Требования к отбору проб биологического материала для микробиологических исследований

1. Требования к Отбору проб биологического материала для проведения микробиологических исследований

ТРЕБОВАНИЯ К ОТБОРУ ПРОБ
БИОЛОГИЧЕСКОГО
МАТЕРИАЛА ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ
ИССЛЕДОВАНИЙ
ВРАЧ-ЛАБОРАНТ (ЗАВЕДУЮЩИЙ ЛАБОРАТОРИЕЙ)
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРИИ
ВИТЕБСКОГО ОБЛАСТНОГО ЦГЭИОЗ БУХАНЦОВА А.Н.

2. Основные задачи преаналитического этапа

ОСНОВНЫЕ ЗАДАЧИ
ПРЕАНАЛИТИЧЕСКОГО ЭТАПА
Качественно произвести забор;
Обеспечить сохранность
биоматериала;
Минимизировать влияния различных факторов, влияющих на
его качество.

3. ОБЩИЕ ПРАВИЛА ЗАБОРА БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА ДЛЯ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

Забор биологического материала для микробиологических исследований
необходимо производить до начала лечения этиотропными препаратами, или в
период их максимального выведения, т.к. под их воздействием микроорганизмы
изменяются и теряют способность к росту на искусственных питательных средах;
Материал берут непосредственно из очага инфекции или исследуют клинически
значимый биологический материал, отбор проводится с соблюдением правил
асептики с целью снижения риска контаминации посторонней микрофлорой;
Материал собирают в стерильную лабораторную посуду с соблюдением условий,
сроков хранения и доставки;
Пробы маркируют и транспортируют в медицинских контейнерах с
сопроводительным документом установленной формы;
Материал доставляют в лабораторию в максимально короткие сроки (для
большинства образцов не позднее 1,5-2 часов после их получения);
Допускается хранить и транспортировать биологический материал с
использованием транспортных систем (24-48 часов).

4.

5. методические документы

МЕТОДИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ
При организации микробиологических исследований обоснованные показания
для проведения исследований, кратность забора и правила взятия биологического
материала, условия транспортировки и хранения изложены:
в приказе Министерства здравоохранения Республики Беларусь от 06.05.2026
№522;
в инструкциях по применению от 19.03.2010 № 075-0210 «Микробиологические
методы исследования биологического материала»,
от 08.05.2009 № 026-0309 «Микробиологическая диагностика заболеваний,
вызываемых энтеробактериями»,
от 19.03.2010 № 086-0310 «Бактериологическая диагностика дисбактериоза
кишечника»
от 10.06.2022 № 023-1221 «Алгоритм лаборатоной диагностики коклюша,
паракоклюша и видоспецифической диффференциации их возбудителей» и др.

6. Правила забора и доставки крови

Дезинфицируют флакон и резиновые пробки 70% этиловым спиртом,
выдерживают 1 минуту;
Место венепункции обрабатывают 70% этиловым спиртом
(антисептиком), затем 1-2% раствором йода, снова спиртом;
Место венепункции нельзя пальпировать после обработки спиртом
(антисептиком);
После высыхания минимум из двух разных вен отбирают кровь;
Для взрослых не менее 10 мл из каждой, детей > 5 лет-5 мл, <5 лет-2 мл.
Трехкратно, с интервалом в от 30 мин до 12 часов между 1-ой и 3-ей
пробой (в зависимости от клинического состояния пациента);
Транспортировка проб в лабораторию осушествляется при комнатной
температуре не позже 2-х часов после их получения (посевы во
флаконах до транспортировки хранят в термостате (35-37)°С
или при комнатной температуре):
Категорически запрещается забирать кровь
из установленного венозного катетера (кроме ИКП).

7. Правила забора и доставки ликвора

Взятие материала производится при люмбальной пункции;
Ликвор набирают в стерильные герметично закрывающиеся пробирки
либо в специальные флаконы с готовой питательной средой для
гемокультиваторов;
Для бактериологического исследования следует производить забор не
менее 2-2,5 мл ликвора;
Одновременно необходимо набрать несколько капель ликвора в
отдельную стерильную герметично закрывающуюся пробирку для
выполнения бактериоскопии (окраска по Граму);
Ликвор незамедлительно следует доставлять в лабораторию;
При невозможности быстрой доставки возможно его хранение при
температуре 37 оС не более 2-х часов

8. Правила забора и доставки раневого отделяемого

В случае поверхностной раны с помощью шприца получают аспират из глубины раны используя
стерильный контейнер или шприц объемом не менее 1 мл;
В случае глубоких ран и абсцессов поверхность раны дезинфицируется 70% спиртом, а затем 1%-ным
раствором йодоната, материал берется из глубины (также отбираются и стенки абсцесса) с помощью
шприца;
Для получения аспирата мягких тканей берут наиболее глубоко расположенные участки патологической
ткани, избегая контакта с поверхностью раны и транспортируют их в стерильных контейнерах;
Из-за высокого риска контаминации использование тампонов для забора проб из раны допустимо
только в случае невозможности получения материала выше указанными методами;
В случаи его использования взятие производится круговыми вращательными движениями от центра к
периферии пораженного участка, при подозрении на присутствие в материале анаэробов используют
дополнительный тампон;
Промежуток от времени начала забора материала до начала исследования должен быть
не более 2-х часов, можно использовать транспортные среды, которые обеспечивают сохранность проб 24 –
72 часа;
Материал доставляется в лабораторию при комнатной температуре.

9. Правила забора и доставки мокроты

МОКРОТА – является материалом для микробиологического исследования при
ларингите, трахеите, бронхите, пневмонии;
должна собираться в присутствии медицинского работника;
отбирается утренняя порция натощак (пациент предварительно должен почистить
зубы, десны, язык и слизистую оболочку щек зубной щеткой и прополоскать рот
водой);
должна собираться после нескольких глубоких кашлевых движений;
в случае небольшого количества мокроты допустимо введение в трахею
специальным шприцом 10 мл стерильного изотонического раствора натрия хлорида
или 25 мл 3-10% раствора натрия хлорида с помощью небулайзера с последующим
сбором откашливаемого материала;
сроки доставки мокроты в лабораторию не должны превышать 2 часа от момента
ее получения;
в исключительных случаях допускается хранение в холодильнике (не более 6
часов)

10. Правила забора и доставки мочи

Исследуют утреннюю среднюю порцию свободно
выпущенной мочи в количестве не менее 1 мл;
Для сбора мочи используют стерильные контейнеры;
Перед взятием проводят тщательный туалет наружных
половых органов с мылом и кипяченой водой;
Не следует принуждать пациента к приему жидкости для форсирвания диуреза
(это приведет к снижению числа бактерий в моче вследствии ее разбавления);
Нельзя собирать мочу из мочеприемника, судна, постоянного катетера;
Недопустимо бактериологическое исследование мочи, собранной в течение
суток;
Доставка мочи в лабораторию осуществляется в течение 2-х часов после взятия
материала либо в течение 8 часов при условии ее хранения в холодильнике

11. Правила забора и доставки материала из ВДП

При РИНИТЕ - микробиологическое исследование применять
не рекомендуется. Культуральное исследование следует выполнять при:
- затяжном течении заболевания (более 14 дней) на фоне адекватной
терапии;
- обследование на носительство S. aureus по эпидпоказаниям;
- наличие налетов (пленок) на слизистых оболочках носовых ходов для исключения
«Corynebacterium diphtheriae».
Материал со слизистой носа отбирают стерильным ватным тампоном, смоченным
физ.раствором, вводят тампон в носовой ход на глубину 2,5 см, вращательными движениями
собирая материал со слизистой носа. Используют транспортные среды.
При СИНУСИТЕ - категорически не рекомендуется использовать мазки из носовых
ходов, носоглотки, промывные воды пазух и материал, полученный при эндоскопическом
исследовании, так как данные образцы контаминируются нормальной микрофлорой
верхних дыхательных путей, что не позволяет адекватно трактовать результаты
исследования.
Материалом для микробиологического исследования является содержимое пазухи,
полученное путем аспирации при пункции, доставляют материал в лабораторию
непосредственно в шприце без иглы с защитным колпачком, время доставки не должно
превышать 2-х часов (материал хранится только при комнатной температуре).

12. Правила забора и доставки материала из ВДП

При ТОНЗИЛЛИТЕ, ФАРИНГИТЕ – рутинное
микробиологическое исследование не рекомендуется
(т.к. в абсолютном большинстве случаев заболевание имеет
вирусную природу).
Микробиологическое исследование следует выполнять:
с целью верификации возбудителя в случае подозрения на вторичный (специфический)
тонзиллит;
в случае клинической неэффективности проводимой терапии в течение 48 часов;
у пациентов с врожденными/приобретенными ИД состояниями;
при тяжелом, затяжном (более 2-х недель) и хроническом течении заболевания;
при подозрении на гонококковую этиологию заболевания;
при наличии налетов (пленок) на слизистых оболочках ротоглотки и миндалинах, для
исключения «Corynebacterium diphtheriae».
Материал забирают натощак или через 2 часа после последнего приема пищи
стерильным тампоном

13. Перечень исследований, которые проводит микробиологическая лаборатория ВОЦГЭиОЗ

ПЕРЕЧЕНЬ ИССЛЕДОВАНИЙ, КОТОРЫЕ ПРОВОДИТ
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ ВОЦГЭИОЗ
Нозология/биологический материал
Методы исследования
Менингококковая инфекция
Менингиты/ликвор, кровь
Бактериоскопический метод (микроскопия)
Бактериологический метод (посев)
Коклюш/ носоглоточный мазок
Бактериологический метод (посев);
ПЦР
Микоплазма/носоглоточный мазок
ПЦР
Кишечные инфекции (сальмонеллез, дизентерия и др.
УПМ)/ректальные мазки или фекалии
Бактериологический метод (посев)
Инфекции мочевыводящих путей/моча
Бактериологический метод (посев)
Отделяемое верхних и нижних отделов дыхательных путей/мазки из
зева, носа, мокрота
Мазки на микрофлору и чувствительность к АБП
Бактериологический метод (посев)
Лайм-Боррелиоз/сыворотка крови
Бруцеллез/сыворотка крови
ИФА Ig M, Ig G
ИФА Ig M, Ig G
РА (Хеддельсона, Райта)
РНГА (в ЛД ООИ РЦГЭиОЗ, г. Минск, ул. Казинца, 50)
ИФА
Иерсиниоз, Псевдотуберкулез
ГЛПС, Лептоспироз, Туляремия/сыворотка крови
Бактериологический метод (посев)

14.

Объект испытаний
Регламентация
ТНПА на отбор проб
Примечание
ГН, утв. пост. МЗ РБ от
05.07.2017 № 73
АМИ.МН 0022-2021
Отбирают специалисты
лаборатории
БГКП
Ps.aeruginosa
S.aureus
Наличие роста тесткультуры
Инструкция
4.2.10-22-1-2006
Инструкция
4.2.10-22-1-2006
Приказ МЗ РБ № 1065 от
25.11.2002
Методические указания от
28.02.1991 № 15/6-5
Дезкамера
Наличие роста тесткультуры
Приказ МЗ РБ № 1065 от
25.11.2002
Стерильность
ИМН
Дез. растворы
на контаминацию
Стерильность
СанПиН от 16.12.2013 № 128
Инструкция 3.5-51-2006, утв.
постановлением МЗ РБ
23.11.2006 № 175
Инструкция
4.2.10-22-1-2006
Инструкция 4.2.10-22-102-2005
Дез. растворы
на антимикробную
активность
Вода на Legionella
pneumophila
Антимикробная
активность
фактическое значение
Временная инструкция от
24.12.1998 № 4718
Legionella pneumophila
ГН, утв. Постановлением СМ
РБ от 25.01.2021 №37
СТБ ISO 19458-2011, ГОСТ
31942-2012
Смывы на Legionella
pneumophila
Legionella pneumophila
фактическое значение
Legionella pneumophila
инструкция по применению от
20.06.2019 №003-0519 и
Воздушная среда
Определяемый
показатель
ОМЧ
АМИ.ВТ 0024-2025
S.aureus
Смывы
Биотесты
Микробное загрязнение Инструкция 4.2.10-22-1022005
Смывы с рук не берем по причине
отсутствия регламентации (только
по факту, если вы для себя
заказываете эти исследования
Предварительно заказать
культуру по тел. 37-96-74,
67-85-00