Патогенные спирохеты

1.

Патогенные спирохеты
Зав.кафедрой,
д.м.н., профессор
Г.И.Чубенко

2.

Согласно таксономии Берги входят в
1 группу.
семейства Spirochaetacae и Leptospiraceae.
К семейству Spirochaetacae относятся
свободноживущие, комменсальные и
паразитические бактерии семи родов.

3. Таксономия спирохет

порядок
Spirochaetales
семейство
Spirochaetaceae
семейство
Leptospiraceae
род
Treponema
род
Spirochaeta
род
Borrelia
род
Serpulina
род
Leptospira
род
Leptonema
род
Cristispira
Treponema
Borrelia
Leptospira

4. Общая характеристика спирохет

тонкие спирально завитые бактерии
длиной 3-500 мкм,
располагаются одиночно либо образуют
цепочки, подвижные - три типа движения
различаются по своим тинкториальным
свойствам (плохо воспринимают
анилиновые красители), импрегнации
серебром или окраске по РомановскомуГимзе.

5.

Спор не образуют; некоторые имеют
внутриклеточные включения и в
окрашенных мазках выглядят поперечно
исчерченными.
аэробы или факультативные анаэробы,
хемоорганотрофы, используют в качестве
источников углерода и энергии —
аминокислоты и жирные кислоты.
Имеют тенденцию к образованию
инволютивных форм.

6. Род Treponema

Организм
T.pallidum
ssp.pallidum
T.pallidum
ssp.pertenue
Заболевание Распостраненность
Повсеместно
Сифилис
Фрамбезия Тропики. Африка,
Южная Америка,
Карибы, Индонезия
Засушливые районы.
Беджель
T.pallidum
Африка, Средний
ssp.endemicum
Восток
Теплые, сухие районы.
Пинта
T.carateum
Центральная и Южная
Америка

7. Т. pallidum подвид pallidum

Возбудитель сифилиса — хронического
венерического заболевания с
цикличным течением.
Возбудитель был выделен в 1905 г.
Шаудинным и Хоффманном .

8. Эпидемиология

Заболевание регистрирует повсеместно.
Сифилис — антропонозная инфекция.
Болеют только люди, которые являются
резервуаром инфекции в природе.
Передача инфекции происходит половым
путем и значительно реже — через
белье и другие предметы.

9. Морфология возбудителя сифилиса

спиралевидной формы с одинаковыми по высоте
завитками, которых может быть до 14; средние
размеры 6-14 х 0,2-0,3 мкм.
В периплазматическом пространстве имеют 3
фибриллярных нити.
В культурах размеры могут быть значительно
большими;
движения разнообразны от винтообразных до
сгибательных.
При окраске по Романовскому-Гимзе окрашиваются
в слабо розовый свет.
Способны образовывать L- формы и цисты.
Основной способ размножения — поперечное
деление (один раз в 30—32 часа).

10. Строение T.pallidum

С - капсульный слой;
ОМ - внешняя мембрана;
F - флагелла;
CW - пептидогликан;
CM -ЦПМ
CF - цитоплазматические филаменты

11.

12. Резистентность

Малоустойчивы
во внешней среде. При
прогревании при температуре 40оС в течение часа
утрачивают патогенные свойства. При температуре
55 оС погибают через 15 минут.
Возбудитель сохраняется в течение 3-6 сут при 25
оС в жидкой среде содержащей редуцирующие
агенты, а также в течение 24 ч в крови при
температуре 4 °С.
В 0,5 % растворе НСl моментально утрачивают
подвижность.
Чувствительны к тяжелым металлам (ртуть, висмут,
мышьяк) и обычным дезинфицирующим
веществам.

13. Культуральные свойства

Факультативный анаэроб; чрезвычайно прихотлив и
практически не растёт на искусственных средах.
Культивирование в искусственных условиях вызывает
потерю патогенных свойств.
Для выращивания бледных трепонем обычно используют:
печёночный бульон дополненный наличием кусочков
печени и яичек кролика
бульон из бычьих сердец с тиогликолятом Na или
сывороткой человека, либо асцитической жидкостью
Среду 199, дополненную печеночным бульоном и кроличьей
сывороткой.
Инкубируют при температуре 35 о С
Заражение кроликов (в яичко)
среды Уленгута и Терских

14. Биохимические свойства

Некоторые штаммы образуют индол и H2S.
Некоторые разжижают желатин
или разлагают глюкозу, галактозу, сахарозу,
мальтозу и маннит с образованием
кислоты, а некоторые разлагают лишь
глюкозу; единичные штаммы
гемолизируют эритроциты человека.

15. Род Treponema

Treponema
Виды, полученные в культуре
Культивируемые виды
Сбраживающие
углеводы
T.pallidum
ssp.pallidum
Не сбраживающие
углеводы
T.pallidum
ssp.endemicum
T.denticola
T.bryantii
T.minutum
T.pectinovorum
T.refringens
T.phagedenis
T.scoliodontum
T.saccharophilum
T.vincentii
T.socranskii
T.pallidum
ssp.pertenue
T.carateum
T.paraluiscuniculi
T.succinifaciens

16. Важнейшие Аг трепонем

термолабильные белковые антигены;
термостабильные полисахаридные
антигены;
липоидные антигены, сходные с
кардиолипином, получаемым спиртовой
экстракцией из мышц сердца животных;

17. Патогеннocть

К факторам вирулентности бледной
трепонемы относят белки наружной
мембраны и ЛПС, проявляющие
токсические свойства после освобождения
из клетки.
Способность трепонем проникать вглубь
тканей, также образовывать цисты.

18.

Наличие белка адгезина обеспечивает
«прилипание» микроорганизма к клетке будущего
хозяина. Данный белок взаимодействует с белком
фибронектином клеток слизистых оболочек.
Наличие миофибрилл и форма спиральки
способствуют более глубокому проникновению в
организм.
Антифагоцитарная активность обусловлена
способностью связывать фибронектин.

19.

Липопротеины оболочки обеспечивают развитие
воспалительного процесса в месте присутствия.
Изменчивость антигенных свойств и
способность к образованию Л-форм приводят к
ускользанию от действия антибактериальных
препаратов, а также к невозможности создать
вакцину.
Способны жить в интерстиции и там же
размножаться.

20. Этиопатогенез

Инкубационный период варьирует по
продолжительности от 10-11 до 90
суток, в среднем — 21-24 дня.

21. Периоды развития сифилиса

3-4 н
Инкубационный период
3-4 н Серонегативный
7-8 н.
Первичный сифилис
Серопозитивный
3-4 н
3- 4 года
Вторичный сифилис
(свежий, скрытый,
рецидивный)
До конца жизни
Третичный
сифилис

22.

Образование
первичного очага
— твердого шанкра
в месте входных
ворот инфекции с
последующим
проникновением в
регионарные
лимфоузлы, где
возбудитель
размножается и
накапливается

23. Вторичный сифилис

Генерализация инфекции,
сопровождающаяся
проникновением и
циркуляцией возбудителя
в крови, что проявляется
кожными высыпаниями.
Продолжительность
вторичного сифилиса у
нелеченых больных
колеблется. На
протяжении второй
стадии возможно
несколько рецидивов.

24.

Вследствие гематогенного
распространения возбудителя наблюдается
системное поражение организма,
развивается
специфическая розеолезная, папулезная,
пустулезная сыпь. При этом также
страдают и все органы и системы
организма, поражается нервная система,
кости, печень, почки и многое другое.

25. Третичный сифилис

Образование инфекционных
гранулем (гуммы, склонные
к распаду), локализующиеся
в коже, внутренних органах
и тканях. Данный период у
не леченых больных
продолжается несколько лет

26. Поздний сифилис

У 1/3 больных развивается нейросифилис.
Заканчивается поражением ЦНС
(прогрессивный паралич), либо спинного мозга
(спинная сухотка).

27. Врождённый сифилис

Развивается при инфицировании плода от больной
матери (возбудитель проникает по пупочной вене
или лимфатическим щелям пупочных сосудов).
У больных женщин наблюдают выкидыши во второй
половине беременности либо мертворождения.
В случае рождения жизнеспособного ребёнка
клинические проявления можно наблюдать сразу
после рождения (ранний врождённый сифилис)
либо в возрасте от 5 до 15 лет (поздний
врождённый сифилис).

28.

29. Лабораторная диагностика

30. РСК- RW

При первичном сифилисе становится
положительной не ранее, чем через 2-3 недели
после появления твердого шанкра или через 56 недель после заражения
Эффективность резко снижается при
третичном сифилисе (75%)
После окончания терапии, начатой на ранних
этапах, реакция становится отрицательной
через 1,5-8 месяцев
Если лечение начато на поздних этапах, то
реакция сохраняется положительной долгие
годы
Характерны ложноположительные реакции
(0,03-2,5%)

31. Антигены для серодиагностики сифилиса

Нетрепонемные антигены
Кардиолипиновый АГ для РСК
Кардиолипиновый АГ для микрореакции
преципитации
VDRL (Veneral Disease Laboratories test)
Трепонемные антигены
Из культуральных трепонем (шт. Reiter,
«казанские» штаммы)
Из патогенных трепонем (шт.Nicols,
свежевыделенные штаммы)
Генноинженерные антигены

32. Ложноположительные реакции при проведении нетрепонемных тестов

ОСТРЫЕ
ХРОНИЧЕСКИЕ (более 6 мес).
(продолжительностью
менее 6 мес)
заболевания соединительной
Гепатит
ткани (системная красная
инфекционный
волчанка)
мононуклеоз
заболевания связанные с
вирусная пневмония
нарушениями синтеза
корь
иммуноглобулинов
другие вирусные
наркомания
инфекции
малярия
диабет
иммунизация
лепра
беременность
онкологические заболевания

33.

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ
РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ПРИКАЗ N 87
от 26 марта 2001 г.
О СОВЕРШЕНСТВОВАНИИ
СЕРОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ
СИФИЛИСА
«Поскольку ИФА и РПГА являются более
высокочувствительными, специфическими и
воспроизводимыми тест - системами, которые
можно использовать в качестве отборочных и
подтверждающих тестов...»

34. Реакции для серодиагностики сифилиса согласно приказа № 87

1. Микрореакция преципитации с кардиолипиновым
антигеном (МР), зарубежные отборочные тесты
(VDRL, RPR) и другие.
2. Иммуноферментный анализ (ИФА). Аг из
культуральных или патогенных бледных трепонем.
3. Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА). Аг из
культуральных или патогенных бледных трепонем.
4. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) в следующих
модификациях: РИФ-абс, РИФ-ц, РИФ с капиллярной
кровью из пальца. Аг - патогенная бледная трепонема
штамма Никольса.
5. Комплекс серологических реакций на сифилис (КСР):
РСК с трепонемным и кардиолипиновым антигенами и
МР. РСК можно заменять на ИФА или РПГА.
6. Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ).
Аг - патогенные бледные трепонемы штамма Никольса.

35.

36. ИФА

В зависимости от используемых антигенов:
Лизатные – лизированный или
обработанный ультразвуком культуральный
штамм
Рекомбинантные – генно-инженерные белки
– аналоги белковых антигенов трепонем
Пептидные – синтетические фрагменты
белков

37.

38.

39.

40. Лечение

Этиотропное:
проводят пенициллинами. При непереносимости
пенициллинов применяют тетрациклины,
цефтриаксон. Антибиотикорезистентные штаммы
трепонем практически не регистрируются.
При третичном сифилисе лечение
симптоматическое.

41. Профилактика

Средства неспецифической
профилактики аналогичны
предупреждению большинства
венерических болезней.

42. род Borrelia

включает около 20 видов.
Спиральные (3-10 неправильных крупных
завитков) бактерии размерами 3-20<0,2-0,5
мкм; локомоторный аппарат составляют
фибриллы, обычно вращающиеся в одном
направлении. Грам «-», хорошо
окрашиваются анилиновыми красителями,
особенно после протравливания фенолом.

43.

44.

Для человека патогенны:
возбудитель эпидемического (вшивого)
возвратного тифа В. recurrentis
и эндемических (клещевых) возвратных
тифов — В. duttoni, В. burgdorferi и др.

45.

46. ВОЗБУДИТЕЛЬ СИСТЕМНОГО КЛЕЩЕВОГО БОРРЕЛИОЗА

Borrelia burgdorferi (болезнь Лайма)инфекционное природно-очаговое
заболевание. Характеризуется
трансмиссивным путем передачи,
полиморфизмом клинических
проявлений.
Впервые выделены В.Бургдорфер в 1981
году от клещей.

47. Морфология

В. burgdorferi — самая крупная боррелия,
средние размеры 20-300 х 0,2-0,3 мкм.,
строение идентично таковому у прочих
боррелий.

48. Характеристика возбудителей Лайм-боррелиозов (иксодовых боррелиозов)

Спиралевидные бактерии (3-10 неправильных
крупных завитков)
Грамотрицательные
Строгие анаэробы
Температурный оптимум 30-34оС
Сохраняются при низких температурах (-7090С) до нескольких лет
Инактивируются формалином, фенолом,
этиловым спиртом, УФ.
Требовательны к питательным средам
Имеют уникальные линейные плазмиды

49. Borrelia burgdorferi

50.

51. Геновиды B.burgdorferi

Геновид
B.burgdorferi
senu lato
B.burgdorferi
sensu stricto
B.garinii
B.afzelii
B.lusitaniae
B.valaisiana
B.andersonii
B.bissetti
B.japonica
B.tanukii
B.turdi
Переносчик
клещ
клещ
клещ
клещ
клещ
клещ
клещ
клещ
клещ
клещ
Географическое
распространение
Патогенность для
человека
Северная Америка,
Евразия
Повсеместно
Евразия
Европа, Северная
Африка
Евразия
Северная Америка
Северная Америка
Азия
Азия
Азия
Патогенна
Патогенна
Патогенна
Не установлена
Не установлена
Не установлена
Не установлена
Не установлена
Не установлена
Не установлена

52.

53. Культивирование

Оптимальная температура роста возбудителя
болезни Лайма от 33 до 37 С. Боррелии
культивируют на жидкой питательной среде,
содержащей множество компонентов.
Основное требование к питательным средам —
наличие нативного белка ( среды АристовскогоГельцера или Клиглера- Робертсона).
Максимальный рост наблюдают на 4-7 сут.

54. Этиопатогенез

Боррелии попадают в организм человека
только со слюной клеща, во время
присасывания

55. Патогенез

Длительность инкубационного периода болезни
Лайма варьирует в широких пределах – от 1
дня до 53 дней, составляя в среднем 12 дней
В месте присасывания клеща, развивается
мигрирующая кольцевидная эритема.
От места внедрения с током лимфы и крови
возбудитель попадает во внутренние органы.
Погибая, боррелии выделяют эндотоксин, который
обуславливает каскад иммунопатологических
реакций.
Возбудитель длительно более 10 лет сохраняется
в организме

56. Мигрирующая эритема

57.

58.

Одним из этапов патогенеза является
активация синтеза интерлейкина –I.
Ил –I стимулирует синтез коллагеназы
и простагландиноподобных веществ,
которые вызывают деградацию
коллагена и соединительных тканей
суставов на поздней стадии
боррелиоза.

59.

60.

61. Классификация болезни Лайма

По клиническим признакам:
1. Острое и подострое течение.
а). Эритемная форма.
б). Безэритемная форма с
преимущественным поражением нервной системы - сердца суставов.
2.Хроническое течение.
а) Непрерывное.
б) Рецидивирующее с
преимущественным поражением: нервной системы; - суставов; кожи; - сердца.

62. Клинические проявления и стадии Лайм-бореллиоза

Стадия 1
Локальная инфекция
Стадия 2
Ранние органные
поражения
Стадия 3
Поздние органные
поражения
Неспецифические
симптомы:
-Лихорадка
-Артралгия
-Миалгия
-Оссалгия
-Лимфоаденопатия
-Головная боль
-Мигрирующая эритема
– 30-50%
-Лимфоцитома кожи до
18%
-Нервная система:
-Менингит
-Менингорадикулит
-Цереброваскулярные
нарушения
-Миозит
-Эндокардит
-Гепатит
-Поражение глаз
-Поражение
железистых тканей
-Атрофический
акродерматит с
моно(поли) невритом
-Прогрессирующий
энцефаломиелит
-Цереброваскулярные
нарушения
-Поражение кожи:
-Атрофический
акродерматит
-Лимфаденома кожи
-Бляшечная
склеродермия
-Поражение суставов
(моно-/и полиартрит)

63.

64. Иммунитет

Существенное значение имеет накопление
специфических иммунных комплексов,
содержащих антигены спирохет, в синовиальной
оболочке суставов, дерме, почках, миокарде.
Скопление иммунных комплексов привлекает
нейтрофилы, которые вырабатывают различные
медиаторы воспаления, биологически активные
вещества и ферменты, вызывающие
воспалительные и дистрофические изменения в
тканях.

65.

Иммунный ответ относительно слабый,
носит нестерильный характер.
У переболевших может быть
повторное заражение спустя 5 - 7 лет.

66. Лабораторная диагностика

Боррелии могут быть выделены в
чистой культуре из пораженных
тканей и биологических жидкостей
больного человека (краевая зона
мигрирующей кольцевидной эритемы,
биоптаты кожи при
доброкачественной лимфоцитоме
кожи и хроническом атрофическом
акродерматите).

67. Лабораторная диагностики боррелиоза Лайма

Микроскопический метод
материал от людей – РИФ,
импрегнация серебром
клещи – темнопольная микроскопия
Культуральный метод (биоптаты, кровь,
ликвор и т.п.)
ПЦР
Серодиагностика
РИФ
РСК
ИФА

68.

На ранних стадиях болезни Лайма
серологическое исследование
примерно в 50% случаев
неинформативно, поэтому важно
исследовать парные сыворотки с
интервалом в 20-30 дней.

69. Экстренная профилактика боррелиоза Лайма

• Доксициклин 0,1 - 2 раза в день в течение 5-ти дней
или,
• Бициллин-5 - 150000U БД в/м однократно или,
• Ретарпен - 2400000 в/м однократно или,
• Тетрациклин 0,25 - 3 раза вдень в течение 5-ти дней
или
• Эритромицин 0,1-3 раза в день в течение 5-ти дней

70. Профилактика

Специфическая профилактика не разработана.
Индивидуальная профилактика заключается в
использовании плотной одежды, покрывающей
открытые участки тела, применение репеллентов,
проведение само- и взаимо- осмотров.
Обнаруженный клещ должен быть немедленно
удален, а место присасывания смазывают йодом.
Применение акарицидов (веществ, убивающих
клещей) ограничено.

71. Лептоспиры

порядок
Spirochaetalis
семейство
Leptospiraceae
род
Leptospira
L.interrogans
L.inadai
L.noguchii
L.biflexa
L.weilii
L.meyeri
L.santarosai
L.wolbachii
L.burgpetersensis
L.parva
L.kirschneri
род
Leptonema
род
Turneria ??
L.illini
L.parva??

72. Лептоспиры

• имеют тесно
прилегающими друг к другу
12—18 завитков и двумя
вторичными завитками,
похожие на буквы S или С .
• Чрезвычайно подвижны. У
живых лептоспир из-за
быстрого вращения вместо
концевых завитков видны
образования в виде пуговки.
• Плохо окрашиваются
анилиновыми красителями

73. Свойства и условия культивирования лептоспир

Аэробы
Медленно растущие, продолжительность
инкубации 6-14 дней (до 4 недель и дольше)
Оптимум рН 7,2-7,6
Оптимум температуры 28-30оС
Устойчивы к низким температурам и
замораживанию
Чувствительны к высоким температурам
(60оС и выше), некоторым дезинфектантам
(0,1% р-р соляной кислоты, 0,5% р-р фенола)
Чувствительны к тетрациклину,
пенициллину, стрептомицину

74. Среды для лептоспир

Фосфатно-сывороточная среда Терских. –
фосфатный буфер с pH 7,2-7,6 + 10 капель
инактивированной кроличьей сыворотки на 5 мл
среды.
Среда Ферворта-Вольфа: среда Терских + пептон
+ NaCl
Твин-альбуминовая среда
Селективные среды - к перечисленным выше
жидким средам добавляют 5-фторурацил в
концентрации 100 мкг/мл.

75.

К факторам вирулентности относятся
способность к инвазии, устойчивость к
фагоцитозу.
Их длительная персистенция приводит к
повреждению эндотелиальных клеток и
появлению геморрагии, а также очагов
некроза в печени.

76.

Лептоспироз — зоонозная инфекция.
Она может протекать у животных в
хронической форме с выделением
бактерий с мочой (полевки, крысы,
песчанки, хомяки и др. а также
домашних животных- свиньи, крупный
рогатый скот, собаки.

77. Заражение человека

Пути передачи:
Основной – водный
Дополнительные – контактный, пищевой
Входные ворота: незначительные повреждения
кожи и неповрежденные слизистые оболочки
полости рта, носа, глаз, желудочно-кишечного и
мочеполового трактов

78. Патогенез

Инкубационный период варьирует от 2 до 19
сут (в среднем 7-13 сут).
По лимфатическим путям лептоспиры
попадают в кровь –лептоспиремия ( 4- 5
суток со дня заражения) и в
паренхиматозные органы (6 сутки). Чаще
развиваются комбинированные поражения.
Для лептоспироза наиболее характерно
поражение печени, развитие желтухи.

79.

Начиная со 2-й недели заболевания,
поражаются почки, лептоспиры также
обнаруживаются в селезенке, костном мозге,
лимфатических узлах.
Болезнь чаще претерпевает обратное
развитие и заканчивается выздоровлением.

80.

81.

3.1. ПРОФИЛАКТИКА ИНФЕКЦИОННЫХ
БОЛЕЗНЕЙ
ЭПИДЕМИОЛОГИЯ, ДИАГНОСТИКА И
ПРОФИЛАКТИКА
ЗАБОЛЕВАНИЙ ЛЮДЕЙ ЛЕПТОСПИРОЗАМИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
МУ 3.1.1128-02

82. Исследуемый материал для диагностики лептоспироза

кровь
моча
спинномозговая жидкость
при летальных исходах - паренхиматозные
органы, грудной и брюшной транссудат.

83. Методы диагностики лептоспироза

1-я неделя (период лептоспиремии) -
микроскопия цитратной крови, посев крови,
определение ДНК лептоспир в крови методом
ПЦР, заражение лабораторных животных.
С конца 1-й, начала 2-й недели серодиагностика с помощью:
микроагглютинации лептоспир (РМА),
макроагглютинации на стекле (РА),
иммуноферментного анализа и др..
Начиная со 2-й недели – исследование ликвора
Начиная с 3-й недели - исследование мочи.

84.

85. лечение

Этиотропное: антибиотики (пенициллин и
др.),
Специфическое: иммуноглобулин
лептоспирозный (против наиболее
распространенных сероваров).

86. Вакцинопрофилактика

в группах подверженных заражению.
Вакцинацию проводят поливалентной
инактивированной (фенолом) вакциной,
содержащей антигены сероваров
L. icterohaemorragiae, роmоnа, grippotyphosa трехкратно с недельными интервалами.

87.

Благодарим за внимание!