Общая характеристика ферментов как биологических катализаторов

1.

Общая характеристика
ферментов
как биологических
катализаторов

2. Ферменты (энзимы) – вещества белковой природы, способные каталитически ускорять протекание химических реакций

ФЕРМЕНТЫ
(ЭНЗИМЫ)
ПРИРОДЫ,
БЕЛКОВОЙ
КАТАЛИТИЧЕСКИ
УСКОРЯТЬ
–
ВЕЩЕСТВА
СПОСОБНЫЕ
ПРОТЕКАНИЕ
ХИМИЧЕСКИХ РЕАКЦИЙ
1.
2.
3.
4.
5.
Значение для изучения:
Ферменты - биологические регуляторы
химических процессов в клетке (основа
жизнедеятельности);
Нарушения в их структуре и функции –
возникновение энзимопатий.
Энзимодиагностика.
Энзимотерапия.
Использование к качестве реактивов для
определения метаболитов.

3.

Сходство ферментов с небиологическими
катализаторами заключается в том, что:
1. Небиологические катализаторы и энзимы ускоряют
энергетически возможные реакции;
2. Ведут реакции в обход энергетического барьера;

4.

Сходство ферментов с небиологическими
катализаторами заключается в том, что:
Свободная энергия
Еа
Е’а
Начальные
субстраты
Конечные
продукты
Еа – энергия активации некатализируемой реакции
Е’а – энергия активации катализируемой ферментами реакции
Время

5.

Сходство ферментов с небиологическими
катализаторами заключается в том, что:
3. В ходе катализа направление реакции не
изменяется;
4. Не расходуются во время реакции;
5. Требуется небольшое их количество.

6.

Отличие ферментов от небиологических
катализаторов заключается в том, что:
1. Скорость ферментативных реакций выше, чем
реакций,
катализируемых
небелковыми
катализаторами;
2. Ферменты обладают высокой специфичностью;
3. Энзимы
действуют
при
определенных
оптимальных
условиях
(температура,
рН,
микроэлементы, кооперативность);
4. Скорость
ферментативной
реакции
может
регулироваться.

7.

Основные свойства ферментов
как биологических
катализаторов
А. Субстратная специфичность
Б. Каталитическая специфичность
В. Лабильность ферментов
Г. Способность ферментов к регуляции

8.

Структура ферментов
Фермент (энзим)
Простой белок
Сложный белок
(РНК-аза,
пищевые ферменты)
(холофермент)
Белковая часть
(апофермент)
Небелковая часть
Простетическая
группа
Кофермент

9.

Небелковая часть
1. Производные витаминов
2. Гемы, входящие в состав цитохромов, каталазы,
пероксидазы, гуанилатциклазы, NO-синтазы и
являющиеся простетической группой ферментов
3. Нуклеотиды – доноры и акцепторы остатка
фосфорной кислоты
4. Убихинон, или кофермент Q, участвующий в
переносе электронов и протонов
5. Фосфоаденозилметионин,
участвующий
в
переносе сульфата
6. S-аденозилметионин – донор метильной группы
7. Глутатион, участвующий в окислительновосстановительных реакциях

10.

Функции небелковой части фермента
1. Перенос атомов водорода, электронов
(окислительно-восстановительные реакции – НАД,
ФАД и др.).
2. Перенос химических групп (фосфопиридоксаль,
биотин и др.)
3. Реакции синтеза, изомеризации, расщепление связей
(ТДФ и др.)

11.

Активные центры ферментов
Субстратный
Каталитический
Аллостерический
Закономерности в построении активных центров
1. В построении активных центров принимают
участие
небольшое
количество
радикалов
аминокислот, обычно находящихся на значительном
расстоянии друг от друга в полипептидной цепи.
2. Чаще всего в состав центра входят радикалы гис,
сер, лиз, асп, цис.
3. В построении центров сложных ферментов
участвуют химические группировки небелковой
части.

12.

Активные центры ферментов
Субстратный
Каталитический
Аллостерический
Закономерности в построении активных центров
4. Если фермент является олиго- или мультимером, то
обычно на каждом протомере есть субстратный и
каталитический участки.
5. Энергия взаимодействия субстрата с активным
центром слабая с образование нековалентных связей
6. Активные центры формируются при образовании
третичной и четвертичной структуры белковой части в
процессе взаимодействия с субстратом (индуцированное
соответствие).

13.

Схема строения активного центра фермента

14.

Формирование активных центров
химотрипсина
А-цепь(13)
S–S
В-цепь(140)
S–S
С-цепь(96)
S–S
S–S
195-сер
16-илей
57-гис
102-асп

15.

Абсолютная субстратная специфичность
NH2
C
NH2
NH
(CH2)3
+
NH
Н2О
Аргиназа
COOH
NH2
CH
(CH2)3
CH
+
COOH
NH2
Орнитин
NH2
C
NH2
O + Н2О
Уреаза
Мочевина
CO2 +2 NH3

16.

Групповая субстратная специфичность
CH2
O
C
CH
O
C
CH2
O
C
O
CH2
R1
Панкреатическая
O
липаза
R2 +2 Н2О
CH
O
COOH
COOH R2
R3 R1
Триацилглицерол
OH
O
C
O
R2
CH2 OH
2-Моноацилглицерол

17. Групповая субстратная специфичность

ГРУППОВАЯ СУБСТРАТНАЯ СПЕЦИФИЧНОСТЬ
(фен, тир, три, глу, асп)
Пепсин
- NH2
Трипсин
- СООH (лиз, арг)
Химотрипсин
- СООH (тир, фен, три)

18. Групповая субстратная специфичность

ГРУППОВАЯ СУБСТРАТНАЯ СПЕЦИФИЧНОСТЬ
ОH
Тир
СH2
H
NH
С
СО
NH
С
H
СО
NH
Н
R1
Пепсин
С
R3
Химотрипсин
СО

19.

Стереоспецифичность
Стереоспецифичность к D-сахарам
CH2OH
H
OH
O H
+ АТФ
H
OH
H
OH
H
OH
D-глюкоза
Гексокиназа
H2C O PO3H
H
O H
H
+ АДФ
OH H
OH
OH
H
OH
D-глюкозо-6-фосфат
Стереоспецифичность к L-аминокислотам

20.

Активный центр фермента
Участок связывания
Обеспечивает
субстратную специфичность
(выбор субстрата)
Каталитический участок
Обеспечивает
каталитическую
специфичность выбора
пути превращения
данного субстрата
-Абсолютная субстратная
специфичность
-Групповая субстратная
специфичность
-Стереоспецифичность
Специфичность пути
превращения субстрата

21. Каталитическая специфичность

КАТАЛИТИЧЕСКАЯ СПЕЦИФИЧНОСТЬ
Каталитические пути превращения глюкозо-6-фосфата

22.

Механизм действия ферментов
Е+S
ЕS
ЕP
Этапы ферментативного катализа
Е+P

23.

Механизм действия ферментов
Изменение свободной энергии в ходе химической реакции,
некатализируемой и катализируемой ферментами

24.

2 H2O2
Еа
2 H2O
+
O2
18000 кал/моль
платина (11 700 кал/моль)
каталаза ( менее 2000 кал/моль)

25.

Множественные формы ферментов
Ферменты – катализирующие одну химическую
реакцию с принципиально одинаковым механизмом,
но отличающиеся друг от друга физико-химическими
свойствами, кинетическими параметрами, условиями
активации, особенностями связи белковой и
небелковой части.
Генетически
обусловленные
(изоферменты –
отличаются по
первичной
структуре белка)
Генетически
необусловленные
(возникают
вследствие
химической
модификации)

26.

Реакция, катализируемая
лактатдегидрогеназой (ЛДГ)

27.

Изоформы лактатдегидрогеназы