Микробиологическая диагностика (МБД) раневых, гнойно-воспалительных и септических инфекций

1. Диагностическая микробиология и вирусология

Лекция 3. Микробиологическая диагностика (МБД)
раневых, гнойно-воспалительных и септических
инфекций
Смеянов Владимир Владиславович, кмн
[email protected]
G. Tannock, Microbiology Today, feb. 2008

2. План лекции

1. Этиология раневых, гнойно-воспалительных, гнойносептических инфекций.
2. МБД стафилококковой инфекции
3. МБД стрептококковой инфекции
4. МБД синегнойной инфекции
5. МБД энтеробактериальных инфекций
6. МБД раневой анаэробной клостридиальной и
неклостридиальной инфекции.

3. Этиология аэробных раневых, гнойно-воспалительных, и септических инфекций

Этиология аэробных раневых, гнойновоспалительных, и септических инфекций
Семейство
Род
Наиболее значимые
виды
Заболевания
(органы)
Micrococcaceae
Staphylococcus
1.
2.
3.
S. aureus
S. epidermidis
S. saprophyticus
гнойно-восп.
разл.локали-зации,
сепсис; ВБИ
Streptococcaceae
Streptococcus
1.
2.
3.
S. pyogenes
S. pneumoniae
S. agalactae
рожа, ангина,
скарлатина, пневм.,
мпс, сердце, сепсис,
ВБИ
Enterococcus
1.
2.
E. faecalis
E. faecium
раны, хир. инф.,мпс,
сепсис
Pseudomonadaceae
Pseudomonas
1.
P. aeruginosa
хир. инф.мпс, кожа,
цнс, сердце, сепсис,
ВБИ
Enterobacteriaceae
Escherichia
Klebsiella
Proteus
Enterobacter
Citrobacter
1.
2.
3.
4.
5.
E.coli
K. pneumoniae
P. vulgaris
E. cloacea
C. freundei
киш. инф.,хир. инф.,
мпс, цнс, сепсис,
пневм., ВБИ

4. Стафилококки

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
Микроскопия: Грам+, скопления (гроздья винограда)
Коагулаза (+), ДНКаза (+): S. aureus
Культурально: фак. анаэробы, каталаза (+); ферментируют глюкозу
анаэробно
кровяной агар: β-гемолиз (S. aureus); S. epidermis (-/+); S. saprophyticus (-)
желточно-солевой агар: колонии желтого цвета (S. aureus)
маннитол-солевой агар (MSA): колонии желтого цвета (S.aureus), беcцветные
(S. epidermis; S. saprophyticus)
Экспресс-тест на S. aureus :латекс-агглютинация - частицы, покрытые
фибриногеном (коагулаза) и IgG (протеин А)
ПЦР на гены ПБД, нуклеазы
Экзотоксин (энтеротоксин) - ИФА
Стафилококковый антитоксин в сыворотке крови – РНГА
Антибиотикочувствительность – метициллин-резист. S. aureus (MRSA)
API20Staph

5.

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
Микроскопия: Грам+, скопления (гроздья винограда)
Коагулаза (+), ДНКаза (+): S. aureus
Культурально: фак. анаэробы, каталаза (+); ферментируют глюкозу
анаэробно
кровяной агар: β-гемолиз (S. aureus); S. epidermis (-/+); S. saprophyticus (-)
желточно-солевой агар: колонии желтого цвета (S. aureus)
маннитол-солевой агар (MSA): колонии желтого цвета (S.aureus),
беcцветные (S. epidermis; S. saprophyticus)
Экспресс-тест на S. aureus :латекс-агглютинация - частицы, покрытые
фибриногеном (коагулаза) и IgG (протеин А)
ПЦР на гены ПБД, нуклеазы
Экзотоксин (энтеротоксин) - ИФА
Стафилококковый антитоксин в сыворотке крови – РНГА
Антибиотикочувствительность – метициллин-резист. S. aureus (MRSA)
API20Staph

6.

7. Стрептококки

Грам+, цепочки, диплококки
Посев на кровяной агар
(+колистин+налидиксовая кислота)
Каталаза (-) (!)
Группы А (S.pyogenes), B (S. agalactae) –
реакция преципитации, ИФА
S.pyogenes – PYR тест (пиролидониламинопептидаза)
S. agalactae – CAMP тест (усиливает
гемолиз S. aureus)
Серодиагностика S.pyogenes:
антистрептолизин О(ASO),
антистрептокиназа; антигиалуронидаза
API20Strep
ИФА S.pyogenes
ПЦР
альфа-гемолиз -- Streptococcus
pneumoniae («зеленящий гемолиз»)
бета-гемолиз -Streptococcus pyogenes,
S. agalactae
гамма-гемолиз – Streptococcus
(Enterococcus) faecalis

8. Энтерококки

Ранее назывались «стрептококки
группы D»
Грам+, отдельно, парно, реже цепочками
Агар с азидом натрия; рост при 6,5%
NaCl
Кровяной агар – γ-гемолиз, E. faecalis –
иногда α-гемолиз, E. faecium иногда βгемолиз
PYR тест (пирролидониламинопептидаза - ПИРАЗА) (+)
E. faecalis – гем-зависимая (псевдо-)
каталаза
Ванкомицин-резистентный E. faecalis ПЦР vanA ген
Различия E. faecalis от E. faecium биохимически (арабиноза, рамноза,
раффиноза) – API20Strep

9. Псевдомонады

«Синегнойная палочка»
Грам (-) короткие палочки
Строгие аэробы
Цетримидный (ЦПХ) агар, МПА,
Плоскирева (желчь, брил. зел, йод),
Эндо (запах земляничного мыла)
Образуют сине-зеленый пигмент
(пиоцианин) и иногда флуоресцеин
lac(-), каталаза (+), оксидаза (+),
цитохромоксидаза (+), рост 42оС
сбраживание глюкозы (-), окисление (+)
– OF –тест – API20A
Подвижны, монотрихии
Серодиагностика: РСК
ПЦР: algD (метаболизм маннозы)