Дисбиоз урогенитального тракта. Лабораторная диагностика

1.

Дисбиоз урогенитального тракта
Лабораторная диагностика

2.

Микробиоценоз слизистых урогенитального тракта
>106 копий
ДНК/в образце
L. acidophilus, L. fermentum, L.
plantarum и L. casei
<104 копий
ДНК/в образце
в норме
<103 копий
ДНК/в образце
отсутствуют

3.

Микробиоценоз слизистых урогенитального тракта
Значение группы микроорганизмов в биоценозе влагалища
Lactobacillus spp.
Преобладающая группа бактерий в биоценозе нормофлоры у женщин репродуктивного
возраста (90-95%)
участвуют в формировании экологического барьера и обеспечивают устойчивость
влагалищного биотопа
образуют молочную кислоту, поддерживают рН вагинального содержимого на уровне
3,8-4,5, препятствуя тем самым размножению ацидофобных бактерий
продуцируют лизоцим и перекись водорода
Дисбиоз
Уменьшение количества лактобактерий
Замена нормальной микрофлоры влагалища на повышенное содержание
многочисленных видов анаэробных микроорганизмов:
Превотелла (Prevotella spp.), Апотобиум (Atopobium vaginae),
Лептотрихия (Leptotrichia amnionii), Мобилункусы (Mobiluncus curtisii,
Mobiluncus mulieris), Гарднерелла (Gardnerella vaginalis)

4.

Оценка биоценоза
Сущность подхода к оценке биоценоза:
для условно-патогенных микроорганизмов клиническое
значение имеет не факт их обнаружения, не абсолютные
количества, а соотношение групп микроорганизмов
в биоценозе
«Для проб с низким содержанием ДНК ЛБ оказалась характерной
не только повышенная частота встречаемости ДНК любой другой
УПБ, но и их более широкое видовое разнообразие. Более 1 вида
УПБ детектировано в 59,8% проб со сниженным содержанием ЛБ,
в то же время в 78,1% проб с высоким содержанием ЛБ не
выявлен ни один из рассмотренных патогенов».
*Фоменко Н.В., Хворостова Ю.В., Игнатьева О.А., Трухина А.В., Гасилова Н.А., Кабилов М.Р., Иванов М. К.
«Видовое разнообразие микрофлоры в пробах из урогенитального тракта пациенток крупной сетевой лаборатории и его зависимость от
содержания лактобактерий».Клиническая лабораторная диагностика. – М.: Изд. «Медицина». 2015;60(3):59-64.

5. Микрофлора урогенитального тракта (УГТ)

Состав зависит от многих факторов
фаза менструального цикла
возраст
этническая принадлежность
географической зона, в которой
проживает женщина
!
Для постановки диагноза и назначения адекватного
лечения важно выявить безусловно патогенные
микроорганизмы и оценить изменения в
количественном соотношении микроорганизмов
разных групп нормальной и условно-патогенной
флоры УГТ.

6. Инфекции, передаваемые половым путем Статистика ВОЗ

ВОЗ: > 357 млн человек в возрасте 15-49 лет
заболевают четырьмя излечимыми инфекциями,
передаваемыми половым путем (ИППП):
o Трихомониаз (142 млн)
o Хламидиоз (131 млн)
o Гонорея (78 млн)
o Сифилис (6 млн)
Также высокая распространенность наблюдается
в отношении ИППП вирусной этиологии:
> 417 млн человек инфицированы вирусом
простого герпеса 2 типа
1%
22%
40%
37%
Трихомониаз
Вирус простого герпеса. ВОЗ. 2020. https://www.who.int/ru/news-room/fact-sheets/detail/herpes-simplex -virus
Глобальная стратегия сектора здравоохранения по инфекциям, передаваемым половым путем (2016-2021 гг.). World Health Organization. 2016.
Инфекции, передаваемые половым путем (ИППП). ВОЗ. 2019. https://www.who.int/ru/news-room/fact-sheets/detail/sexually-trans mitted-infections-(stis)
Хламидиолз
Гонорея
Сифилис

7. Инфекции, передаваемые половым путем Статистика РФ

Росстат: в РФ заболеваемость 4-мя излечимыми инфекциями, передаваемыми половым путем
(ИППП):
o Трихомониаз - 62,8 тыс. / 42,8 на 100 тыс. населения
o Хламидиоз - 40,6 тыс. / 27,7 на 100 тыс. населения
5%
11%
o Гонорея - 12,8 тыс. / 8,7 на 100 тыс. населения
51%
o Сифилис - 24,5 тыс. / 16,7 на 100 тыс. населения
33%
Заболеваемость аногенитальным герпесом (герпес 2 типа)
16,7 тыс.человек или 11,4/100 тыс. населения
Трихомониаз
Социально значимыез аболевания населения России в 2018 году. (Статистические материалы).
https://minzdrav.gov.ru/ministry/61/22/stranitsa-979/statisticheskie-i-informatsionnye-materialy/statisticheskiy-sbornik-2018-god
Хламидиолз
Гонорея
Сифилис

8.

Частота дисбиоза у женщин с угрозой ПР
Тютюнник В.Л., Кан Н.Е., Красный А.М., Высоких М.Ю.

9.

Бактериальный вагиноз
Частота его распространения 12% - 80%
зависит от контингента обследованных женщин
развивается
репродуктивного
преимущественно
возраста:
у
у
женщин
80-87%
c патологическими вагинальными выделениями
частота выявления у беременных достигает 37-40%

10. Бактериальный вагиноз (БВ)

это невоспалительный синдром, характеризующийся дисбиозом влагалищной микробиоты, выраженный
в снижении количества лактобактерий (вплоть до их полного исчезновения) и в увеличении количества
облигатных и факультативных анаэробных условно-патогенных микроорганизмов
NB!
МКБ-10 не выделяет БВ в самостоятельное заболевание, поэтому его относят к
N89 - Другие невоспалительные заболевания влагалища.
*Сочетание 3х из перечисленных ниже 4х признаков свидетельствует о наличии БВ
*Критерии постановки диагноза БВ (R. Amsel и соавт.):
o наличие гомогенных беловато-серых выделений, равномерно распределяющихся по стенкам влагалища;
o повышение уровня влагалищного рН >4,5; Важно: pH-метрия — обязательный метод диагностики!!!
o положительный тест с 10% раствором гидроокиси калия (присутствие специфического запаха несвежей,
гнилой рыбы) — определение летучих аминов;
o обнаружение в нативных препаратах или мазках, окрашенных по Граму, «ключевых клеток».
Верификация диагноза БВ должна базируется на сопоставлении
клинических симптомов и лабораторных признаков
NB!
35

11.

Клиническая картина БВ
Субъективные симптомы:
гомогенные беловато-серые выделения из половых путей
часто с неприятным «рыбным» запахом
усиливающиеся после незащищенного полового акта, проведения
гигиенических процедур с использованием мыла, после менструации
дискомфорт в области наружных половых органов
болезненность во время половых контактов (диспареуния)
редко - зуд и/или жжение в области половых органов
редко - зуд, жжение, болезненность при мочеиспускании (дизурия)
Объективные симптомы:
гомогенные беловато-серые вагинальные выделения густой консистенции,
равномерно распределяющиеся по слизистой оболочке вульвы и влагалища.
У пациенток симптомы воспалительной реакции со стороны половых
органов отсутствуют

12.

Физикальное обследование
при осмотре наружных половых органов возможно наличие свободных
гомогенных выделений
при осмотре с помощью зеркала Куско: гомогенные беловато-серые
вагинальные
выделения
густой
консистенции,
равномерно
распределяющиеся по слизистой оболочке вульвы и влагалища;
воспалительная реакция со стороны половых органов отсутствует.

13.

Лабораторная диагностика
Рекомендовано с целью определения видового и количественного
состава микробиоты влагалища микробиологические исследования
и/или определение ДНК Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae,
Lactobacillus spp. и общего количества бактерий во влагалищном
отделяемом
методом
ПЦР
(количественное
исследование),
ассоциированных с бактериальным вагинозом, в частности, трудно
культивируемых, с использованием тест-систем, разрешенных к
медицинскому применению в Российской Федерации
При микроскопическом исследовании:
выявление «ключевых» клеток
уменьшение количества или исчезновение лактобацилл
увеличение количества смешанной микробной (не
микробиоты
отсутствие местной лейкоцитарной реакции
лактобациллярной)

14.

Эпидемиология
Урогенитальный кандидоз - широко распространенное заболевание
чаще развивается у женщин репродуктивного возраста
Частота регистрации кандидозного вульвовагинита составляет 30-45% в
структуре инфекционных поражений вульвы и влагалища
По данным исследователей, 70-75% женщин имеют в течение жизни
хотя бы один эпизод кандидозного вульвовагинита, при этом у 5-15% из
них заболевание приобретает рецидивирующий характер.
К 25 годам около 50% женщин, а к началу периода менопаузы – около
75% женщин имеют хотя бы один диагностированный врачом эпизод
заболевания. Кандидозный вульвовагинит редко наблюдается у женщин в
постменапаузе, за исключением женщин, получающих заместительную
гормональную терапию [

15. Вульвовагинальный кандидоз (ВВК)

инфекционная болезнь с поражением кожи вульвы и слизистой оболочки влагалища, вызванная
заражением грибами рода Candida.
Виды грибов рода Candida, вызывающие ВВК :
o
Доминирующий возбудитель — Candida albicans - до 90% случаев ВВК
Другие виды Candida spp. встречаются в около 10% случаев при следующих ситуациях:
o рецидивирующем течении кандида-инфекции, у пациенток с сахарным диабетом
(СД)
o у ВИЧ-инфицированных и женщин в постменопаузе.
o
Candida non-albicans: наиболее часто C. glabrata,
C. tropicalis, C. krusei, C. parapsilosis (реже другие виды: C. lipolytica, C. norvegensis, C.
rugosa, C. zeylanoides, C. famata).
Лабораторные методы диагностики:
световая микроскопия нативных препаратов или микроскопия мазков, окрашенных по Граму
культуральное исследование (посев материала на селективную питательную среду Сабуро и определение чувствительности
выделенных грибов к антимикотическим препаратам)
молекулярно-биологические методы, направленные на обнаружение специфических фрагментов ДНК и/или РНК Candida
spp.
КЛИНИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ДИАГНОСТИКЕ И ЛЕЧЕНИЮ ЗАБОЛЕВАНИЙ, СОПРОВОЖДАЮЩИХСЯ ПАТОЛОГИЧЕСКИМИ ВЫДЕЛЕНИЯМИ ИЗ ПОЛОВЫХ ПУТЕЙ ЖЕНЩИН. Российское общество акушеровгинекологов, 2019
36

16.

Особенности кодирования заболевания или состояния
(группы заболеваний или
Код по МКБ-10:
o В37 Кандидоз
o В37.3 Кандидоз вульвы и вагины
o В37.4 Кандидоз других урогенитальных
локализаций
Кандидозный:
o B37.9 Кандидоз неуточненный
o N77.1 Вагинит, вульвит и вульвовагинит
при инфекционных и паразитарных
болезнях
o N76.0 Острый вагинит
o N73.3 Подострый и хронический вагинит

17. Микроскопические исследования

Микроскопия (греч. micros-малый, skopéo-смотрю) - совокупность методов зрительного исследования
микрообъектов при увеличении их от нескольких десятков до сотен тысяч раз.
При микроскопии в мазках, окрашенных по Граму, можно обнаружить бактерии, грибы (при кандидозе),
простейшие (при трихомониазе). Важными моментами при проведении исследования являются оценка
морфологии. Важными также являются количество (от скудного до массивного) и отношение к красителям
(грамположительные и грамотрицательные клетки).
NB!
Данное исследование не предусматривает оценку морфологии клеток эпителия.
34

18. Микробиологическая диагностика в акушерско-гинекологической практике – стрептококк группы В (СГВ, Streptococcus agalactiae)*

ИНВИТРО для гинекологов
Микробиологическая диагностика в акушерскогинекологической практике – стрептококк группы В (СГВ,
Streptococcus agalactiae)*
o В акушерской практике со стрептококком группы В связывают бактериемию, инфекции мочевых путей, хориоамнионит, преждевременное излитие
околоплодных вод, преждевременные роды, послеродовой эндометрит и др.
o новорожденные инфицируются СГВ во время родов от матери
o СГВ вызывает ранние неонатальные инфекции, такие как сепсис, менингит, пневмония, остеомиелит, артрит и пиелонефрит, частота которых в разных
странах колеблется от 0,2 до 5 и более на 1000 живорожденных детей
o ранние СГВ-септицемии и пневмонии новорожденных отличаются тяжелым течением и высокой летальностью
Код по МКБ-10
o О 60 – преждевременные роды
o О 42 – преждевременный разрыв плодных оболочек
o О 42.0 – преждевременный разрыв плодных оболочек, начало родов в последующие 24
часа
o О 42.2 – преждевременный разрыв плодных оболочек, задержка родов, связанная с
проводимой терапией
o О 42.9 – преждевременный разрыв плодных оболочек, неуточненный
o А 40 – стрептококковая септицемия
Лабораторные исследования
Посев на S. agalactiae предназначен для обследования
беременных на 35-37 неделе беременности с целью
выявления бактерионосительства и определения
необходимости проведения антибиотикопрофилактики в
родах, для предупреждения неонатальных осложнений
Материал для исследования - мазок из входа во влагалище
и аноректальной области
Тест № 454-П Посев на бета-гемолитический стрептококк группы В (Streptococcus group B, S.agalactiae) - учитывая 100% природную чувствительность
S. agalactiae к бета-лактамным антибиотикам, может быть выбран тест без определения чувствительности к антимикробным препарата
Тест № 454-А Посев на бета-гемолитический стрептококк группы В (Streptococcus group В, S. agalactiae) и определение чувствительности к
антимикробным препаратам - при необходимости индивидуального подбора лекарственного средства (в случае непереносимости или аллергии на
бета-лактамы)
Тест № 488 Стрептококк группы В (Streptococcus group B, S.agalactiae), антигенный тест, мазок из влагалища - одностадийный
иммунохроматографический метод для выявления специфических антигенов
38
*КЛИНИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ Микробиологическая диагностика инфекций, вызванных стрептококком группы B у беременных и новорожденных, 2016

19. Методы оценки микрофлоры урогенитального тракта

• Культуральный и микроскопический
• Культуральные методы не всегда позволяют определить вид УПБ
• - многие из них являются некультивируемыми или трудно культивируемыми
• Микроскопические методы зачастую низко-производительны и мало
эффективны
• Технология ПЦР-РВ для определения ДНК УПБ позволяет выявлять
различные бактерии, включая некультивируемые виды и проводить
количественную оценку соотношения видов УПБ
• ИНБИОФЛОР – предназначенный для оценки бактериальной микрофлоры УГТ

20.

Методы диагностики ИППП
ПОСЕВ БИОМАТЕРИАЛА ИЛИ
БАКТЕРИОСКОПИЯ МАЗКА
ПОЛИМЕРАЗНО-ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ
(ПЦР)
На питательных средах возможно
выявление дрожжеподобных
грибов (род Candida, Cryptococcus и
других), а также таких
возбудителей, как микоплазмы и
уреаплазмы.
ПЦР дает возможность обнаружить
возбудителя вскоре после
заражения, за недели или месяцы
до симптомов заболевания.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ АНТИТЕЛ
Используется для выявления
специфических антител IgM, IgA,
IgG к данному возбудителю в
сыворотке крови.
При микроскопии можно
обнаружить бактерии, грибы (при
кандидозе), простейшие (при
трихомониазе).
Использование разных методов лабораторной диагностики связано с особенностями строения и
жизненного цикла микроорганизмов.
20

21. Состав ИНБИОФЛОР – результат научно-практического исследования

Для исследования использовали 620 урогенитальных соскобов от пациенток 14 – 50 лет. Образцы предоставлены отделениями
лаборатории ИНВИТРО (г. Москва и г. Новосибирск).
Предварительно из выборки исключили образцы, в которых была выявлена ДНК Mycoplasma genitalium, Chlamidia trachomatis, Neiseria
gonorrhoeae, Trichomonas vaginalis, а также пробы, содержащие менее 10 5 копий в ПЦР-пробе ДНК бактерий и ДНК человека.
Для проб с низким содержанием ДНК лактобактерий оказалась характерной не только повышенная
частота встречаемости ДНК любых других УПБ, но и их более широкое видовое разнообразие.
Более 1 вида УПБ детектировано в 59,8% проб со сниженным содержанием ЛБ, в то же время
в 78,1% проб с высоким содержанием ЛБ не выявлен ни один из рассмотренных патогенов».
32

22. ИНБИОФЛОР – модульный диагностический комплекс

Инбиофлор-Скрин, Инбиофлор-Эксперт
ИНБИОФЛОР – модульный диагностический комплекс
Дисбиотические состояния
урогенитального тракта
ВАГИНОЗ
Бактериальный
вагиноз
Условно-патогенные
микоплазмы
(мониторинг лечения)
(Ureaplasma urealyticum)
Первичное
исследование
ВАГИНИТ,
ЦЕРВИЦИТ, УРЕТРИТ
Выявление
возбудителей
ИППП (4+КВМ)
Условно-патогенные
микоплазмы
(урогенитальный
скрининг)
Условно-патогенные
микоплазмы
(мониторинг лечения)
(Mycoplasma hominis)
Условно-патогенные
микоплазмы
(мониторинг лечения)
(Ureaplasma parvum)
До 25 инфекций + КВМ
ИНБИОФЛОР. Комплексное исследование
микрофлоры УГТ, ИНБИОФЛОР-СКРИН,
ИНБИОФЛОР-ЭКСПЕРТ
КАНДИДОЗ
Кандидоз, скрининг
Кандидоз, типирование

23.

Диагностика сифилиса
НЕТРЕПОНЕМНЫЕ
ТЕСТЫ
ТРЕПОНЕМНЫЕ ТЕСТЫ
ПЦР
• 69 Сифилис RPR
(Rapid Plasma
Reagin –
антикардиолипи
новый тест)
• 70 Сифилис (анти-Tr. pallidum
IgG/IgM)
• 346СВ Бледная трепонема, определение ДНК в
сыворотке крови
• 346УРО Бледная трепонема, определение ДНК в
соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта
• 346СП Бледная трепонема, определение ДНК в секрете
простаты, эякуляте
• 346СМЖ Бледная трепонема, определение ДНК в
спинномозговой жидкости
• 346РОТ Бледная трепонема, определение ДНК в
соскобе эпителиальных клеток ротоглотки
• 346ОТД Бледная трепонема, определение ДНК в
отделяемом
• 346МОЧ Бледная трепонема, определение ДНК в моче
• 346КОЖ Бледная трепонема, определение ДНК в
соскобе эпителиальных клеток кожи
• 346ГЛЗ Бледная трепонема, определение ДНК в
соскобе эпителиальных клеток конъюнктивы
• 221 Антитела класса IgM к
Treponema pallidum
• 1206 Сифилис иммуноблот IgM
• 1205 Сифилис иммуноблот IgG
23

24.

Диагностика гонококковой инфекции
ИФА
ПЦР
• 403 Гонококк (Neisseria gonorrhoeae),
антигенный тест, различные
локализации
• 306УРО Гонококк, определение ДНК (Neisseria gonorrhoeae, DNA) в
соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта;
• 306СП Гонококк, определение ДНК (Neisseria gonorrhoeae, DNA) в
секрете простаты, эякуляте;
• 306МОЧ Гонококк, определение ДНК (Neisseria gonorrhoeae, DNA) в
моче.
Диагностика микоплазменной инфекции
ПЦР
• 308УРО Микоплазма, определение ДНК (Mycoplasma genitalium, DNA) в соскобе эпителиальных клеток
урогенитального тракта;
• 308СП Микоплазма, определение ДНК (Mycoplasma genitalium, DNA) в секрете простаты, эякуляте;
• 308МОЧ Микоплазма, определение ДНК (Mycoplasma genitalium, DNA) в моче.
24

25.

Диагностика хламидийной инфекции
ИФА
ПЦР
• 105/6 Аnti- Chlamydia tr. IgA + antiChlamydia tr. IgG
• 105 Anti-Chlamydia tr.-IgA
• 106 Anti-Chlamydia tr.-IgG
• 188 Anti-Сhlamydia tr.-IgM
• 407 Хламидия (Chlamydia trachomatis),
антигенный тест, мазки из
урогенитального тракта
• 1495 Anti-cHSP60-IgG (Антитела класса
IgG к белку теплового шока Chlamydia
trachomatis)
• 301УРО Хламидии, определение ДНК в соскобе эпителиальных
клеток урогенитального тракта
• 301СП Хламидии, определение ДНК в секрете простаты,
эякуляте
• 301СМЖ Хламидии, определение ДНК в спинномозговой
жидкости
• 301СИН Хламидии, определение ДНК в синовиальной жидкости
• 301РОТ Хламидии, определение ДНК в соскобе эпителиальных
клеток ротоглотки
• 301ПРК Хламидии, определение ДНК в соскобе эпителиальных
клеток слизистой прямой кишки
• 301МОЧ Хламидии, определение ДНК в моче
• 301ГЛЗ Хламидии, определение ДНК в соскобе эпителиальных
клеток конъюнктивы
• 301ВПТ Хламидии, определение ДНК в выпоте
25

26.

Диагностика урогенитального кандидоза
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЕ
ИССЛЕДОВАНИЯ
ИФА
ПЦР
442 Посев на
дрожжеподобные грибы
(родов Candida, Cryptococcus)
с определением
чувствительности к
антимикотическим препаратам
• 254 Антитела класса
IgG к кандида
• 344УРО Кандида, определение ДНК в соскобе
эпителиальных клеток урогенитального тракта
• 344СП Кандида, определение ДНК в секрете
простаты, эякуляте
• 344СЛН Кандида, определение ДНК в слюне
• 344РОТ Кандида, определение ДНК в соскобе
эпителиальных клеток ротоглотки
• 344ПРК Кандида, определение ДНК в соскобе
эпителиальных клеток слизистой прямой кишки
• 344МОЧ Кандида, определение ДНК в моче
• 344КОЖ Кандида, определение ДНК в соскобе
эпителиальныхклеток кожи
• 344ВПТ Кандида, определение ДНК в выпоте
26

27.

Диагностика урогенитального трихомониаза
ИФА
ПЦР
• 261 Антитела
класса IgG к
Trichomonas
vaginalis
• 307УРО Трихомонада, определение ДНК (Trichomonas vaginalis, DNA) в соскобе эпителиальных
клеток урогенитального тракта
• 307СП Трихомонада, определение ДНК Trichomonas vaginalis, DNA) в секрете простаты,
эякуляте
• 307МОЧ Трихомонада, определение ДНК (Trichomonas vaginalis, DNA) в моче
Диагностика аногенитальных бородавок
ПЦР
• 399С-УРО Дифференцированное определение ДНК ВПЧ (Вирус папилломы человека, Human papillomavirus, HPV)
низкого онкогенного риска 3-х типов (6, 11, 44) + КВМ в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта
• 374С-УРО Дифференцированное определение ДНК ВПЧ (Вирус папилломы человека, Human papillomavirus, HPV), 4
типа (6, 11, 16, 18 )+ КВМ в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта
Диагностика ВИЧ-инфекции
ИФА
ПЦР
• 68 Антитела к ВИЧ 1 и 2 и антиген ВИЧ 1 и 2
• 363ПЛ ВИЧ-1, определение РНК (HIV, RNA) в плазме крови (по
27
назначению врача)

28.

Диагностика генитального герпеса
ИФА
ПЦР
• 122 Anti-HSV-IgG (Антитела класса IgG к вирусу
простого герпеса 1 и 2 типов)
• 123 Anti-HSV-IgМ (Антитела класса IgМ к вирусу
простого герпеса 1 и 2 типов)
• 309МОЧ Герпес-вирус человека 1 и 2 типа (вирус простого
герпеса 1 и 2 типа), определение ДНК в моче
• 309СВ, Герпес-вирус человека 1 и 2 типа (вирус простого герпеса
1 и 2 типа), определение ДНК в сыворотке крови
• 309СП Герпес-вирус человека 1 и 2 типа (вирус простого герпеса
1 и 2 типа), определение ДНК в секрете простаты, эякуляте
• 309УРО Герпес-вирус человека 1 и 2 типа (вирус простого герпеса
1 и 2 типа), определение ДНК в соскобе эпителиальных клеток
урогенитального тракта
• 3090МОЧ Герпес-вирус человека 1 и 2 типа (вирус простого
герпеса 1 и 2 типа), определение ДНК, типирование в моче
• 3090СВ Герпес-вирус человека 1 и 2 типа (вирус простого герпеса
1 и 2 типа), определение ДНК, типирование в сыворотке крови
• 3090СП Герпес-вирус человека 1 и 2 типа (вирус простого герпеса
1 и 2 типа), определение ДНК, типирование в секрете простаты,
эякуляте
• 3090УРО Герпес-вирус человека 1 и 2 типа (вирус простого
герпеса 1 и 2 типа), определение ДНК, типирование в соскобе
28
эпителиальных клеток урогенитального тракта
• 1222 Anti-HSV-1 IgG
• 1223 Anti-HSV-2 IgG

29.

Комплексные продукты
№ОБС91 Секс в большом городе: 6 инфекций (анализ крови)
№ОБС93 Секс в большом городе: 8 инфекций + мазок на микрофлору
№ОБС105 Секс в большом городе: 12 инфекций + КВМ (урогенитальный соскоб)
№ОБС92 Секс в большом городе: 14 инфекций + мазок на микрофлору
№ 3036 Биофлор
№ 3034 Инбиофлор-МАКСИ
№ОБС93 Секс в большом городе: 8 инфекций + мазок на микрофлору
Микроскопическое исследование окрашенного мазка по Граму
Антитела к ВИЧ 1 и 2 и антиген ВИЧ 1 и 2
Сифилис (анти-Tr. pallidum IgG/IgM)
Anti-HCV-total (антитела к антигенам вируса гепатита C)
HBsAg, качественный тест (HBs-антиген, поверхностный антиген вируса)
Хламидии, определение ДНК
Гонококк, определение ДНК
Трихомонада, определение ДНК
Микоплазма, определение ДНК
29

30.

Молекулярная диагностика методом ПЦР-РВ
ПЦР-РВ (полимеразная цепная реакция с детекцией в режиме реального времени) - универсальный метод выявления
специфических нуклеиновых кислот с помощью циклического ферментативного синтеза фрагмента ДНК.
Преимущества ПЦР-РВ для выявления инфекции
o Прямой метод выявления возбудителя
o Возможность одновременного выявления нескольких возбудителей
o Высокая чувствительность
o Специфичность метода достигает 100%
o Для ПЦР-анализа пригоден любой биологический (или клинический)
материал
o Выявление труднокультивируемых и некультивируемых микроорганизмов
o Определение абсолютного количества микроорганизмов в образце,
количественного соотношения условно-патогенных микроорганизмов в
биотопе
o Возможность автоматизации метода
o Результат анализа может быть получен в течении 1 рабочего дня
21

31. Молекулярная диагностика методом ПЦР-РВ

ИНБИОФЛОР – модульный диагностический комплекс
32

32.

ИНБИОФЛОР – модульный диагностический комплекс
Комплекс состоит из нескольких профилей
для
первичной
оценки
микрофлоры
слизистых оболочек УГТ и мониторинга
эффективности проводимой терапии
Модули
имеют
разную
клиническую
направленность. Возможно использование
отдельных модулей или их комбинаций
Выбранную
комбинацию
модулей
ИНБИОФЛОР
можно
использовать
для
обследования женщин и мужчин.
Метод определения: ПЦР-РВ
Исследуемый материал:
эпителиального тракта
Соскоб
клеток

33. ИНБИОФЛОР – модульный диагностический комплекс

3036
БИОФЛОР
Исследование микробиоценоза урогенитального тракта
Метод определения:
Полуколичественный, количественный,
процентный результат ПЦР
Состав:
Общая бактериальная масса (ОБМ)
Lactobаcillus spp., ДНК
Gardnerella vaginalis, ДНК
Atopobium vaginae, ДНК
Prevotella spp. , ДНК
Leptotrichia amnionii group, ДНК
Staphylococcus spp. , ДНК
Streptococcus spp. , ДНК
Enterococcus spp. , ДНК
КВМ
Исследуемый материал
Соскоб эпителиальных клеток
урогенитального тракта

34.

3036
БИОФЛОР
ОБМ (общая бактериальная масса) – общее количество бактерий, выявленных
в исследуемом образце. Снижение ОБМ ниже пороговых значений
свидетельствует о недостаточном заселении данного локуса бактериями, в
том числе вследствие антибиотикотерапии, гормональных нарушений или
несоблюдения правил подготовки к исследованию.

35.

Что такое КВМ?
контроль взятия биологического материала
КВМ - это оценка правильности взятия
соскоба эпителиальных клеток и исключение
это ПЦР-исследование для оценки содержания
эпителиальных клеток в образце. Содержание
специфических участков ДНК человека в
пробе прямо пропорционально количеству
эпителиальных клеток.
ложноотрицательных результатов исследования.
КВМ – не менее 10 000 копий ДНК человека
в пробе (104 копий) (4Lg копий ДНК)- удовлетворительно

36.

3034
ИНБИОФЛОР- МАКСИ
Комплексное исследование микрофлоры уретрогенитального тракта
№ 3036 БИОФЛОР. Исследование
микробиоценоза урогенитального тракта
ОБМ, Lactobаcillus spp.,Gardnerella vaginalis,
Atopobium vaginae, Prevotella spp.,
Leptotrichia amnionii group, Staphylococcus
spp., Streptococcus spp., Enterococcus spp.,
КВМ
№303УРО Уреаплазма
определение ДНК (Ureaplasma urealyticum, DNA)
№ 3023 Кандидоз, скрининг:
ДНК микроскопических грибков (тест Fungi),
ДНК Candida albicans
№308УРО Микоплазма,
определение ДНК (Mycoplasma genitalium, DNA)
№ 310УРО Цитомегаловирус
определение ДНК (Cytomegalovirus, DNA)
№3090УРО Герпесвирус человека 1 и 2
типа (вирус простого герпеса 1 и 2 типа),
определение ДНК,типирование
№ 397УРО Мобилункус
определение ДНК (Mobiluncus curtisii,
Mobiluncus mulieris, DNA)
№342УРО Уреаплазма
определение ДНК (Ureaplasma parvum, DNA)
№302УРО Микоплазма
определение ДНК (Mycoplasma hominis, DNA)
№307УРО Трихомонада
определение ДНК (Trichomonas vaginalis, DNA)
№301УРО Хламидии
определение ДНК (Chlamydia trachomatis, DNA)
№306УРО Гонококк
определение ДНК (Neisseria gonorrhoeae, DNA)

37. ИНБИОФЛОР- МАКСИ Комплексное исследование микрофлоры уретрогенитального тракта

Зачем типировать грибы рода Candida?
для выявления C. glabrata и C. krusei, устойчивых к
флуконазолу
При назначении терапии следует учитывать рост
устойчивости грибов рода Candida к антимикотикам: C.
glabrata развивает устойчивость к флуконазолу в
процессе лечения, а C. krusei генетически устойчива к
флуконазолу
Широкое
применение
антимикотических
препаратов,
направленных именно на C. albicans, приводит к селекции
других видов рода Candida. После проведения терапии, при
повторном кандидозе высока вероятность выявления другого
вида Candida

38.

ИНБИОФЛОР- МАКСИ
Комплексное исследование микрофлоры уретрогенитального тракта

39.

ИНБИОФЛОР- МАКСИ
Комплексное исследование микрофлоры уретрогенитального тракта
Пример результата анализа

40.

Подготовка к исследованию
o Обследование женщин целесообразно в первой фазе менструального
цикла, не ранее 5-го дня. Допустимо - во второй фазе цикла, не
позднее, чем за 5 дней до предполагаемого начала менструации.
o Не рекомендуется выполнять спринцевание влагалища накануне и в
день взятия биоматериала.
o Обследование возможно в день обращения при выраженных симптомах
воспаления.
o Соскоб из уретры у мужчин проводят до или через 2 - 3 часа после
мочеиспускания.
o Рекомендуется собирать биоматериал через 14 дней после применения
антибактериальных препаратов и местных антисептиков и через 1 месяц
после применения антибиотиков перорально.
o Не следует брать биоматериал ранее 24-48 часов после полового
контакта, интравагинального УЗИ и кольпоскопии.

41. Подготовка к исследованию

Рекомендации по взятию соскоба эпителиальных клеток МПС
для исследований методом ПЦР
o Крайне нежелательно брать биологический материал в один день для
цитологического исследования и ПЦР!
o Для взятия соскоба из влагалища и цервикального канала использовать цитощетку (1)
o Для взятия соскоба из уретрального канала – универсальный уретральный зонд (2)
1
2
o Допустим следующий порядок взятия биоматериала:
Вариант 1
Посев (микробиология)
Мазок (бактериология)
ПЦР
Вариант 2
Посев (микробиология)
Мазок (бактериология)
Цитологическое исследование

42.

Что ИНБИОФЛОР даёт врачу?
o Универсальный подход к оценке биоценоза:
возможность «собрать» индивидуально
необходимый набор исследований под
конкретную клиническую задачу для любого
пациента
o При мониторинге эффективности терапии,
нет необходимости повторно заказывать
полные профили комплекса
o ИНБИОФЛОР-МАКСИ

43.

Спасибо за внимание!