6_5_Sekvenirovanie_DNK_po_Sengeru_Tekhnologia_probopodgotovka_ustroystvo_kapillyarnykh_geneticheskikh_analizatorov_sekvenatoro

1.

Секвенирование ДНК по Сэнгеру. Технология,
пробоподготовка, устройство капиллярных
генетических анализаторов (секвенаторов).
Доклад магистранта 2 курса
Андрюшаева Леонида Евгеньевича
1

2.

Секвенирование ДНК по Сэнгеру
Основной принцип: суть заключается в синтезе ДНК-копии (комплементарной цепи) на матрице с
использованием специальных терминаторов – дидезоксинуклеотидтрифосфатов (ddNTP).
Ключевые компоненты реакции:
• Матрица ДНК
• Праймер:
• ДНК-полимераза:
• Дезоксинуклеотидтрифосфаты (dNTP):
• Дидезоксинуклеотидтрифосфаты (ddNTP):
2

3.

Секвенирование ДНК по Сэнгеру
3

4.

Секвенирование ДНК по Сэнгеру
Ход процесса:
1. Экстракция ДНК;
2. ПЦР амплификация;
3. Очистка продуктов ПЦР
4. Собственно реакция
секвенирования;
5. Очистка продуктов реакции
секвенирования;
6. Капиллярный электрофорез на
приборе с использованием всех
необходимых расходных
материалов;
7. Анализ данных.
Метод Сэнгера (окончание цепи) для секвенирования ДНК
4

5.

Устройство секвенатора
Секвенатор ДНК (секвенатор) —
устройство, с помощью которого
автоматизированное определение последовательности нуклеотидов в цепи ДНК.
выполняется
Основные компоненты системы
1. Капиллярная матрица
2. Система ввода образца
3. Детекторная система
4. Система электрофореза
5. Система данных и ПО
5

6.

Дополнение
6

7.

Дополнение
7