Оптимизация условий выделения протопластов подсолнечника

1.

Оптимизация условий
выделения
протопластов
подсолнечника
Авторы проекта: Гульянц Кристина Арменовна,
Объедкова Элина Робертовна, Саркисян Диана Тиграновна
ГБОУ г. Москвы Школа 641, 10 класс
Руководитель проекта: Зав. кафедрой естественных наук ГБОУ
Школы №641 им. С. Есенина, учитель биологии и химии Попова
Ольга Алексеевна
Якуб Виктор Иванович-учитель химии
Научный руководитель: Гарибян Цовинар Саркисовна, к. т. н.,
с.н.с. лаборатории маркерной и геномной селекции растений

2.

Актуальность
• В связи с ведущей ролью подсолнечника (Heliánthus ánnuus), как одним из важных масличных культур
не только в России, но и во всем мире, актуальным становится изучение методов, увеличивающих
получение и продуктивность данного растения.
• Получение растений из протопластов, c использованием методов культуры клеток и тканей, является
незаменимой технологией для генно-инженерных исследований растений Протопласты-клетки,
лишенные целлюлозной оболочки, нашли широкое применение в биотехнологии при гибридизации
соматических клеток, переносе субклеточных частиц, геномного редактирования и т. д.
Протопласты подсолнечника под
микроскопом

3.

Цель и задачи
Получение протопластов разных сортов подсолнечника
Объектами исследований служили растения отечественных подсолнечника отечественных сортов Победа, СПК и
Джинн.
Для выделения протопластов подсолнечника отбирали экспланты (листья) из 2-х недельных стерильных
растений подсолнечника.
В работе были изучены следующие методы:
Выделение и культивирование протопластов
Приготовление питательных, ферментных сред, маточных и промывочных растворов
Стерилизация растворов, сред, лабораторной посуды и инструментов, семян, биологического материла и т. д.
Центрифугирование
Введение семян в культуру in vitro
Подсчет протопластов под микроскопом
Сравнительный анализ полученных экспериментальных данных

4.

Методы исследования
• Стандартные методы приготовления питательных сред и ферментативных
растворов
• Методы стерилизации лабораторной посуды, инструментов, питательных
сред и растворов
• Метод введения семян в культуру in vitro
• Метод выделения протопластов
• Метод подсчета полученных протопластов

5.

Объекты исследования
Сорт подсолнечника Победа
Джин
Внешний вид
урожайность ц/га
31,6 ц/га
32,6 ц/га
содержание белка
20%
21%
масличность %
42-45%
44-47%
срок созревания
(группа спелости)
Среднеспелый
Среднеспелый

6.

Приготовление питательной
среды
Добавление CaCl2 с помощью пипетки
Взвешивание сахарозы

7.

Стерилизация
Чистка семян
Промываем семена в мешочках в
мыльном растворе

8.

Введение семян в культуру
in vitro

9.

Приготовление
ферментного раствора
Эксплант в ферментном растворе
Условия инкубации: 16 часов при
температуре 29°C в темном термостате

10.

Выделение протопластов

11.

Выделение протопластов

12.

Результаты исследования
подсчет протопластов с помощью камеры Горяева
протопласты подсолнечника под микроскопом