Создание диагностикума для раннего определения субклинических эндометритов у кобыл

1.

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ
ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ
«Российский государственный аграрный университет - МСХА имени К.А.
Тимирязева»
Сидорович Елизавета Михайловна
«Создание диагностикума для раннего определения субклинических
эндометритов у кобыл»
исследования в рамках программы студенческий «Стартап»
Научный руководитель: профессор,
д.в.н. Федотов С.В.
Москва 2025 г

2. Работа выполнялась в рамках программы студенческий «Стартап»

3. Введение

Среди множества проблем ветеринарной науки и практики наиболее
значимыми продолжают оставаться такие патологии продуктивных
систем лошадей, которые приводят к потерям в области воспроизводства
стада.
В настоящий момент учеными проведено множество исследований,
посвященных послеродовым эндометритам, при том что их
распространенность среди послеродовых заболеваний составляет более
40%. Их влияние на результат оплодотворения животного представляет
собой серьезную проблему, так как сперматозоиды гибнут вследствие
воздействия на них токсичных продуктов воспаления. Даже если
оплодотворение пройдет успешно, зигота не сможет прикрепиться к
стенкам матки из-за клеточных изменений эндометрия.
Следовательно, для успешного лечения эндометритов у кобыл
необходимо внедрение ранней диагностики данной патологии.

4. Научная новизна

На кафедре ветеринарной медицины ФГБОУ ВО «Российский
государственный аграрный университет - МСХА имени К.А.
Тимирязева» при участии студенческого научного общества
(руководитель Сидорович Е.) разработан диагностикум (рабочее
название СДЭМ) для определения субклинического воспаления
эндометрия у кобыл.
Проект создания диагностикума СДЭМ для определения
субклинического воспаления эндометрия у кобыл осуществляется в
рамках студенческого стартапа.

5. Цель и задачи

Цель:
Создание диагностикума для раннего определения
субклинических эндометритов у кобыл.
Задачи:
o Проанализировать существующие методы диагностики
эндометритов у кобыл
o Разработать собственный метод диагностики
o Провести клинические испытания нового метода

6. Материалы и методы

Научно-исследовательские работы проводились кафедре ветеринарной
медицины ФГБОУ ВО «Российский государственный аграрный университет МСХА имени К.А. Тимирязева» В исследовании принимали участие 10 лошадей,
различных пород, возрастов и репродуктивного статуса.
Диагноз заболевания репродуктивных органов у кобыл ставили на
основании анализа первичного зоотехнического учета, результатов вагинального,
ректального и эхографического исследований с использованием ультразвукового
ветеринарного сканера DRAMINSKI Iscan с рабочей частотой 4,5-7,5 MHz
производства Польши.
Были отобраны пробы цирвикальной слизи для проведения
тестирования методов лабораторной диагностики. В процессе апробации
сравнивали разработанный диагностикум с классическими методами диагностики
субклинических эндометритов у самок животных: способ диагностики
эндометрита по В.С. Дюденко; диагностика скрытого эндометрита по методике
Г.Г. Козлова; методика диагностики скрытого эндометрита по Г.М. Калиновскому;
проба Уайтсайда; проба Катаринова; проба с медным купоросом.

7.

Кличка
Порода
Возраст
Жеребость
За жизнь
Анамнез
УЗИ
1.Звезда
б/п
2014
1
Роды 20.11.24
+
2.Мира
Орловский
рысак
2023
-
-
-
3.Кима
б/п
2017
-
Осеменение
20.01.2025
+
4.Рада
Советский
тяжеловоз
2003
2
Роды 2013
Роды 2016
-
5.Цапля
Ганновер
2010
1
Роды 2019
-
6.Афина
б/п
2012
-
-
+
7.Рада
б/п
2013
2
Роды 2018
Роды 2021
-
8.
Воскресение
Русская
верховая
2020
-
-
-
9.Картина
б/п
2012
1
Роды 2024
-
10.Жизель
б/п
2020
-
-
-

8. Собственные исследования

Рисунок 1 – Кобыла Звезда 2014. Линейные гиперэхогенные линии
(стрелки) в теле матки (обведены контуром) у этой кобылы были
связаны со слизью эндометрия, выявленной при биопсии, и экви
зооэпидемическим эндометритом Streptococcus equi при посеве.

9.

Рисунок 2 – Кобыла Кима 2017. Внутриматочная слизь, связанная с
бактериальным эндометритом. Слизь, обведенная синей линией.

10.

Рисунок 3 – Кобыла Афина 2019.
Слизь из эндометрия указывает
на эндометрит. Матка выделена
голубым
цветом,
слизь
обозначена синими линиями

11. Таблица 1 – Анализ микрофлоры из экссудата матки кобыл, больных послеродовым гнойно-катаральным эндометритом

Микроорган
№ п/п
измы и
грибы
1
2
3
4
5
6
7
Klebsiella
spp, в т.ч.
E. coli
Proteus spp, в
т.ч.
Citrobacter
spp
Mucor spp
Staphylococc
us spp, в т.ч.
Streptococcus
spp
Всего
Монокультура
В ассоциациях
Всего, %
кол-во проб
%
кол-во проб
%
2
3,70
9
16,67
20,37
3
5,56
7
12,96
18,52
2
3,70
6
11,11
14,81
1
1,85
6
11,11
12,96
1
1,85
1
1,85
3,70
2
3,70
8
14,81
18,52
2
3,70
4
7,41
11,11
13
24,07
41
75,93
100,00

12. Таблица 2 - Анализ микрофлоры из экссудата матки кобыл, больных хроническим гнойно-катаральным эндометритом

Таблица 2 - Анализ микрофлоры из экссудата матки кобыл, больных хроническим гнойнокатаральным эндометритом
Монокультура
В ассоциациях
Микроорганизмы и
Всего
грибы
кол-во проб
%
кол-во проб
%
%
Klebsiella spp
4
3,57
20
17,86
21,43
E. coli
6
5,36
16
14,29
19,64
0
0,00
4
3,57
3,57
Proteus spp
4
3,57
12
10,71
14,29
Citrobacter spp
1
0,89
14
12,50
13,39
Serratia spp
0
0,00
2
1,79
1,79
aeruginosa
2
1,79
4
3,57
5,36
Mucor spp
2
1,79
4
3,57
5,36
2
1,79
6
5,36
7,14
1
0,89
8
7,14
8,04
22
19,64
90
80,36
100,00
Clostridium septicum
Pseudomonas
Staphylococcus spp
Streptococcus spp
Всего

13. Апробация способов экспресс-диагностики субклинических эндометритов

Способ диагностики эндометрита по В.С. Дюденко
В пробирку вносили 2 мл лохий или слизи, добавляли 2 мл дистиллированной воды и 2 мл 20%
раствора трихлоруксусной кислоты. Фильтровали через бумажный фильтр и 2 мл фильтрата добавляли 0,5 мл
азотной кислоты. Кипятили и охлаждали, добавляли 1,5 мл 33% раствора гидроксида натрия. При положительной
реакции раствор желтел. При умеренном катаральном воспалении раствор он был желто-зеленый, при сильном
катаральном воспалении – желто-янтарный, при гнойно-катаральном – желто-оранжевый.
Рисунок 4 – Постановка пробы по В.С. Дюденко

14.

Проба Уайтсайда
По методике Попова Ю.Н (модификация) предусмотрено выявление в
цервикальной слизи лейкоцитов по изменению цвета жидкости при
добавлении к ней такого же количества 4% раствора едкого натра и
доведении до кипячения с последующим охлаждением. Если жидкость
остается бесцветной или приобретает соломенно-желтый цвет, реакция
считается отрицательной. При приобретении жидкостью лимонножелтого, серого или черного оттенка реакция считается положительной.
Рисунок 5 – Постановка пробы по Уайтсайда

15.

Проба Катаринова
В пробирку наливали 3-5 мл дистиллированной воды и добавляли пробу
слизи величиной с горошину. Содержимое кипятили в течение 1-2 минут.
При незаконченной инволюции после кипячения жидкость становилась
грязно-мутной с хлопьями, при полной инволюции осталась прозрачной.
Рисунок 6 – Постановка пробы по Катаринову

16.

Проба с медным купоросом
В пробирку наливали 2 мл слизи из половых путей, добавляли 2 мл 10%-ного
раствора едкого натрия и 10-15 капель 1 %-ного раствора медного купороса. Пробирку
закрывали пробкой, в течение 1-2 мин. хорошо взбалтывали и ставят в штатив на 10-15 мин.
Если инволюция половых органов закончена и матка полностью очищена от лохий, то
содержимое пробирки было светлым, со слабо синим или фиолетовым оттенком, с синим
сгустком в верхней части и осадком на дне. Если содержимое пробирки окрашивалось в
красный, красно-фиолетовый или ярко фиолетовый цвет - инволюция была не завершена и
их осеменять не следует.
Рисунок 7 – Постановка пробы с медным купоросом

17. Разработанный диагностикум СДЭМ

Рисунок 7 – Постановка пробы со СДЭМ
17

18. Таблица 3 - Результаты лабораторных исследований проб цервикально-вагинальной слизи, отобранных от кобыл с субклиническим

Таблица 3 - Результаты лабораторных исследований проб цервикальновагинальной слизи, отобранных от кобыл с субклиническим эндометритом
№ пп
Метод
лаборатор
ной
диагности
ки
Проб,
всего
1
Н.И.
Катаринова
2
Результаты исследований
положительный
отрицательный
Сомнительный
проб
%
проб
%
Проб
%
10
3
30
4
40
3
30
С медным
купоросом
10
2
20
5
50
3
30
3
Уайтсайда
10
5
50
2
20
3
30
4
В.С.
Дюденко
10
5
50
0
0
5
50
5
Г.Г.
Козлова
10
2
20
4
40
4
40
СДЭМ
10
6
60
3
30
1
10
18

19. Выводы

Анализ микрофлоры содержимого матки кобыл показал, что при послеродовом
гнойно-катаральном эндометрите в ней обнаруживались такие культуры
микроорганизмов как: Klebsiella (20,33 %), E. coli (18,52 %), Proteus (14,81 %),
Citrobacter (12,96 %), грибами рода Mucor (3,70 %), Staphylococcus (18,52 %) и
Streptococcus (11,11 %). Микроорганизмы в монокультуре изолировали в 24,07 %
случаев, в виде ассоциаций в 75,93 %. При хроническом гнойно-катаральном
эндометрите микрофлора была представлена: E. coli (22,83%); Klebsiella spp.
(18,48%), Proteus (15,22 %), Citrobacter (7,61 %); Clostridium septicum (5,43 %);
Pseudomonas aeruginosa (3,26 %); Serratia spp (1,09 %); грибами рода Mucor (4,35
%), Staphylococcus spp. (17,39 %), Streptococcus (4,35 %). Монокультуры
встречались в 19,57 %, ассоциаций в 80,43 % пробах.
При проведении исследований проб цервикально-вагинальной слизи, отобранных
от кобыл с субклиническим эндометритом методы Уатсайда и Катаринова дали
30% сомнительных результатов, в то время как разработанный нами диагностикум
«СДЭМ» – 10%, что свидетельствует о возможности его применения в условиях
конефермы.
Проведенные исследования позволяют рекомендовать диагностикум СДЭМ для
производства в рамках программы «Стартап».

20. Практические предложения

Исходя из полученных результатов, мы предлагаем
разработанный нами диагностикум СДЭМ для серийного
производства через программу студенческого стартапа.

21. Спасибо за внимание!