Морфометрия языка

1.

МИНЗДРАВ РОССИИ
федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего
образования
«Дальневосточный государственный медицинский университет»
Министерства здравоохранения Российской Федерации
(ФГБОУ ВО ДВГМУ Минздрава РФ)
МОРФОМЕТРИЯ ТУЧНЫХ КЛЕТОК В
ТКАНЯХ ЯЗЫКА БЕЛЫХ КРЫС В
УСЛОВИЯХ СТРЕССА
Исполнитель:
Научный руководитель:
Флейшман Марина Юрьевна, д.м.н, доцент, профессор кафедры нормальной и патологической
физиологии, главный научный сотрудник ЦНИЛ ДВГМУ
Хабаровск, 2025

2. Введение

• На
сегодняшний
день
сохраняется
актуальность
изучения морфофункциональных параметров тучных
клеток в условиях стресса, принимая во внимание
широкий спектр патологий, в которых они принимают
активное участие. Не меньший интерес представляет
поиск новых фармакологической коррекции этих
процессов.
• В данной настоящей работе изучается тетрапептид ProGly-Pro-Val (PGP-Val).

3. Цель исследования

Целью данного исследования является: изучение влияния
многократного иммобилизационного стресса на фоне
интраназального
влияния
валинсодержащего
тетрапептида PGP-Val в дозе 100 мкг/кг на показатели,
характеризующие миграцию и активность тучных клеток в
мышечном теле языка самцов белых крыс Wistar.

4. Задачи исследования

1. Оценить морфометрические параметры тучных клеток в
соединительной ткани языка белых крыс Wistar в нормальных
условиях и на фоне многократного иммобилизационного стресса.
2. Оценить морфометрические параметры тучных клеток в
соединительной
ткани
языка
белых
крыс
Wistar
при
интраназальном введении валинсодержащего глипролина PGP-Val в
дозе 100 мкг/кг.
3. Оценить морфометрические параметры тучных клеток в соедини
тельной ткани под языка белых крыс Wistar при многократном
иммобилизационном
стрессе
на
фоне
предварительного
интраназального введения валинсодержащего глипролина PGP-Val в
дозе 100 мкг/кг

5. Дизайн эксперимента

Объект
исследования:
нижняя
половозрелых белых крыс Wistar.
треть
языка
• Животные подвергались многократному интраназальному
введению пептида PGP-Val.
• Для
моделирования
иммобилизационного
стресса
применялся рестрейнер для крыс. Самец крысы
фиксировался в положении на животе и удерживался на
протяжении 4-х часов.

6. Экспериментальные группы

Интактные
контрольная группа крыс, которые не
подвергались воздействию (n=7)
Пептид
группа крыс, подвергнутых 8-дневному
интраназальному введению тетрапептида PGP-Val
в дозе 100 мкг/кг массы тела (n=8)
Иммобилизационный группа крыс, подвергнутых 4-часовому
стресс
иммобилизационному стрессу ежедневно на
протяжении 8 дней (n=10)
Иммобилизационный группа крыс, подвергнутых 4-часовому
стресс+пептид
иммобилизационному стрессу ежедневно на
протяжении 8 суток с предварительным
интраназальным введением пептида PGP-Val в
дозе 100 мкг/кг массы тела (n=9)

7. Дизайн эксперимента

• На 9 день крыс выводили из эксперимента путем
декапитации под действием рауш-наркоза парами
хлороформа.
• Извлечение и фиксация нижней трети языка
• Стандартная гистологическая обработка с последующей
заливкой
• Срезы
толщиной
10
мкм
депарафинировали
и
окрашивали комбинированным красителем по Шубичу

8. Методика морфометрии мастоцитов

Средняя плотность распределения тучных клеток в теле нижней
трети языка оценивалась с помощью микроскопа МИКМЕД-6 при
увеличении 10х100 в 10 полях зрения для каждого образца.
Оценка средней площади тучных клеток проводилась методом
компьютерной морфометрии с помощью анализатора изображения
«ToupView» и камеры «ToupCam».
Было сфотографировано и
оценено не менее 10 тучных клеток каждого образца.
Для оценки процента дегранулирующих клеток подсчёт вёлся в 50
полях зрения для каждого образца.

9.

Тучные клетки в соединительной ткани
мышечного тела языка, группа «Интактные»
Окраска основной коричневый+гематоксилин
Эрлиха Увеличение 10х100
Тучные клетки в соединительной ткани
мышечного тела языка, группа «Пептид»
Окраска основной коричневый+гематоксилин
Эрлиха Увеличение 10х100
Стрелками указаны: 1 – тучная клетка; 2 – поперечнополосатое мышечное волокно;
3 – рыхлая волокнистая соединительная ткань

10.

Тучные клетки в соединительной ткани
мышечного тела языка, группа
«Иммобилизационный стресс»
Окраска основной коричневый+гематоксилин
Эрлиха Увеличение 10х100
Тучные клетки в соединительной ткани
мышечного тела языка, группа
«Иммобилизационный стресс+пептид»
Окраска основной коричневый+гематоксилин
Эрлиха Увеличение 10х100
Стрелками указаны: 1 – тучная клетка; 2 – поперечнополосатое мышечное
волокно; 3 – рыхлая волокнистая соединительная ткань

11. Статистическая обработка результатов

Данные подвергали статистической обработке с использованием
программного обеспечения STATISTICA 10.0 и Microsoft Excel 2021.
Данные оценивались на нормальность распределения по критерию
Шапиро-Уилка.
Достоверность различий между группами оценивали по U-критерию
Манна-Уитни. Различия считали значимыми при p<0,05.
Результаты расчётов представлены в виде Ме [МКИ(25Q-75Q)].

12. Показатели плотности распределения тучных клеток в соединительной ткани мышечного тела языка белых крыс

13. Показатели средней площади тучных клеток в соединительной ткани мышечного тела языка белых крыс

14. Показатели индекса дегрануляции тучных клеток в соединительной ткани мышечного тела языка белых крыс

15. Выводы

• При
многократном
иммобилизационном
стрессе
наблюдали
увеличение плотности распределения, средней площади и индекса
дегрануляции тучных клеток в соединительной ткани языка по
сравнению с группой контроля.
• На фоне интраназального введения тетрапептида PGP-Val в дозе
100 мкг/кг наблюдали увеличение плотности распределения и
индекса дегрануляции тучных клеток в соединительной ткани
языка по сравнению с группой контроля.

16. Выводы

• На фоне интраназального введения тетрапептида PGP-Val в дозе
100 мкг/кг перед проведением иммобилизационного стресса
наблюдали уменьшение средней площади тучных клеток и индекса
дегрануляции тучных клеток в соединительной ткани языка по
сравнению с группой, подвергнутой иммобилизационному стрессу
без дополнительных воздействий.

17.

Благодарю за внимание!