Микрофлора окружающей среды. Нормальная микрофлора человека. Дисбактериоз

1. Лекция Микрофлора окружающей среды. Нормальная микрофлора человека. Дисбактериоз.

Доцент, к.м.н. Темникова
Наталья Владимировна
ОмГМУ
2018

2. Экология микроорганизмов

Основные вопросы
1.Роль микроорганизмов в поддержании равновесия
биосферы.
2.Микрофлора основных сред обитания (почвы, воды,
воздуха).
3.Микрофлора человека.
4.Гнотобиология и гнотобиологические технологии.
5.Дисбактериозы. Препараты для их коррекции.

3.

• «Мы, по сути, совсем не осведомлены о том какие
функции обеспечивает микробная экосистема,
которая находится внутри нас и как она влияет на
наше здоровье» «Каждая новая информация
становится шокирующей для нас, потому что она
показывает как много еще нужно работать над
тем, чтобы понять тот мир, который существует
внутри нас». Доктор Дэвид Рэльман
(Стэнфордский университет), специалист по
инфекционным заболеваниям, журнал Nature.

4.

• Они представляют самую древнюю и разнообразную группу
живой природы.
• Они являются единственными формами живой природы,
заселяющими любые среды обитания, включая и высокоорганизованные организмы эукариотического мира.
• Микроорганизмы в соответствии со своими жизненными
потребностями заселяют определенные экологические ниши.
Они находятся в составе сложных ассоциаций – биоценозов с
различными типами синэргических и антагонистических
отношений.В.И.Вернадским было сформулировано учение о
биосфере как наивысшем уровне экологической интеграции.
• Экологическая микробиология изучает микробные
сообщества и взаимоотношения микро- и
макроорганизмов, совместно обитающих в общих
средах обитания.

5.

Микроорганизмы обитают во всех
природных средах и являются
обязательными компонентами любой
экологической системы и биосферы в
целом, обеспечивая ее динамическое
равновесие и кругооборот химических
элементов. Их качественный и
количественный состав в почве, воде,
воздухе, в организме человека и
животных различен.

6. Микрофлора почвы

Почва является главным резервуаром и
естественной средой обитания микроорганизмов,
которые принимают участие в процессах
формирования и очищения почвы, а также в
круговороте веществ в природе.
Их больше в увлажненной и обработанной почве (5
млрд/г), меньше в лесной почве, в песках (1
млрд/г).
Наиболее обильна микрофлора в верхнем
горизонте почвы глубиной 2,5-15 см. Здесь
протекают биохимические процессы превращения
органических веществ, обусловленные
жизнедеятельностью микроорганизмов.

7. В составе микрофлоры почвы выделяют следующие группы:

бактерии аммонификаторы, вызывающие гниение трупов, остатков
растений, разложение мочевины с образованием аммиака и других
продуктов: аэробные бактерии - B. subtilis, B. mesentericus,
Serratia marcescens ; бактерии рода Proteus ; грибы родов
Aspergillus , Mucor , Penicillium ; анаэробы - C . sporogenes ,
C . putrificum ; уробактерии;
нитрифицирующие бактерии: Nitrobacter и Nitrosomonas (Nitrosomonas
окисляют аммиак до азотистой кислоты, образуя нитриты, Nitrobacter
превращают азотистую кислоту в азотную и нитраты);
азотфиксирующие бактерии: усваивают из воздуха азот и синтезируют
белки и другие органические соединения азота, используемые
растениями;

8.

бактерии, участвующие в круговороте серы, железа,
фосфора и других элементов - серобактерии,
железобактерии и т.д. (серобактерии окисляют
сероводород до серной кислоты, железобактерии
окисляют соединения железа до гидрата окиси железа,
фосфорные бактерии способствуют образованию легко
растворимых соединений фосфора);
бактерии, расщепляющие клетчатку, вызывающие
брожение (молочнокислые, спиртовые, маслянокислые,
уксусные).
С выделениями человека и животных, с фекальнобытовыми сточными водами в почву могут попадать
патогенные и условно-патогенные микроорганизмы
(возбудители грибковых заболеваний, ботулизма,
столбняка, газовой гангрены, сибирской язвы,
бруцеллеза, лептоспироза, кишечных инфекций).

9. Микрофлора воды

10.

Вода является древнейшей средой обитания микроорганизмов.
Автохтонная (собственная) микрофлора представлена
микроорганизмами, постоянно живущими и
размножающимися в воде. В состав этой группы входят
Micrococcus candicans , Sarcina lutea, Pseudomonas fluorescens,
Bacillus cereus. Галофильные бактерии живут в соленой
(морской воде- вибрионы).
Аллохтонная (заносная) микрофлора попадает в открытые водоемы из
почвы, воздуха, организмов животных и человека и изменяет микробный
биоценоз и санитарный режим.
Количественный и качественный состав микрофлоры воды зависит от
состава и концентрации минеральных и органических веществ,
температуры, рН, массивности поступления ливневых, фекально-бытовых и
промышленных сточных вод. Количество микробов прямо
пропорционально степени загрязненности водоемов.
Вода имеет значение в распространении возбудителей кишечных инфекций, в
воде могут сохраняться энтеровирусы, сальмонеллы, лептоспиры,
возбудители холеры, дизентерии.

11. Микрофлора воздуха

• При малейшем дуновении ветра поднимается в воздух масса мелких
пылинок, а вместе с ними и микробы. Воздушный океан для
микроорганизмов — бесплодная пустыня: им там нечем питаться.
Кроме того, для многих микробов лучи солнца смертельны.
• Обычно пребывание микробов в воздухе кратковременно. Для
некоторых бактерий и грибов воздушные потоки — основной путь
распространения. Споры плесеней нередко разносятся по воздуху на
очень большие расстояния.
• Чем выше и дальше от земли, тем микробов меньше. В горном
воздухе их не так много, как в воздухе узких и пыльных улиц. Очень
мало микробов над морем, вдали от берегов. Участникам арктических
и антарктических экспедиций приходится иногда работать по колено в
ледяной воде, но обычно никто из них не заболевает заразными
болезнями, связанными с простудой. Объясняется это тем, что воздух
в полярной зоне почти свободен от микроорганизмов, в том числе и
от возбудителей болезней.

12.

• За сутки человек вдыхает около 10 тыс. л воздуха. Но в
воздухе, особенно в закрытых помещениях, могут
появиться и возбудители заразных болезней.
• Некоторые микробы (возбудители чумы, коклюша) в
воздухе быстро погибают. Но туберкулезная палочка долго
переносит высушивание. Туберкулезные палочки остаются
жизнеспособными в пыли до 3 месяцев. Вместе с
частицами пыли они разносятся по воздуху на большие
расстояния.
• В каждой капельке брызг от кашля туберкулезных больных
обнаружено до 40 тыс. туберкулезных палочек,
распространясь на 2—3 м.

13.

• Микрофлора человека

14.

• В настоящее время понятие «микрофлора
человека» утратило свою актуальность:
мы несем в своем организме не просто набор
бактерий, а настоящий биом — микробиом.
Но если биом с точки зрения экологов
представляет собой крупную экосистему,
то наше тело — это место обитания
многочисленной популяции микроорганизмов,
своего рода микробная экосистема,
характеризующаяся своей генетической
регуляцией и сложными взаимодействиями
и реагирующая на влияние факторов внешней
и внутренней среды.

15.

• Микробиом распределен в нашем организме
неравномерно, по его топографии и видовому составу
принято различать микробиом кожи, полости рта,
дыхательных путей, урогенитального тракта
и кишечника.
• Наиболее крупным микробиомом нашего тела
является, несомненно, кишечный. Он может состоять
из сотен видов различных микроорганизмов,
но у взрослого человека преобладают бактерии двух
разделов: Firmicutes и Bacteroidetes.
• Кишечный микробиом изучен лучше других
бактериальных сообществ человека, и многолетние
исследования, о которых будет рассказано ниже,
показали, что именно он в большей степени влияет
на здоровье своего носителя. ...

16. Микрофлора человека и ее значение

• Аутохтонная (присущая данной области) микрофлора
разделена на резидентную (постоянную) и
транзиторную.
• Постоянная – на облигатную и факультативную.
• На слизистых – просветная и пристеночная
микрофлора (мукозный матрикс, биопленка с
пристеночной микрофлорой), которая обеспечивает
колонизационную резистентность.
• Гнотобионты (бесмикробные животные) – для
изучения роли нормальной микрофлоры,
гнотобиологические технологии – в медицине
(лечение ожогов, иммунодефицитов).

17.

• Сформировано представление, согласно
которому микробиоценоз представляет
собой своеобразный «орган» ,
высокоорганизованную систему,
реагирующую качественными и
количественными сдвигами на
динамическое состояние организма
человека в различных условиях
жизнедеятельности, здоровья и болезни. .

18.

• Нормальная микрофлора на различных
участках тела (экотопах) отличается в
количественном и качественном отношении.
• Основные функции нормальной микрофлоры:
- защитная (колонизационная резистентность);
- иммуностимулирующая (антигенная
стимуляция);
- пищеварительная (обмен холестерина и
желчных кислот);
- метаболическая (синтез витаминов группы В, К,
никотиновой, пантотеновой, фолиевой кислот).

19.

20. Микрофлора ЖКТ

21. Микрофлора ЖКТ

• Желудочно-кишечный тракт заселен «по этажам».
• В желудке – лактобактерии, энтерококки, дрожжи,
бифидобактерии.
• Микрофлора толстого кишечника: до 95% - анаэробные
бактерии.
• АНАЭРОБЫ: Bacteroides, Bifidobacterium, Coprococcus,
Eubacterium, Clostridium
• АЭРОБЫ: Escherichia, Staphylococcus (энтерококк),
Lactobacillus, Klebsiella, Proteus, дрожжи.
• Безусловный рекордсмен по плотности микроскопического
населения — кишечник, где находится от 2 до 2,5 кг нормальной
микрофлоры. В 1 г содержимого толстой кишки насчитывается до
250 млрд. микроорганизмов

22.

Масса нормальной микрофлоры
- 2,5 – 3,0 кг
Численность микроорганизмов
только ЖКТ составляет 1012 - 1014
Состав : 17 семейств, 45 родов,
около 500 видов

23.

Микрофлора кишечника
Облигатная
(главная микрофлора)
Факультативная
• бфидо- и лактобактерии
•и
• эшерихии (кишечные палочки)
• бактероиды
• пептострептококки
• стрептококки
• энтерококки
• бациллы
•дрожжеподобные грибы
рода Candida
•энтеробактерии
• неферментирующие
грамотрицательные
палочки
• пептококки
условно патогенная
Транзиторная
сапрофитная
•дрожжи и некоторые
дрожжеподобные
грибы
•стафилококки

24.

• Контакты с бактериальными
антигенами определяют созревание
иммунной системы.
• Состав микрофлоры кишечника
косвенно отражает особенности
физиологического состояния как
защитных, так и других систем
организма в различные периоды
жизни

25.

Кишечник-часть иммунной
системы
-
В реализации иммунных механизмов на
уровне интестинального тракта
принимают участие три ключевых и
одновременно взаимосвязанных
компонента:
- Нормальная микрофлора.
Лимфоидная ткань, ассоциированная со
слизистой оболочкой кишечника
- Цитокины, как фактор межклеточного
взаимодействия.

26. взаимодействия иммунной системы хозяина и бактерий-симбионтов.

взаимодействия иммунной системы хозяина и бактерийсимбионтов.
М-клетки путем трансцитоза передают
бактериальные антигены дендритным
клеткам, те их презентируют, опосредуя Тзависимое созревание В-лимфоцитов
и способствуя секреции плазматическими
клетками IgA, который играет важную роль
в защите от патогенов.
Бактерии могут транслоцироваться также
через дендритные клетки
и презентироваться Т-клеткам лимфоузла,
индуцируя их дифференцировку.
АММП — ассоциированный
с микроорганизмами молекулярный
паттерн. В условиях гомеостаза АММП,
ассоциированные с бактериямисимбионтами, стимулируют продукцию
регуляторных цитокинов (IL-25, IL-33,
и трансформирующего фактора роста,
TGF-β). Трансдукция сигнала
на дендритные клетки стимулирует
развитие регуляторных Т-клеток
и способствует секреции IL-10.

27.

• В состоянии дисбиоза снижение
количества бактерий-симбионтов
приводит к размножению патогенов.
Патогенные АММП индуцируют секрецию
провоспалительных цитокинов (IL-1, IL-6
и IL-18), способствуя размножению
эффекторных Т-клеток. Эти Т-клетки
дифференцируются в CD4+ Th1 и Th17
и секретируют IL-17, фактор некроза
опухоли (TNF-α) и интерферон-γ (IFN-γ),
которые привлекают в очаг воспаления
нейтрофилы, защищая организм хозяина
от патогенов

28.

• Исследуя влияние бактерий на защитные механизмы
кишечника (рис. 6), ученые искусственно колонизировали
бактерией Bacteroides thetaiotaomicron кишечники
безмикробных мышей. Затем РНК кишечного эпителия
анализировали на предмет изменения экспрессии генов
Была отмечена обширная активация генов эпителиоцитов,
которые регулировали функцию эпителиального барьера
и способствовали повышению продукции рецептора к IgА.
Это исследование прекрасно отражает влияние
бактериальной колонизации на кишечник
новорожденного, ведь он в данном контексте такой же,
практически безбактериальный, организм....
Hooper L.V., Wong M.H., Thelin A., Hansson L., Falk P.G., Gordon J.I. (2001). Molecular analysis of commensal host-microbial
relationships in the intestine. Science. 291, 881–884;...

29.

• Вообще, связь колонизации бактериями-симбионтами с развитием как
приобретенного, так и врожденного иммунитета, демонстрировали
неоднократно. Было установлено, что взаимодействие рецепторов
энтероцитов и иммунных клеток кишечника с антигенами
микроорганизмов вызывает естественную, самоограничивающуюся
воспалительную реакцию. Таким способом механизмы врожденного
иммунного ответа позволяют предотвратить проникновение патогенов
через эпителиальный барьер кишечника, при этом отличая
их от безвредных симбионтов . Когда ребенок покидает утробу матери,
происходит контакт с огромным количеством бактерий. И для того
чтобы избежать непрерывной воспалительной реакции в ответ
на колонизацию кишечника, снижается экспрессия упомянутых
рецепторов, в частности TLR2 и TLR4 .У детей, появившихся на свет
раньше срока, описанные механизмы еще незрелые, что часто
приводит к развитию некротического энтероколита..
Round J.L. and Mazmanian S.K. (2009). The gut microbiota shapes intestinal responses during health and disease. Nat. Rev.
Immunol. 9, 313–323; O’Hara A.M. and Shanahan F. (2007). Gut microbiota: mining for therapeutic potential. Clin.
Gastroenterol. Hepatol. 5, 274–284; Abreu M.T., Fukata M., Arditi M. (2005). TLR signaling in the gut in health and disease.
J. Immunol. 174, 4453–4460

30.

Лимфоидная ткань, ассоциированная
со слизистой ЖКТ (МАLТ)
Иммунокомпетентные
клетки располагаются или диффузно в толще слизистой
или в виде скоплений
В тонком кишечнике-пейеровы бляшки
В толстом-солитарные фоликулы
Иммунологически в лимфоидной ткани
выделяют индуктивную
зону(распознование и презентация
антигена) и эффекторная (синтез Ig,
цитотоксичность, продукция цитокинов)

31.

Цитокины и регуляция иммунного
ответа в ЖКТ
Клетки, вовлекаемые в иммунный ответ на
микробные антигены, секретируют
растворимые медиаторы-цитокины.
Интерлeйкины
- Интерфероны
- Факторы некроза опухоли
- Хемокины
- Факторы роста колониестимулирующего
фактора
Биохимический ответ цитокинов реализуется в
форме иммунного ответа, толерантности или
иммунной патологии

32.

ИММУННАЯ
СИСТЕМА
гомеостаз
ГОРМОНАЛЬНАЯ
СИСТЕМА
Эпителий слизистой
Ig
B-клетки
CD4+ - T-клетки
ИНФ, ИЛ-5, ИЛ-6
макрофаги
и т.д.
лактоферрин,
лактопероксидаза,
лизоцим и др.
внеклеточные ферменты,
иммуномодулины
микроорганизмов,
метаболиты и т.д.
ЭНТЕРАЛЬНАЯ
СРЕДА
(муциновый
слой)
РЕЗИДЕНТНАЯ МИКРОФЛОРА ~ 500 видов
ТРАНЗИТНАЯ МИКРОФЛОРА
Механо-химические
параметры эпителия
Состав пищи, воды,
воздуха, факторы
экологии
Открытые полости
(желудочно-кишечный
тракт, верхние
дыхательные пути,
урогенитальная сфера)
Схематическое представление роли нормофлоры
в функционировании организма

33.

Системообразующие факторы
микробиценоза кворум сенсинг

34.

Исследование внутрипопуляционных связей
микробиоценоза кишечника человека и животных
показало, что он представляет собой целостную
систему с тонко сбалансированными качественными
(видовой состав) и количественными
характеристиками.
Системообразующие факторы микробиценоза кворум сенсинг
Биопленка. Микроорганизмы, в количестве 1011
клеток/см3 распределены в пристеночном слое
муцина – относительно прочного геля, состоящего из
пептидогликана, продуцируемого бокаловидными
клетками эпителия кишечной слизистой оболочки.
Биопленка по химической природе близка
полисахаридной защитной капсуле, которой окружают
себя многие микробы.
Это псевдоцитологической структура.

35.

Показано, что при росте в жидких средах или на поверхности твердого
субстрата (как в искусственных, так и естественных условиях)
микроорганизмы
проявляют
выраженную
тенденцию
к
установлению временных или постоянных физических контактов.
Существенно, что стремление к объединению в группы является
общей закономерностью в мире микроорганизмов: одиночные микробы
в виде взвеси в жидкости или будучи рассеянны по твердой
поверхности, как правило, нежизнеспособны.
Прикрепленные к поверхности ассоциации микробов
называются биопленками.
В природе часто наблюдается объединение в пределах одного
агрегата нескольких видов метаболически взаимосвязанных
микроорганизмов (такие ассоциации называются консорциумами).
Консорциумы, включающие в себя несколько десятков видов
микробов, получили название «бактериальные маты».

36.

Исследованиями последних лет установлено, что важным фактором
интеграции сообществ микроорганизмов являются так называемые
«бактериальные феромоны»(белки, олигопептиды, модифицированные
аминокислоты, липиды и др.). При этом обмен химическими сигналами
происходит как внутри популяции одного вида бактерий, так и между
популяциями разных видов микроорганизмов.
Показано, что бактериальные олигопептиды не только принимают
участие в регуляции таких жизненно важных функций как размножение,
но и обеспечивают их коллективное поведение.
Это продемонстрировано на примере колонизации человека патогенными
бактериями. Микробы не атакуют клетки хозяина, не вырабатывают
факторы патогенности до тех пор, пока плотность их популяции (число на
единицу объема) не достигнет необходимой величины. Именно в этот
момент происходит освобождение олигопептидов из части бактерий, что
является сигналом для активации соответствующих биохимических систем
у остальных микроорганизмов.

37.

Бактериальные
аутоиндукторы (язык
общения)
R2
O N
H
H
O
CH3
R1
лактоны
O
H
H
O
NH
O
NH
H
пептиды
OH
N
O
H
хинолы
Образование биопленок
Патогенность
Синтез антибиотиков
Биолюминисценция

38. Пример КС для аутоиндукция роста и апоптоза

• Культура Micrococcus luteus, голодавшая в течение 3-6
месяцев, претерпевает лишь немного клеточных делений
после пересева на богатую среду; далее следует остановка
роста. Однако, добавление 20-30% супернатанта другой
культуры, доросшей до ранней стационарной фазы на
богатой среде, предотвращает остановку роста
голодавшей популяции M. luteus и обеспечивает ее
нормальный рост
• Как пример "бактериального альтруизма«….Голодающая
популяция E. coli постепенно разделяется на две
субпопуляции, одна из которых гибнет и подвергается
автолизу, в то время как другая субпопуляция использует
продукты автолиза как субстрат и продолжает расти и
создавать колониеобразующие единицы.

39. ИСТОЧНИКИ КОЛОНИЗАЦИИ НОВОРОЖДЕННОГО

40.

• Еще до недавнего времени считалось, что плод
в утробе матери полностью огражден от контакта
с миром микроорганизмов, то есть человек
рождается полностью стерильным, а его заселение
бактериями происходит позже. Но появились
данные о том, что первые колонизаторы осваивают
организм человека еще до его рождения. В ряде
исследований было выявлено, что в плаценте,
околоплодных водах, пуповинной крови
и первичном кале — меконии — присутствуют
бактерии родов Enterococcus, Escherichia,
Leuconostoc, Lactococcus и Streptococcus,
а у недоношенных младенцев — следы
Enterobacter, Enterococcus (в меньшей степени, чем
у доношенных), Lactobacillus, Photorhabdus
и Tannerella...

41. ИСТОЧНИКИ КОЛОНИЗАЦИИ НОВОРОЖДЕННОГО

• Колонизация
микроорганизмами
новорожденного
осуществляется
из
трех источников:
• родового канала
матери;
• объектов
окружающей
среды
(степень
ее
бактериальной
обсемененности)
• Грудного
вскармливания

42.

Особенности микрофлоры у клинически
здоровых детей раннего возраста.
Высокие
популяционные
уровни
бифидобактерий и бактероидов у 100% детей.
Лактобактерии не у всех.
К концу первого года жизни происходит
полная или частичная элиминация условнопатогенных бактерий

43. Факторы, обеспечивающие формирование микробиома младенца. Инфекции половых путей женщины могут привести к высокой бактериальной

Факторы, обеспечивающие формирование микробиома младенца. Инфекции
половых путей женщины могут привести к высокой бактериальной
зобсеменности матки. Микрофлора кишечника и ротовой полости может
транспортироваться с кровью к плоду. Характер родоразрешения формирует
первичную микрофлору. Генетика и постнатальные факторы, такие как режим
питания, использование антибиотиков и воздействие окружающей
среды оказывают дополнительное влияние на микробиом. ...

44.

Понятно, что условия обитания микробов в человеческом организме не
одинаковы. Микрофлора располагается только на коже и на слизистых
оболочках полостей, сообщающихся с внешней средой (кроме матки и
мочевого пузыря).
Микробиотопы организма существенно различаются по газовому составу
воздушной среды, спектру ферментов и иммунных факторов, продуктов
метаболизма и других биологически активных веществ, уровню рН среды,
набору экзогенных веществ - эти и другие параметры различны в ротовой
полости, пищеводе, желудке, тонком и толстом кишечнике, влагалище, носу,
верхних и нижних дыхательных путях, на коже.
Необходимо учесть разнообразие клеточного состава этих поверхностей, ведь
колонизация, т.е. процесс заселения эпителия микробами, невозможен без
предварительной адгезии. Адгезия обусловлена лигандно-рецепторным
сродством поверхностных структур эпителиальных клеток и микробов.
Поэтому в микроэкологическом отношении организм человека полибиотопен.
Каждый биотоп вместе с соответствующим микробиоценозом составляет
небольшую экосистему. Естественная аутомикрофлора тела - единый
природный комплекс, состоящий из совокупности гетерогенных
микробоценозов в различных участках человеческого организма.
Подобная интеграция целесообразна и необходима, она универсальна для
живого мира и могла сформироваться только в результате отбора в процессе
биологической эволюции.

45. Микрофлора кожи

46.

47. Нормальная микрофлора кожи: грам+ бактерии (пропионибактерии, дифтероиды, эпидермальные и другие коагулазо-отрицательные

стафилококки, пептострептококки,
микрококки, стрептококки), дрожжеподобные грибы. Транзиторная микрофлора –
золотистый стафилококк, пиогенный стрептококк, грам- бактерии.
Микрофлора дыхательных путей: микрофлора рото- и носоглотки – бактероиды,
зеленящие стрептококки, нейссерии, дифтероиды, стафилококки. Трахея, бронхи
и альвеолы в норме стерильны.
Мочеполовой тракт: во влагалище – лактобактерии, бифидобактерии, бактероиды,
пропионибактерии, превотеллы, порфиниромонады, дифтероиды. Преобладаю
анаэробы, могут быть гарднереллы.
Желудочно-кишечный тракт заселен «по этажам». В желудке – лактобактерии,
энтерококки, дрожжи, бифидобактерии. Микрофлора толстого кишечника: до
95% - анаэробные бактерии. Преобладают грам+ анаэробные палочки (бифидои лактобактерии, эубактерии), грам+ спорообразующие анаэробные палочки
(клостридии), энтерококки, грам- анаэробные палочки (бактероиды), гамфакультативно-анаэробные палочкикишечные палочки и близкие
энтеробактерии), анаэробные грам+кокки (пептококки, пептострептококки).
• Clostridium diffecile – возбудитель псевдомембранозного колита.

48. Микрофлора кожи

• АНАЭРОБЫ:Propionobacteriumterium,
Peptococcus, Streptomyces, Clostridium
• АЭРОБЫ:Corynebacterium, Micrococcus,
Грибки, Staphylococcus, Streptococcus,
Pseudomonas, Klebsiella, Escherichia, Proteus

49. Микрофлора дыхательных путей

микрофлора рото- и носоглотки
бактероиды, зеленящие стрептококки,
нейссерии, дифтероиды,
стафилококки.
Трахея, бронхи и альвеолы в норме
стерильны.

50. Мочеполовой тракт

• Во влагалище – лактобактерии преобладаютколонизационная резистентность.
Обеспечивают кислую РН.
• У мужчин в НОРМЕ только нижний отдел
уретры колонизирован микроорганизмами.
• АНАЭРОБЫ:Bacteroides, Bifidobacterium,
Mobiluncus
• АЭРОБЫ:Gardnerella, Lactobacillus, Micoplasma,
Candida, Streptococcus

51.

Микроэкологические
изменения (дисбактериоз)

52.

ДИСБАКТЕРИОЗ - клинико-лабораторный
синдром, возникающий при целом ряде
заболеваний и клинических ситуаций, который
характеризуется
изменением качественного и/или
количественного состава нормофлоры, а также
метаболическими и иммунными нарушениями,
сопровождающимися у части пациентов
поражением кишечника, транслокацией бактерий
в несвойственные биотопы и их избыточным
ростом
(ОСТ № 231“Дисбактериоз кишечника”, 09.06.2003)

53.

Диагноз «дисбактериоз» используется
преимущественно отдельными врачами на
территории России; в других странах он, как правило,
не используется.
За рубежом существует диагноз «синдром
избыточного бактериального роста» в тонкой кишке
(СИБР), корректно и конкретно определённый.
Он ставится только при обнаружении более
105 микроорганизмов в одном миллилитре аспирата из
тонкой кишки и/или появления в ней флоры,
характерной для толстой кишки.
Диагноз «дисбактериоз» не указан
в Международной классификации болезней-10 ; также
он отсутствует в нормативном
документе Министерства здравоохранения
РФ «Стандарты (протоколы) диагностики и лечения
болезней органов пищеварения».

54. Это интересно!

• Распространённые методы диагностики дисбактериоза, такие
как копрологическое и микробиологическое исследование кала, не дают
возможности оценить состав микрофлоры всего кишечника.
• Диагноз «дисбактериоз», как правило, ставится необоснованно,
поскольку качественный и количественный состав микрофлоры
кишечника обычно мало изменяется на протяжении жизни человека.
• Использование термина «дисбактериоз» на территории России активно
поддерживается фармацевтическими компаниями (в том числе и
западными) — на телевидении и в других средствах массовой
информации, в основном в виде рекламы фармацевтических продуктов .
• Симптомы, называемые термином «дисбактериоз», встречаются в
рамках множества совершенно различных заболеваний и синдромов (в
их числе называются синдром раздражённой толстой кишки, синдром
избыточного микробного роста,
антибиотикоассоциированный колит, диарея); порой они могут быть
обусловлены неправильным питанием, ограничениями в питании;
функциональные расстройства кишечника в раннем детском возрасте
часто обусловлены обычной младенческой коликой, проходящей с
взрослением безо всякого лечения.

55. Методы исследования микробиоценоза и его нарушений

56.

• Последние исследования «пошатнули» стандартные
представления о патогенезе многих заболеваний Тому
способствовало и развитие новых молекулярно–
генетических технологий, позволяющих
идентифицировать многочисленные виды бактерий, не
поддающиеся культивированию. в среднем
культивируемыми являются не более 20%
микроорганизмов любого местообитания.
• По сравнению с молекулярно-генетическими методами
оказывается, что определение 60-80% их микробиоценоза
не доступно для культуральных методов.

57. Методы исследования:

• Метод газовой хроматографии в сочетании
с масс-спектрометрией (сокращенно – ГХМС).
• Молекулярно-генетические методы: на
основе ПЦР, биочипные технологии
• Бактериологический и копрологический
метод

58. Коррекция дисбактериоза

59.

• В Российской Федерации протокол ведения
пациентов с дисбактериозом
регламентировался стандартом ОСТ
91500.11.0004-2003 от 09.06.2003 N 231.
Утверждения о всех предлагаемых способах
лечения (например, об их способности
восстанавливать микрофлору) имеют
степень убедительности доказательств C:
«Достаточных доказательств нет: имеющихся доказательств
недостаточно для вынесения рекомендации, но рекомендации могут быть
даны с учетом иных обстоятельств"» (то есть отсутствуют
масштабные рандомизированные клинические исследования с
контрольными группами). Фактически эффективность утверждённых
Минздравом методов лечения не была подтверждена согласно
критериям
доказательной медицины!

60.

• Обычные методы лечения расстройств,
диагностируемых как дисбактериоз
(назначение пробиотиков,
бактериофагов и т. п.), являются
малоэффективными, поскольку «чужая
микрофлора», как правило, не приживается
в кишечнике, НО осуществляемая ими
функция «колонизационная
резистентность» очень важна в этом
периоде.

61. Классификация препаратов

• 1.Пробиотики
• 2.Пребиотики
• 3.Синбиотики
• Проходят регистрацию через ГИСК им.Тарасевича и Комитет МИБП
• 4.Биологически активные добавки (регистрация через Институт
питания)

62.

ПРОБИОТИКИ
Живые микроорганизмы и вещества
микробного происхождения,
оказывающие при естественном способе
введения положительные эффекты на
физиологические и метаболические
функции.

63. Пребиотики и Синбиотики

Пребиотики
– неперевариваемые ингредиенты продуктов питания
немикробного происхождения, способные при
оральном назначении оказывать позитивный эффект
на организм через селективную стимуляцию роста или
метаболической активности нормальной микрофлоры
толстой кишки.
Синбиотики
- препараты, полученные в результате рациональной
комбинации пробиотиков и пребиотиков (живые
бактерии и субстраты, стимулирующие их рост).

64.

Пребиотики – неперевариваемые ингредиенты пищи, стимулирующие
рост собственной нормальной флоры, создающие благоприятные условия
для роста и размножения микроорганизмов на слизистой оболочке
кишечника.
Пребиотики находятся в молочных продуктах, кукурузных хлопьях,
крупах, хлебе, луке репчатом, цикории полевом, чесноке, фасоли, горохе,
артишоке, аспарагусе, бананах и многих других продуктах.
Основными пребиотиками являются инулин, олигосахариды и лактулоза,
которая входит в состав препаратов Дюфалак и Лактусан, лизоцим,
пантотенат кальция (Кальцидум), пара-амино-метил-бензойная кислота.

65.

Пробиотики, стабилизирующие
нормофлору (I)
Монокомпонентные
Поликомпонентные
Комбинированные,
Метаболитные
I. ЛАКТОБАКТЕРИН
(биомасса L.plantarum):
1.- АЦИЛАКТ (биомасса 3-х штаммов
L.acidophilus)
2.КОЛИБАКТЕРИН
(биомасса E.coli M-17)
2. АЦИДОФИЛЮС
(биомасса
L.acidophilus, L.bulgaricum и
S.thermophilus)
1.КИПАЦИД
(биомасса 3-х штаммов
L.acidophilus и
лизоцим)
3. ЭНТЕРОЛ
(Saccharomyces boulardii)
4.СПОРОБАКТЕРИН,
БАКТИСПОРИН,
БАКТИСУБТИЛ
3. ЛИНЕКС (биомасса L.acidophilus,
B.bifidum и E.faecalis)
4. БИОСПОРИН
( B.subtilis и B.licheniformis)
2. АЦИПОЛ
( L.acidophilus и
полисаха
риды кефирных
грибков)
3. ХИЛАК-ФОРТЕ
(метаболиты
Lactobacillus,
Escherichia,
Enterococcus)

66.

Бифидосодержащие пробиотики (II)
Однокомпонентные
I. БИФИДУМБАКТЕРИН
(биомасса B. bifidum)
2.БИФИДИН (биомасса
B. adolescentis)
Двукомпонентные
Комбинированные,
Сорбированные
1. БИФИКОЛ
(биомасса B. bifidum, E. coli M-17)
1.БИФИЛИЗ
(B. bifidum и лизоцим)
2. БИФИЛОНГ
(биомасса B. bifidum и
B. longum)
3. БИФИФОРМ
(B. longum и Enterococcus faecium)
2. КАЛЬЦИДУМ
(B. bifidum, кальций)
3.БИФИДУМБАКТЕРИН
ФОРТЕ
И
ПРОБИФОР
(иммобилизованные на
угле B. bifidum –
КОЕ-107 –108 )

67.

Пребиотики, синбиотики, фаги
Пребиотики
1. - ЛАКТУЛОЗА
(дюфалак, лактусан)
2. – ПАМБА (пара-амино-метилбензойная кислота)
3. - ЛИЗОЦИМ
4. – ПАНТОТЕНАТ КАЛЬЦИЯ
Синбиотики
1.- БИОВЕСТИН-ЛАКТО
(биомасса B.bifidum,
B.adolescentis, L.plantarum
и бифидогенные факторы)
2. – МАЛЬТИДОФИЛЮС
(биомасса B.bifidum,
L.acidophilus, L.bulgaricum
и мальтодекстрин)
3.ЛАМИНОЛАКТ
(E.faecium,аминокислоты,
пектин, морская капуста)
4. – БИФИДО-БАК
( комплекс из лакто- и
бифидобактерий и
экстракта из топинамбура)
Фаги
1.-КОЛИПРОТЕЙНЫЙ
2.-КЛЕБСИЕЛЛЕЗНЫЙ
3.-СТАФИЛОКОККОВЫЙ
4.-ПИОБАКТЕРИОФАГ

68.

Рекомендации к селекции пробиотических
штаммов (I)
1.
Должны быть безвредными (авирулентными, атоксигенными)
• 2. Обладать широким спектром антагонистической и метаболитической активности
• 3. Индуцировать в организме синтез факторов неспецифической защиты
• 4. Быть технологичными
Пробиотические бактерии должны обладать устойчивым генотипом, изменение
фенотипических свойств должно быть контролируемым
6.Микробы-продуценты не должны ингибировать индигенные бактерии нормальной
микрофлоры
7.Обладать устойчивостью к действию неблагоприятных факторов
8. Сохранять свои биологические свойства в течение 1 года при температуре хранения не
выше 8о С

69.

Исследование и поиск оригинальных
пробиотических штаммов
1. Синтезирующих короткоцепочечные жирные кислоты:
защита от развития опухолей, источник энергии.
2. Связывание азота и его выведение:
профилактика печеночной энцефалопатии.
3. Связывание фосфатов и их выведение:
снижение риска хронической почечной недостаточности.
4. Деградация оксалатов: защита от развития почечных камней.
5. Удаление желчных кислот и нейтральных стеролов:
снижение риска сердечно-сосудистых заболеваний.

70. СОВРЕМЕННЫЕ ПОДХОДЫ

• Получение новых препаратов на основе
аутоиндукторов “чувства кворума”(QS)
• Конструирование препаратов на основе
консорциумов микроорганизмов и
бактериальных метаболитов
• Создание целевых генетически
модифицированных микроорганизмов из
представителей нормофлоры

71. Аутоиндукторы, ассоциированные с функцией “чувство кворума”(QS)

• “QS” зависимое увеличение устойчивости к
воздействию неблагоприятных факторов
• Усиление адгезивных свойств нормофлоры
• Нарушение действия генов-регуляторов
вирулентности у S.aureus, L.monocytogenes, P.
aeruginosa, Salmonella enteritidis и др.
• Получение новых антимикробных препаратов на
основе аутоиндукторов

72. ПОЛУЧЕНИЕ НОВЫХ ПРОБИОТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ

• Выделение целевых низкомолекулярных
высоко специфичных сигнальных
молекул, синтезируемых клетками в
зависимости от плотности популяции на
основе принципа аутоиндукции

73.

Пробиотики, стабилизирующие нормофлору (I)
Монокомпонентные
Поликомпонентные
Комбинированные
,
Метаболитные
I. ЛАКТОБАКТЕРИН
(биомасса L.plantarum):
1.- АЦИЛАКТ (биомасса 3-х
штаммов L.acidophilus)
2.КОЛИБАКТЕРИН
(биомасса E.coli M-17)
2. АЦИДОФИЛЮС
(биомасса
L.acidophilus, L.bulgaricum и
S.thermophilus)
1.КИПАЦИД
(биомасса 3-х
штаммов
L.acidophilus и
лизоцим)
3. ЭНТЕРОЛ
(Saccharomyces boulardii)
4.СПОРОБАКТЕРИН,
БАКТИСПОРИН,
БАКТИСУБТИЛ
3. ЛИНЕКС (биомасса
L.acidophilus, B.bifidum и
E.faecalis)
4. БИОСПОРИН
( B.subtilis и B.licheniformis)
2. АЦИПОЛ
( L.acidophilus и
полисаха
риды кефирных
грибков)
3. ХИЛАК-ФОРТЕ
(метаболиты
Lactobacillus,
Escherichia,
Enterococcus)

74.

Бифидосодержащие пробиотики (II)
Однокомпонентные
Двукомпонентные
Комбинированные,
Сорбированные
I. БИФИДУМБАКТЕРИН
(биомасса B. bifidum)
1. БИФИКОЛ
(биомасса B. bifidum, E. coli M17)
1.БИФИЛИЗ
(B. bifidum и лизоцим)
2. КАЛЬЦИДУМ
(B. bifidum, кальций)
2.БИФИДИН (биомасса
B. adolescentis)
2. БИФИЛОНГ
(биомасса B. bifidum и
B. longum)
3. БИФИФОРМ
(B. longum и Enterococcus
faecium)
3.БИФИДУМБАКТЕРИН
ФОРТЕ
И
ПРОБИФОР
(иммобилизованные на
угле B. bifidum –
КОЕ-107 –108 )

75.

Пребиотики, синбиотики, фаги
Пребиотики
1. - ЛАКТУЛОЗА
(дюфалак, лактусан)
2. – ПАМБА (пара-амино-метилбензойная кислота)
3. - ЛИЗОЦИМ
4. – ПАНТОТЕНАТ КАЛЬЦИЯ
Синбиотики
1.- БИОВЕСТИН-ЛАКТО
(биомасса B.bifidum,
B.adolescentis, L.plantarum
и бифидогенные факторы)
2. – МАЛЬТИДОФИЛЮС
(биомасса B.bifidum,
L.acidophilus, L.bulgaricum
и мальтодекстрин)
3.ЛАМИНОЛАКТ
(E.faecium,аминокислоты,
пектин, морская капуста)
4. – БИФИДО-БАК
( комплекс из лакто- и
бифидобактерий и
экстракта из топинамбура)
Фаги
1.-КОЛИПРОТЕЙНЫЙ
2.-КЛЕБСИЕЛЛЕЗНЫЙ
3.-СТАФИЛОКОККОВЫЙ
4.-ПИОБАКТЕРИОФАГ