть изотоничными - осмотическое давление в среде
должно быть таким же, как внутри клетки;
д) быть стерильными для получения чистой культуры;
е) содержать достаточное количество Н2О, т.к. бактерии
питаются по законам осмоса и диффузии;
ж) обладать определенным окислительновосстановительным потенциалом, для аэробов rH2 – не
ниже 10; для анаэробов – не выше 5;
з) быть прозрачными;

5. Этапы приготовления среды

1) варка;
2) установление
оптимальной
величины рН;
3) осветление;
6)
стерилизация;
5) разлив;
4) фильтрация;
7) контроль.

6. Основные принципы культивирования микроорганизмов на питательных средах

1.Использование
всех необходимых для
соответствующих микробов питательных
компонентов.
2.Оптимальные температура, рН, гН2,
концентрация ионов, степень насыщения кислородом, газовый состав и давление.
3.Концентрация ионов водорода. Ионы Н+ и ОНнаиболее подвижны из всех ионов, поэтому уже
малейшие изменения их концентрации
оказывают на микроорганизмы сильное влияние.
Поэтому поддержание заданной оптимальной
величины рН имеет существенное значение для
роста. Большинство микроорганизмов лучше
растет при рН 7.

7. Дифференцировка разных групп микроорганизмов по их основным свойствам

По типу дыхания
По отношению к температурному
режиму

8. По типу дыхания

Облигатные (строгие) аэробы. Им необходим молекулярный
(атмосферный) кислород для дыхания.
Микроаэрофилы нуждаются в уменьшенной концентрации
(низком парциальном давлении) свободного кислорода. Для
создания этих условий в газовую смесь для культивирования
обычно добавляют С02, например до 10-процентной
концентрации.
Факультативные анаэробы могут потреблять глюкозу и
размножаться в аэробных и анаэробных условиях. Среди них
имеются микроорганизмы, толерантные к относительно
высоким (близких к атмосферным) концентрациям
молекулярного кислорода, т.е. аэротолерантные, а также
микроорганизмы которые способны в определенных условиях
переключаться с анаэробного на аэробное дыхание.
Строгие анаэробы размножаются только в анаэробных
условиях т.е. при очень низких концентрациях молекулярного
кислорода, который в больших концентрациях для них
губителен. Биохимически анаэробное дыхание протекает по
типу бродильных процессов, молекулярный кислород при
этом не используется.

9. По отношению к температурному режиму

психрофильные (холодолюбивые),
мезофильные (средние),
термофильные (теплолюбивые).
Температурные границы размножения
у психрофилов составляют от 0 до
20 °С, у мезофилов - от 20 до 45 °С,
у термофилов - от 45 до 70 °С.

10.

Спасибо за
внимание!