Изучение различных методов диагностики туберкулеза и выявления микобактерий, вызывающих заболевания у людей

1.

КУРСОВАЯ
РАБОТА
ПО ДИСЦИПЛИНЕ
НА ТЕМУ:

2.

Актуальность исследования
■ На сегодняшний день наблюдается тенденция к
изучению различных методов диагностики
туберкулеза и выявления микобактерий,
вызывающих заболевания у людей. Это
■ По
данным
Всемирной
организации
здравоохранения,
миллионы
людей
попрежнему
остаются
инфицированными
микобактериями, и лишь небольшая часть из
них своевременно обращается в медицинские
учреждения для получения помощи.
■ В условиях растущей глобальной угрозы,
связанной с антибиотикорезистентностью МБТ,
ранняя диагностика становится критически
важной
для
эффективного
контроля
распространения инфекции.

3.

Цель исследования - оценка эффективности МГМ
диагностики ТБ и их сравнительный анализ с
традиционными культуральными методами.
Объект исследования: молекулярно-генетические методы
диагностики ТБ.
Предмет исследования: технологии МГМ, ПЦР в
реальном времени, гибридизационные технологии и
картриджные системы.
Теоретическая значимость исследования заключается в
расширении знаний о молекулярно-генетических методах
диагностики ТБ, их механизмах действия и возможностях
применения в клинической практике.

4.

Задачи курсовой работы:
■ Проанализировать общую эпидемиологическую
ситуацию по туберкулезной этиологии.
■ Изучить
роль
молекулярно-генетических
методов в диагностике ТБ.
■ Определить преимущества и недостатки
использования
МГМ
по
сравнению
с
традиционными методами.
■ Провести сравнительный анализ эффективности
различных методов диагностики ТБ на основе
данных амбулаторных карт пациентов.

5.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
ИССЛЕДОВАНИЯ
База исследования: Федеральное государственное
бюджетное учреждение «Национальный
медицинский исследовательский центр
фтизиопульмонологии и инфекционных
заболеваний» Министерства здравоохранения
Российской Федерации (ФГБУ «НМИЦ ФПИ»).
Материалы исследования представлены в виде
выборки из историй болезней 564 стационарных
больных, у которых был установлен диагноз
туберкулез.
Все пациенты были госпитализированы для лечения
и диагностики данного заболевания в период с
2021 по 2023 год.

6.

КЛАССИФИКАЦИЯ БОЛЬНЫХ
Пациенты, у которых диагностика
ТБ проводилась с помощью как
традиционных методов, так и
МГМ
Пациенты, получившие лечение
на основании результатов
исследований МГМ, таких как
ПЦР, гибридизационные и
картриджные технологии.
Пациенты, у которых диагноз был
установлен с использованием
бактериологического метода
диагностики, включая
микроскопию, культуральные
исследования и клинические
данные

7.

Возрастно-половая характеристика
групп

8.

Методы диагностики ТБ в различных
группах выборки
Группа пациентов
Бактериологический метод диагностики
Методы диагностики
- Микроскопия
- Культуральные исследования
Лечение на основании МГМ
- Клинические данные
- ПЦР (включая PCR Real Time)
- Гибридизационные технологии
Комплексный анализ
- Картриджные технологии (Xpert® MTB/RIF)
- Микроскопия
- Культуральные исследования
- Клинические данные
- ПЦР (включая PCR Real Time)
- Гибридизационные технологии
- Картриджные технологии (Xpert® MTB/RIF)

9.

Сопутствующие заболевания
пациентов выборки

10.

Клинические формы ТБ

11.

Инструменты, используемые для
диагностики ТБ в ФГБУ «НМИЦ ФПИ»
Технология МГМ
Гибридизационные технологии
Инструмент
- Микробиологические чипы - ТБ-Биочип, ТББиочип-2;
Набор
реагентов
для
определения
лекарственной чувствительности к офлоксацину
«ТБ-БИОЧИП-2»;
ПЦР в режиме реального времени
Набор
реагентов
для
определения
лекарственной
чувствительности
к
рифампицину, изониазиду «ТБ-БИОЧИП-МДР».
- Набор реагентов РеалБест ДНК МВТС;
Картриджная технология
- Набор реагентов «АмплиСенс® МБТ-EPh».
Картридж Xpert MTB/RIF

12.

Группы пациентов, отобранные для
исследования
№ п/п
Количество
человек
Тип методов диагностики
Конкретные технологии
1
96
Вторая группа - 188 чел.
ПЦР в реальном времени
2
48
Микробиологические чипы
3
44
1
67
2
29
3
94
Картриджные технологии
Третья группа - 190 чел.
ПЦР
в
реальном
времени, Исследование с помощью «ДНКкультивирование
технологии», BACTEC MGIT 960/320
Микробиологические
чипы, Исследование с помощью систем ТБкультивирование на жидких средах с Биочип, ТБ-Биочип-2, BACTEC MGIT
использованием автоматических систем 960/320
Картриджные
технологии, Исследование с помощью картриджей
культивирование
на
плотных Xpert MTB/RIF, метод абсолютных
питательных средах
концентраций
Исследование с помощью «ДНКтехнологии»
Исследование с помощью систем ТББиочип, ТБ-Биочип-2
Картридж Xpert MTB/RIF

13.

Яндекс-форма сбора статистических
данных

14.

Достоверность технологий МГМ

15.

Выявление МБТ в зависимости от
клинической формы заболевания

16.

Результаты МГМ, в зависимости от
формы ТБ
Форма ТБ
хронический
легочный
острый
легочный
инфильтратив
ный
кавернозный
секреторный
ТБ«ДНКБиочип, технолог
ии»
ТББиочип-2
0,974
0,871
Xpert MTB/RIF
0,923
0,772
0,632
0,775
0,857
-
0,91
1
-
0,875
-
1
1

17.

Выборка с диагностикой ТБ с
применением культуральных методов
Группа
Количество человек
Методы диагностики
Первая
186
Культуральные методы
Третья
190
Культуральные методы
Молекулярно-генетические методы

18.

Сравнительный анализ выявляемости МБТ с
использованием различных методов

19.

Преимущества культуральных методов
исследования диагностики ТБ
1. Высокая
чувствительность
и специфичность.
2. Возможность
определения
чувствительности
к антибиотикам.
3. Разнообразие
применения.
4. Возможность
получения
дополнительных
данных.

20.

Недостатки культуральных методов
исследования диагностики ТБ
1. Длительное время
ожидания результатов.
2. Ограниченные условия
роста.
3. Необходимость в
высококвалифицированном
персонале.
4. Риск загрязнения.

21.

Сравнительная оценка методов
диагностики ТБ
Критерий
Чувствительность и скорость выявления
Достоверность и точность
Специфика клинических форм
Характеристика
Культуральные методы, хотя и обеспечивают высокую чувствительность,
требуют значительного времени для получения результатов. В первой
группе большинство положительных результатов было получено на 30-й
сутки.
В
то
же
время,
молекулярно-генетические
методы
продемонстрировали свою скорость: 155 положительных результатов были
получены всего за 5 суток в третьей группе, что подчеркивает их
эффективность и необходимость в экстренных случаях.
В ходе исследования были проанализированы различные технологии
МГМ. Результаты показали, что абсолютный показатель достоверности
чувствительности МГМ составляет около 90%. Например, технологии ТББиочип показали положительный результат в 88% случаев, а ПЦР в
реальном времени – 89%. Эти результаты подтверждают, что молекулярногенетические методы обеспечивают высокую точность диагностики, что
критически важно для адекватного лечения.
Анализ выявляемости МБТ в зависимости от клинической формы
заболевания также показал, что молекулярно-генетические методы более
эффективно выявляют различные формы ТБ. Например, в случае
хронического легочного ТБ, МГМ продемонстрировала высокую
выявляемость (94,7%), тогда как культуральные методы требовали больше
времени для достижения аналогичных результатов.

22.

Этапы проведения ПЦР в комбайне
Этап
Добавление праймеров
Описание
В
реакционную
смесь
добавляют
специфические праймеры, направленные на
гены, характерные для Mycobacterium
tuberculosis.
Циклы термоциклирования Процесс включает циклы нагрева и
охлаждения,
что
позволяет
амплифицировать целевые фрагменты ДНК.
Анализ результатов
Полученные
результаты
будут
анализироваться
с
использованием
флуоресцентных меток, что позволит
количественно оценить наличие МБТ.

23.

Максимальные сроки поучения
результатов выявляемости МТБ

24.

Преимущества комбайна
1.
Экономическая
эффективность.
2. Компактность
и удобство
размещения.

25.

ВЫВОДЫ
■ Результаты исследования подчеркивают
важность внедрения молекулярногенетических методов в практику диагностики
туберкулеза, что может значительно улучшить
качество медицинской помощи и
эффективность борьбы с этой инфекцией.
■ Практическая значимость проявляется в том,
что результаты исследования могут быть
использованы для совершенствования
диагностики ТБ в лечебных учреждениях, а
также для разработки рекомендаций по
внедрению МГМ в повседневную практику..

26.

СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ!