Микроскопическая техника

1.

МИКРОСКОПИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА

2.

3.

МИКРОСКОПИЯ В ТЕМНОМ ПОЛЕ

4.

ПОЛЯРИЗАЦИОННЫЙ МИКРОСКОП

5.

ФАЗОВО-КОНТРАСТНЫЙ МИКРОСКОП

6.

ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ МИКРОСКОП
Суть метода заключается в том, что атомы и молекулы ряда веществ,
поглощая коротковолновые лучи, переходят в возбужденное состояние.
Обратный переход из возбужденного состояния в нормальное происходит с
испусканием света, но с большей длиной волны. Применяются ртутные и
ксеноновые лампы сверхвысокого давления, обладающие высокой яркостью
в области ближних ультрафиолетовых и сине-фиолетовых лучей. Любая
клетка живого организма обладает собственной флуоресценцией (часто
довольно слабой).
- Первичная флюоресценция – обладают серотонин, катехоламины
(адреналин и норадреналин), содержащиеся в нервных, тучных и других
клетках, после фиксации тканей в парах формальдегида.
- Вторичная флюоресценция возникает при обработке препаратов
специальными красителями – флюорохромами

7.

Ультрафиолетовая микроскопия. Используются более короткие
ультрафиолетовые лучи с длинной волны около 0,2 мкм. Полученное
невидимое глазом изображение преобразуется в видимое с помощью
регистрации на фотопластинке или путем применения специальных
устройств
(люминесцентный
экран,
электронно-оптический
преобразователь).
Интерференционная микроскопия. Используется дифференциальный
интерференционный микроскоп для изучения рельефа поверхности клеток и
других биологических объектов. В этом микроскопе пучок света от осветителя
разделяется на два потока: один проходит через объект и изменяет по фазе
колебания, второй идет, минуя объект. В призмах объектива оба пучка
соединяются и интерферируют между собой. В результате строится
изображение, в котором участки микрообъекта разной толщины и плотности
различаются по степени контрастности. Проведя количественную оценку
изменений, определяют концентрацию и массу сухого вещества.
Преимущество такой микроскопии является возможность наблюдать клетки в
процессе движения и митоза. При этом регистрация движения клеток может
производиться с помощью покадровой микрокиносъемки.

8.

ТРАНСМИССИОННЫЙ ЭЛЕКТРОННЫЙ МИКРОСКОП

9.

СКАНИРУЮЩИЙ ЭЛЕКТРОННЫЙ МИКРОСКОП

10.

ЭЛЕКТРОННАЯ МИКРОСКОПИЯ

11.

СВЕТОВОЙ МИКРОСКОП

12.

13.

ТЕХНИКА МИКРОСКОПИРОВАНИЯ

14.

15.

ОКРАШИВАНИЕ СРЕЗОВ

16.

17.

18.

Название
красителя
Свойство красителя
Структуры, которые он
окрашивает
Название окрашенных
структур
Основные
основания или их соли,
которые окрашивают
структуры кислой
природы
базофильные
гематоксилин (синефиолетовый цвет)
кармин (светло-красный)
сафранин (темно-красный),
азур II (синий)
метиленовый синий
(метахроматическое
окрашивание)
Кислые
кислоты или их соли, с
помощью которых
выявляют вещества и
структуры оснóвной
природы
структуры, богатые
нуклеиновыми
или иными кислотами
(хроматин ядер,
ядрышко, рибосомы,
аморфный компонент
межклеточного
вещества)
белковые
компоненты
цитоплазмы и
неклеточные структуры
(коллагеновые
волокна)
оксифильные
(ацидофильные,
эозинофильне)
эозин (ярко-розовый цвет)
кислый фуксин (краснолиловый)
конго красный (красный)
светлый зеленый (зеленый
цвет)
структуры,
одновременно
воспринимающие и
основные и кислые
красители
нейтрофильные, или
полихроматофильные
судан III, судан IV,
метиленовый синий
(метахроматическое
окрашивание).
Нейтральные нейтральные красящие
смеси, когда в растворе
одновременно
присутствуют основной и
кислый красители
Примеры красителей

19.

ИМПРЕГНАЦИЯ