Лекция Грамположительные палочки

1. Грамположительные палочки

Оренбургская государственная медицинская академия
Кафедра микробиологии, вирусологии, иммунологии
Грамположительные
палочки
к.м.н. Азнабаева Лилия Мидехатевна

2. ГРАМПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ ПАЛОЧКИ

НЕ ОБРАЗУЮЩИЕ СПОР
◼
род Mycobacterium
M. tuberculosis
M. bovis
M. africanum
◼
род Corynebacterium
C. diphtheriae
род Lactobacillus
◼ род Bifidobacterium
◼ род Listeria
◼ род Erysipelothrix
◼ род Actinomyces
◼
СПОРООБРАЗУЮЩИЕ
• род Bacillus
B. anthracis
• род Clostridium
C. perfringens
C. histolyticum
C. novyi
C. septicum
C. tetani
C. botulinum

3. Род Сorynebacterium

4. Д И Ф Т Е Р И Я

ДИФТЕРИЯ
Эдвин Клебс (1834—1913)
Фридрих Лёффлер (1852—1915)
Обнаружен Э.Клебсом в 1883 году
Выделен Ф.Леффлером в 1884 году

5.

Этиология дифтерии
Таксономия
Род Corynebacterium
Вид С.diphtheriae
Биовары gravis, mitis, intermedius, belfanti
Морфология
окраска по Нейссеру
окраска по Леффлеру
окраска по Граму

6.

Этиология дифтерии
Культуральные свойства
Биовар gravis
R-форма колоний
Биовар mitis
S-формы колоний
Биохимические свойства
Высокая ферментативная активность.
Положительная проба Пизу (продуцирует цистиназу)
Отрицательная проба Закса (отсутствие способности
ферментировать сахарозу, продуцировать уреазу,
индол, разлагать мочевину)

7.

Патогенность Corynebacterium diphtheriae
ФАКТОРЫ
Факторы
колонизации
Корд-фактор
(нарушение дыхания
в митохондриях)
Миколовые кислоты
Адгезины (пили)
Микрокапсула
(антифагоцитарный фактор)
Факторы агрессии
Гуалуронидаза
Нейраминидаза
N-ацетилнейрамиатлиаза
Токсины
Гемолизин
Экзотоксин –
гистотоксин

8. Механизм действия гистотоксина

9. Эпидемиология дифтерии

Источники
Больной
Бактерионоситель
токсигенного
штамма
МЕХАНИЗМЫ
и
ПУТИ ПЕРЕДАЧИ
Воздушно-капельный
Контактно-бытовой
Алиментарный
Восприимчивость
100%
ГРУППЫ РИСКА:
Дети ясельного и
школьного возраста
Заболеваемость в России - 5 на 10 000 000 населения.

10.

Патогенез дифтерии
ВХОДНЫЕ ВОРОТА ИНФЕКЦИИ
Коагуляционный некроз слизистой оболочки
ТОКСИНЕМИЯ
Фибринозное воспаление
Круп, асфиксия

11. Лабораторная диагностика

Экспресс-метод
Пленка, отделяемое
носоглотки, глаз, ушей,
уретры, раны и др.
Микроскопия
Окраска
метиленовым синим (по Леффлеру)
кристалл-виолетом (по Граму)
Полимеразная
цепная
реакция
Реакция
Непрямой
Гем
Агглютинации
Иммуно
Ферментный
Анализ

12.

Лабораторная диагностика
Бактериологический метод
Кровяно-теллуритовая среда,
среда Бучина,
среда Клауберга
Пленка, отделяемое
носоглотки, глаз, ушей,
уретры, раны и др.
Чистая культура
Микроскопия
Ферментативные свойства,
пробы Пизу, Закса
Антибиотикограмма
Фаговары
Выявление
токсигенности
реакция
Оухтерлони

13.

Лечение дифтерии
Эмиль фон Беринг (Nobel, 1901)
специфическое
Противодифтерийная
антитоксическая
сыворотка
10.000 – 100.000 АЕ
вводить методом
А.М. Безредки
неспецифическое
Антибиотикотерапия: пенициллины,
цефалоспорины, хинолоны

14.

Профилактика дифтерии
Вакцинация плановая в 3, 4,5 и в 6 месяцев.
Ревакцинация - в 18 месяцев, в 7 лет, 14 лет,
каждые 10 лет в течение жизни.
Противодифтерийный анатоксин
Титр ≥ 60 ИЕ/мл (иммуногенных единиц)
АД
АДС
АДС-М анатоксин
АД-М анатоксин
АКДС

15.

род Mycobacterium

16.

Т У Б Е Р К У Л Е З
Нобелевская премия
по медицине 1905 г.
Роберт Кох (1843-1910)
«За исследования и
открытия,
касающиеся лечения
туберкулеза»

17.

Этиология туберкулеза
Таксономия
Семейство Mycobacteriaceae
Род
Mycobacterium
Вид
M.tuberculosis, M.bovis, M.africanum
Морфология
окраска по Цилю-Нильсену

18. Строение клеточной стенки микобактерий

19. Свойства Mycobacterium tuberculosis

Гликолипиды (микозиды),
миколовые кислоты (корд-фактор)
Устойчивость
во внешней
среде
Высокая
гидрофобность
Низкий
метаболизм
Кислоты
Щелочи
Дезинфектанты
Высушивание
R-форма
Защита от
макрофага
Медленное
размножение
Вирулентность
Иммуноадъювантная
активность
Блокада фаголизосом
Нейтрализация
антибактериальных
факторов

20.

Этиология туберкулеза
Культуральные свойства
Биохимические свойства
термолабильная каталаза
ниациноная проба Конно
положительный нитратредуктазный тест

21. Распространенность туберкулеза

22. Эпидемиология туберкулеза

Источники
Больной
активной
формой
Больные
животные
(крупный
рогатый скот)
МЕХАНИЗМЫ
и
ПУТИ ПЕРЕДАЧИ
Воздушно-капельный
Воздушно-пылевой
Контактно-бытовой
Пищевой
Восприимчивость
людей
100%
ГРУППЫ РИСКА:
Дети
Пожилые
Лица
С иммунодефицитами

23. Патогенез туберкулеза

М.tuberculosis
Гликолипиды
Повреждение, активация макрофагов
Неспецифическая (доиммунная) гранулема
Иммунный ответ (аллергия),туберкулопротеины
Специфическая (постиммунная) гранулема
Репарация
Фиброз,
кальцификация
персистенция
М.tuberculosis
Очаг Гона
Скрытая инфекция
Массивный некроз,
диссеминация
Первичный
туберкулез
Гиперергия
Вторичный
туберкулез
Очаговый
Гематогенный
Бессимптомный
Хронический
Реинфекция

24. Лабораторная диагностика

Подготовительный этап
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ:
мокрота, моча, СМЖ, гной,
менструальная кровь,
промывные воды бронхов,
пунктаты тканей и полостей,
секционный материал и др.
Метод концентрации
(Обработка кислотой и
центрифугирование)
Обогащенный материал

25.

Экспресс-методы
Обогащенный материал
Световая
микроскопия
Окраска по Цилю-Нильсену
Люминисцентная
микроскопия
Окраска аурамином или РИФ
Полимеразная
цепная
реакция

26.

Бактериологический метод
Обогащенный материал
Яичные среды: среда
Левенштейна-Иенсена и др.
Окраска
по ЦилюНильсену
Полимеразная
цепная
реакция
Посев по Прайсу
Автоматизированные
системы
Антибиотикограмма

27.

Метод выявления гиперчувствительности замедленного типа
АЛЛЕРГИЧЕСКАЯ ПРОБА
ТУБЕРКУЛИН
(проба Манту)
ДИАСКИНТЕСТ
антигены ESAT6 и CFP10
Диагностика
Прогноз течения
болезни
«+» инфильтрат ≥5 мм
болезнь
скрытая инфекция
вакцинация
Нормергия (5-16 мм)
Гиперергия ( ≥17 мм)
Анергия (<5 мм)
Отбор здоровых лиц
для ревакцинации
«-» показания к
ревакцинации

28. СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПЛАНОВАЯ ПРОФИЛАКТИКА ТУБЕРКУЛЕЗА

ВАКЦИНА БЦЖ
(Bacillum Calmette Guerin, BCG)
Вакцинация всех детей
На 3-7 день жизни (род.доме)
Ревакцинация в 5-7 лет
при «-» пробе Манту

29. Род Bacillus

30.

СИБИРСКАЯ
Таксономия
Семейство
Род
Вид
ЯЗВА
Bacillaceae
Bacillus
Bacillus anthracis
Морфология
Окраска по Граму
темнопольная
микроскопия
Окраска капсулы
по методу M'Fadyean

31.

Этиология сибирской язвы
Культуральные свойства
Биохимические свойства
Сахаролитическая активность
Протеолитическая активность
Липолитическая активность
Гидролиз крахмала
Образование ацетилметилкарбинола
Выделение желатиназы
Гемолитическая активность
Лецитиназная активность
Фосфатазная активность

32. Антигенная структура Bacillus anthracis

Специфичность
Состав
Расположение
Видовой антиген
Белок
Капсула
Групповой
(соматический)
антиген
Полисахарид
Клеточная стенка
Белок
Экзотоксин
Протективный
антиген

33. Факторы патогенности Bacillus anthracis

капсула
(полипептид-полимер
D-глутаминовой кислоты)
экзотоксин
(протективный антиген,
отечный и летальный фактор)
антифагоцитарная активность
эффект аденилатциклазы,
повышение концентрации цАМФ
отеки, в том числе отек легких
цитотоксический эффект

34. Эпидемиология сибирской язвы

Почва, кожа,
шерсть, мех
Мясо, молоко
Животное
Костная мука,
пыль
Контактный путь
Алиментарный путь
Аэрогенный
(пылевой)
путь
Человек

35. Патогенез сибирской язвы

Инвазия через поврежденные покровы
Размножение микроорганизмов в месте входных
ворот (образование карбункула при кожной форме)
Бактериемия и токсинемия
Генерализованная септицемия

36. Лабораторная диагностика сибирской язвы

Экспресс метод
Содержимое везикул,
пустул, карбункула; кровь,
мокрота, испражнения,
секционный материал
микроскопи
я
Реакция Асколи
Иммуно
Ферментный
Анализ
Полимеразная
цепная
реакция

37.

Лабораторная диагностика сибирской язвы
Бактериологический метод
Микроскопи
я
Содержимое везикул,
пустул, карбункула; кровь,
мокрота, испражнения,
секционный материал
Биологический метод
Тест
«жемчужное ожерелье»
Биохимическая Лизис фагом Саратов
активность

38. Профилактика и терапия сибирской язвы

Профилактика по эпидемическим показаниям
Специфическая
Вакцина
сибиреязвенная
живая сухая для
подкожного и
скарификационного
применения
Специфическое
Глобулин
противосибиреязвенный
лошадиный жидкий
Неспецифическая
Вакцина
сибиреязвенная
комбинированная
жидкая для
подкожного
применения
Комплекс
противоэпидемических и
противоэпизоотических
мероприятий
Лечение
Неспецифическое
Пенициллины, тетрациклины,
аминогликозиды (стрептомицин)

39. Род Clostridium

40. Морфология патогенных клостридий

С. botulinum
С. tetani
Ботулизм
Столбняк
C. perfringens
C. novyi
С. histolyticum
C. septicum
Газовая
гангрена

41. Культивирование

Методы создание анаэробиоза
Использование элективных сред
Среда Вильсона-Блера
Среда Китта-Тароцци
Среда контроля стерильности
и другие

42. Идентификация микроорганизмов

Культуральные свойства
C. perfringens (КА)
С. botulinum (ЖА)
Биохимические свойства
С. tetani (КА)

43. Факторы патогенности

Ботулизм
Столбняк
Газовая гангрена
экзотоксин
экзотоксины: экзотоксины:
- лецитиназа
- нейротоксин
ботулотоксин
- цитотоксин
(тетаноспазмин) - некротоксин
- энтеротоксин
- гемолизин
(тетанолизин)
ферменты агрессии:
- коллагеназа
- гиалуронидаза
- ДНК-аза
микрокапсула

44. Эпидемиология клостридиозов

Газовая
Ботулизм
гангрена
Источник – здоровые животные и человек
(фактор передачи – почва).
раневой
пищевой
Столбняк
источник
путь
передачи
восприимчивость
100%

45. Механизм действия ботулотоксина

46. Клинические проявления действия ботулотоксина

Все яд и все лекарство – зависит от дозы
«Уколы красоты»
Птоз, диплопия, афония

47. Патогенез и клиника столбняка

Опистотонус
Тризм лицевой мускулатуры –
сардоническая улыбка

48. Патогенез и клиника газовой гангрены

Развитию газовой гангрены способствует ряд условий:
- попадание в рану ассоциации нескольких видов анаэробов,
- наличие некротической ткани,
- снижение резистентности организма (шок, кровопотеря),
- ассоциации с аэробами.

49. Лабораторная диагностика

Экспресс-методы
Отделяемое ран, кусочки тканей, кровь,
объекты окружающей среды и тд.
Реакция
Непрямой
Гем
Агглютинации
С антительным
специфическим
диагностикумом
Иммуно
Ферментный
Анализ
Выявление токсина
Встречный
Иммуно
Электро
Форез
Полимеразная
цепная
реакция
Выявление ДНК
микроорганизма

50. Лабораторная диагностика

Бактериологический метод
Посев на
элективные
среды
Отделяемое ран, кусочки
тканей, кровь, объекты
окружающей среды и тд.
Чистая культура
Микроскопи
я
Биохимические
свойства
Антибиотикограмма
Реакция
Нейтрализации
на животных

51. Лабораторная диагностика

Биологическая проба
Реакция нейтрализации на белых мышах
на примере диагностики ботулизма
Фильтрат исследуемого
биологического материала
+ 200 АЕ противоботулинической сыворотки:
тип А
тип B
тип C
тип D
Опыт 1
Опыт 2
Опыт 3
Опыт 5
Выживание
Гибель
Контроль

52.

Лечение и профилактика столбняка
Активная иммунизация
Пассивная иммунизация
- плановая (совместно с АД)
- экстренная (при ранениях)
- экстренная (при ранениях)
очищенный
концентрированный и
адсорбированный
столбнячный анатоксин
сыворотка
противостолбнячная
лошадиная

53.

Лечение и профилактика ботулизма
Специфическая терапия
Неспецифическая терапия
сыворотка
противоботулиническая
лошадиная
Промывание желудка,
кишечника
Гемосорбция
Плазмоферрез
Неспецифическая профилактика
Соблюдение технологии заготовки консервов

54. Лечение и профилактика газовой гангрены

Специфическая
Противогангренозная поливалентная лошадиная очищенная
концентрированная жидкая сыворотка (C. perfringens типа А,
C. novyi, C. septicum)
Лечение – 150000 МЕ
Профилактика – 30000 МЕ,
Неспецифическая
Первичная хирургическая обработка, «лампасные» разрезы,
ампутация, экзартикуляция
Гипербарическая оксигенация
Антибиотикотерапия

55. Спасибо за внимание