АГУПОВ_2026

1.

«ОСОБЕННОСТИ РАЗМНОЖЕНИЯ КРЫЖОВНИКА
МЕТОДАМИ БИОТЕХНОЛОГИИ»
Докладчик: Агупов Алексей Александрович
Руководитель ВКР: доцент, к.с.-х.н. Кирина И.Б.

2.

АКТУАЛЬНОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЙ
Крыжовник – популярная ягодная культура средней зоны садоводства. Его
плоды обладают ценными пищевыми и лечебными достоинствами. Растение
относится
к
группе
трудноукореняемых
культур.
Метод
клонального
микроразмножения позволяет в короткие сроки независимо от погодных
условий
производить
высококачественный
оздоровленный
посадочный
материал.
В связи с выше указанным тема выпускной квалификационной работы
актуальна.

3. Цель исследований: оптимизация некоторых этапов клонального микроразмножения сортов крыжовника. Задачи исследований: -

определить условия введения в культуру in vitro крыжовника;
- изучить влияние типа и концентрации цитокинина на
коэффициент размножения микропобегов крыжовника;
- выделить вариант питательной среды с наибольшим
увеличением показателей ризогенеза микропобегов;
- рассчитать экономическую эффективность производства
укорененных микрорастений крыжовника методом клонального
микроразмножения.

4. КАЗАЧОК

5. СЕРЕНАДА

6. СИРИУС

7. Культивирование in vitro изолированных тканей и органов декоративным культур проводили согласно общепринятым рекомендациям

(Калинин и др., 1992; Бутенко, 1999; Першина, 2000; Джигадло и др., 2005;
Калашникова, Родин, 2007; Иванова, 2014).
Для клонального микроразмножения растений использовали минеральную основу питательных сред
Мурасиге-Скуга (Murashige, Skoog, 1962) и Кворина-Лепуавра (Quoirin, Lepoivre, 1977) дополненную
мезоинозитолом – 100 мг/л, агаром – 6-7 г/л и комплексом витаминов по прописи Мурасиге-Скуга. В качестве
источника углерода в среду вносили сахарозу, глюкозу, фруктозу, мальтозу в концентрации 10-40 г/л.
На этапе микроразмножения применяли регуляторы роста растений: цитокинин - 6-бензиламинопурин (6БАП) в концентрации 0,5-2,0 мг/л и ауксины: β-индолил-3-масляную кислоту (ИМК) или β-индолилуксусную
кислоту (ИУК) - 0,05-0,2 мг/л.
Для культивирования клематиса на этапах введения и укоренения побегов использовали пробирки
диаметром 15 мм с 10 мл агаризованной питательной среды. Субкультивирование побегов осуществляли в
широкогорлых круглых и конических колбах емкостью 250 и 300 мл с 80 и 100 мл среды соответственно.
Укорененные растения доращивали в конических колбах емкостью 200, 250 и 300 мл с 80-100 мл среды.
Колбы закрывали тонкой алюминиевой фольгой и герметизировали лентой “Parafilm”.
Культивирование растений осуществляли в специально оборудованной культуральной комнате при 16часовом световом дне с освещенностью 2000-2500 люкс (люминисцентные лампы Cool white, Groluxe),
температуре воздуха 26±20С и влажности воздуха 50-60%. Экспланты пассировали на свежую среду с
интервалом в 3-4 недели. Побеги, достигшие на среде размножения длины 1,5-2,0 см использовали для
укоренения.
В опытах по клональному микроразмножению клематиса учитывали количество инфицированных,
погибших и развивающихся эксплантов, число вновь образовавшихся почек и побегов, выход побегов длиной
1,5 см, число укоренившихся побегов, число и длину корней на укорененный побег, количество растений,
прижившихся в нестерильных условиях.
Коэффициент размножения определяли, как отношение общего числа вновь образовавшихся побегов за
пассаж к числу эксплантов, образовавших, по крайней мере, один дополнительный побег. Среднее число
корней определяли, как отношение числа образовавшихся корней к числу побегов, образовавших, по крайней
мере, один корень. Средние значения и ошибки выборочной средней определяли для каждой повторности
эксперимента отдельно, затем определяли средние значения для всех повторностей эксперимента. На каждый
вариант опыта брали по 25-30 эксплантов. Все эксперименты по размножению и укоренению побегов были
повторены не менее трех раз.

8. Рисунок 1. Развитие эксплантов крыжовника: А – сорт Сириус, Б – сорт Казачок

9.

1. Влияние гибберелловой кислоты на регенерационную способность
сортов крыжовника
Cорт
Регуляторы роста,
мг/л
Cеренада
6 БАП 0,5 (К)
18,2
12,8
6 БАП 0,5+ ГК 1,0
13,0
20,7
2,7
-
6 БАП 0,5 (К)
12,2
1,5
6 БАП 0,5+ ГК 1,0
14,1
12,1
1,5
-
6 БАП 0,5 (К)
11,6
2,6
6 БАП 0,5+ ГК 1,0
8,8
20,1
1,9
-
НCР05
Сириус
НCР05
Казачок
НCР05
Коэффициент
размножения,
шт./экспл.
Количество
побегов
>1,0 см, %

10.

2. Влияние минерального состава питательной среды на ризогенез сортов
крыжовника
Сорт
Вариант
опыта
Укореняемость через …недель, %
2
3
4
5
Казачок
1/2 МS (к)
1/2 QL
M2
0
0
0
НСР05
Серенада 1/2
МS 0
(к)
1/2 QL
0
M2
0
НСР05
Сириус
1/2
МS 0
(к)
1/2 QL
0
M2
0
НСР05
0
0
10,0
45,0
74,0
10,0
92,0
98,0
20,0
0
25,0
90,0
0
8,0
50,0
9,5
95,0
18,0
0
25,0
92,0
0
12,0
60,0
14,0
100,0
19,0
Количество
корней,
шт./эксплан
т
4,8
3,5
2,0
1,3
4,4
Длина
корней,
см
3,5
2,0
1,1
3,5
3,2
1,0
1,0
0,8
2,2
2,1
1,0
2,2
1,8
1,1
1,8
3,0
0,8
1,0
1,5

11.

3. Влияние концентрации фитогормона на ризогенез крыжовника
Вариант опыта
Коэффициент
укоренения, %
Количество
шт./эксплант
корней, Средняя
см
Казачок
MS (контроль)
MS+ИМК 0,5 мг/л
MS+ИМК 1,0 мг/л
MS+ИМК 2,0 мг/л
НСР05
82,2
82,5
90,5
80,5
-
3,2
5,5
6,6
6,0
0,32
3,1
3,3
3,7
2,8
0,1
2,8
4,9
6,0
5,5
0,44
3,2
3,4
3,9
2,8
0,1
3,2
5,5
6,6
6,0
0,40
2,8
3,4
3,7
2,2
0,1
Серенада
MS (контроль)
MS+ИМК 0,5 мг/л
MS+ИМК 1,0 мг/л
MS+ИМК 2,0 мг/л
НСР05
78,5
80,0
92,0
79,4
Сириус
MS (контроль)
MS+ИМК 0,5 мг/л
MS+ИМК 1,0 мг/л
MS+ИМК 2,0 мг/л
НСР05
85,0
90,2
94,5
82,5
длина,

12. 4. Экономическая эффективность результатов исследования

Выход
стандартных
укорененных
микрорастений со
стеллажа в год,
шт.
Общие
затраты
на
Выручка от
производство
реализации,
1 тыс.
тыс. руб.
стандартных
саженцев,
тыс. руб.
Чистый доход
от реализации
1 тыс.
стандартных
саженцев,
руб.
Рентабельность,
%
164,55
147,6
Казачок
2 300
276,0
111,45
Серенада
3 000
2900
360,0
135,00
Сириус
225,00
166,7
348,0
132,40
215,60
162,8

13.

ВЫВОДЫ
1. В качестве первичных эксплантов крыжовника эффективно использовать
верхушечных почек побегов. Оптимальный срок отбора первичных эксплантов –
начало активного роста побегов (апрель – начало мая).
2. Оптимальной для развития микропобегов различных генотипов крыжовника
на этапе пролиферации побегов в условиях in vitro является стандартная среда MS
с комплексом фитогормонов: 0,5 мг/л 6-БАП; 1,0 мл/л гибберелловой кислоты
(ГК). На данной среде отмечены наибольшие показатели коэффициента
размножения микрорастений крыжовника и количества побегов свыше 1,0 см.
3. Установлена генотипическая реакция сортов крыжовника на применение
разных питательных сред на этапе ризогенеза. Для исследуемых сортов
целесообразнее
использовать
питательную
среду
Кворина
Лепуавра,
разбавленную в 2 раза, которая способствует раннему формированию корней.
На этапе ризогенеза добавление 1,0 мг/л индолил-3-масляной кисло-ты в
стандартную питательную среду MS позволяет в наибольшей степени повысить
количество укорененных микропобегов и длину их корней.
4. Применение технологии микроклонального размножения растений
крыжовника имеет высокий уровень рентабельности в пределах 147,2-166,7%.

14.

РЕКОМЕНДАЦИИ ПРОИЗВОДСТВУ
При микроклональном размножении различных сортов крыжовника для
развития их микропобегов на этапе пролиферации следует использовать
стандартную питательную среду Мурасиге Скуга (MS) с комплексом
фитогормонов: 0,5 мг/л 6-бензиламинопурина; 1,0 мл/л гибберелловой кислоты.
На этапе ризогенеза для увеличения выхода стандартных микрорастений следует
использовать стандартную питательную среду MS с добавлением 1,0 мг/л
индолил-3-масляной кислоты.

15.

СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ