Группы крови по системе АВ0 и РЕЗУС

1. ГРУППЫ КРОВИ по системе АВ0 И РЕЗУС

ГРУППЫ КРОВИ ПО
СИСТЕМЕ АВ0
И РЕЗУС

2.

Группа крови —
это определенное сочетание
врожденных антигенных свойств
содержащихся в клетках крови, и
антител к ним, находящихся в
плазме (сыворотке).
• Две важнейшие классификации
группы крови человека —
это система AB0 и резуссистема.

3. СИСТЕМА АНТИГЕНОВ И АНТИТЕЛ АВО

Данная система находится в перечне 29
систем эритроцитов человека. Является
основной из всех изученных и возглавляет
список групп крови человека.
Система АВО была открыта венским
биологом Карлом Ландштейнером в 1901г
Основанием для ее открытия послужили
наблюдения за возможностью взаимодействия
эритроцитов крови и сыворотки между собой,
образуя в некоторых случаях конгломераты,
склеенные эритроциты в сывороточной среде.

4.

1901 год Ландштейнер впервые
опубликовал наблюдения о
существовании различий среди
эритроцитов человека.
Свойство образовывать конгломераты
было названо им положительной
реакцией агглютинации.
По этому признаку Ландштейнер
разделил людей на 3 группы: А, В
и С.
1906 год Ян Янский, исследуя
групповую принадлежность
больных, установил наличие 4
группы крови и предложил
классификацию I ,II, III, IV.

5. Составляющие характеристики

Антигены крови- А,В,О(Н) являются
генетически закрепленным свойством
форменных элементов крови, проявляющемся в
иммунном ответе и способности
взаимодействия со специфичными антителами
Антитела системы АВО -это белковые
молекулы, представлены анти А и анти В
антителами и реагирующие со специфическими
им антигенными детерминантами эритроцитов
своим активным центром.

6. ПРАВИЛО ЛАНДШТЕЙНЕРА:

Здоровые индивиды
имеют в сыворотке
АВ0 антитела к
антигенам,
отсутствующим на
их эритроцитах.

7.

Кровь каждого человека принадлежит к какой-либо
из 4-х групп системы АВО в зависимости от
присутствия на эритроцитах антигенов А и В и
соответствующих антител анти-А и анти-В в плазме.
• в группе 0(I) отсутствуют оба антигена и
обнаруживаются антитела против обоих антигенов,
анти-А и анти-В антитела.
• в группе А(II) - на эритроцитах присутствует только
антиген А и анти-В антитела.
• в группе В(III) - на эритроцитах присутствует
только антиген В и антитела анти-А.
• в группе АВ(IV) - на эритроцитах одновременно
присутствуют оба антигена - А и В а антитела

8. Наличие антигенов на эритроцитах и антител в сыворотке у различных групп крови

НАЛИЧИЕ АНТИГЕНОВ НА ЭРИТРОЦИТАХ И
АНТИТЕЛ В СЫВОРОТКЕ У РАЗЛИЧНЫХ
ГРУПП КРОВИ
ГРУППЫ КРОВИ
0
А
В
АВ
Антигены на нет
А
В
АВ
эритроцитах
Антитела в анти-А анти-В анти-А нет
анти-В
сыворотке

9. Методы определения групп крови АВО

Приказ №2 МЗРФ от 09.01.98г « Об
утверждении инструкций по
иммуносерологии» определяет алгоритм
исследований на данную характеристику
крови. Первичное исследование выполняется
во время взятия крови «сертифицированным
специалистом, имеющим подготовку по
данному разделу работы» и фиксируется в
сопроводительном направлении.
Также образец венозной крови, передается в
лабораторию, где исследование повторяется,
уточняется резус принадлежность и группа
крови.

10. СПОСОБЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГРУППЫ КРОВИ АВ0:

• по антигенам, содержащихся в
исследуемых эритроцитах, в этом случае
используют моноклональные антитела;
• по антителам , содержащимся в
исследуемой сыворотке крови, в этом
случае используют стандартные
эритроциты групп крови А, В, 0.

11. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУПП КРОВИ СИСТЕМЫ АВ0 ПРИ ПОМОЩИ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ РЕАГЕНТОВ (цоликлонов)

В основе положительного прямого
агглютинационого теста лежит реакция
антиген/антитело, обусловленная
присутствием специфичных компонентов,
способных к взаимодействию с антигенами
эритроцитов, с оценкой наличия агглютинатов
(склеенных эритроцитов антителами).
Данное явление возможно, когда эритроциты
носители антигена А и стандарт имеет анти А
антитела или эритроциты содержащие антиген
В и стандарт имеет анти В антитела.

12.

ОСНАЩЕНИЕ:
• моноклональные реагенты анти-А, анти-В
и А+В, так же реагент анти-А1для
определения подгруппы А и АВ;
Изотонический раствор натрия хлорида
0,9%;
пластинки со смачиваемой поверхностью;
пипетки;
стеклянные или пластмассовые палочки
для перемешивания
данное исследование выполняется при
хорошем освещении стола и температуре
воздуха +15°- +25°С.

13. ПОРЯДОК ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ:

1.
2.
3.
4.
5.
6.
Нанести по 1 большой капле (около 0,1 мл) каждого
реагента на пластинку;
Нанести по 1 маленькой капле ( около 0,03 мл)
исследуемой крови (эритроцитов) рядом с каждым
реагентом;
Смешать отдельными чистыми стеклянными
палочками каждую каплю крови (эритроцитов) с
соответствующим реагентом;
Покачивать пластинку, результат реакции
учитывать через 3 мин после окончания
смешивания.
Всегда подписывать рабочий планшет( ФИО,
порядок нанесения цоликлонов).
Цоликлон анти-А1 исполизовать в случае
определения в ходе реакции А(II) либо АВ(IV)
группы крови.

14.

Результаты могут быть выражены в 4-х различных
комбинациях.
а) Группа крови О(I)
реакция агглютинации отсутствует со всеми образцами сывороток анти АВ,
анти А и анти В. На исследуемых эритроцитах нет антигенов А и В

15.

б) Исследуемая кровь принадлежит к группе А(II), если в реакции с цоликлонами
анти-А и анти-АВ получен положительный результат, а с цоликлоном анти-В
получен отрицательный результат. На эритроцитах присутствует антиген А
в) Исследуемая кровь принадлежит к группе B(III), если в реакции с цоликлонами
анти-В и анти-АВ получен положительный результат, а с цоликлоном анти-А
получен отрицательный результат . На эритроцитах присутствует антиген В

16.

г) В тех случаях, когда положительный результат получен
со всеми цоликлонами, исследуемая кровь принадлежит к
группе АВ (IV). На исследуемых эритроцитах
присутствуют оба антигена, А и В.

17. ИНТЕРПРИТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ:

РЕЗУЛЬТАТЫ РЕАКЦИИ С
РЕАГЕНТАМИ
анти-А
анти-В
Анти-АВ
+
+
+
+
+
+
+
ГРУППОВАЯ
ПРИНАДЛЕЖНОСТЬ
0
А
В
АВ

18. Перекрестный метод определения групп крови АВО

Для определения полной серологической
формулы крови используется двойная или
перекрестная реакция. О группе крови АВО
судят по обнаружению на эритроцитах
присутствия антигенов А и В и сыворотке
испытуемой крови анти А и анти В антител.
Для этого необходимы:
комплект цоликлонов АВО
комплект стандартных эритроцитов АВО

19.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУПП КРОВИ СИСТЕМЫ АВ0 ПРИ
ПОМОЩИ СТАНДАРТНЫХ ЭРИТРОЦИТОВ
Самостоятельного значения метод не имеет и используется в двойной
или перекрестной реакции как подтверждающий тест лабораторной
диагностики.
1. Нанести по одной маленькой капле (10 мкл) стандартных
эритроцитов O(I), A(II), B(III) под соответствующими надписями;
2. Из пробирки с исследуемой кровью осторожно взять пипеткой
сыворотку крови пациента (100 мкл) и поместить рядом со
стандартными эритроцитами АВО, соотношение стандартных
эритроцитов и исследуемой сыворотки - 1:10;
3. Смешать отдельными чистыми стеклянными палочками каждую
каплю эритроцитов с соответствующим реагентом;
4. Покачивать пластинку, результат реакции учитывать через 3 мин
после окончания смешивания. После окончания экспозиции в те
капли, где имеется агглютинация, добавить по одной капле раствора
натрия хлорида, 0,9% для исключения неспецифической
агглютинации.
5. Данное исследование выполняется при хорошем освещении стола и
температуре воздуха +15°- +25°С

20.

Результаты могут быть выражены в 4-х различных комбинациях.
а) Исследуемая кровь принадлежит к группе О(I), если со стандартными
эритроцитами О(I) группы получены отрицательные результаты, а
положительные результаты получены в реакции со стандартными
эритроцитами A (II) и B(III), что говорит о наличии анти-А и анти-В антител.

21.

б) Исследуемая кровь принадлежит к группе А(II), если в реакции со
стандартными эритроцитами B(III) получены положительные результаты, а
отрицательные результаты получены в реакциях с стандартными эритроцитами О(I),
A(II), что говорит о наличии анти-В антител
в) Исследуемая кровь принадлежит к группе B(III), если в реакции со
стандартными эритроцитами А(II) получены положительные результаты, а
отрицательные результаты получены в реакциях со стандартными эритроцитами О
(I), В(III), что говорит о наличии в сыворотке анти-А антител.

22.

г) В тех случаях, когда а со всеми стандартными эритроцитами получен
отрицательный результат – агглютинации нет, исследуемая кровь
принадлежит к группе АВ (IV), в исследуемой сыворотке нет анти-А
и анти-В антител.

23.

ИНТЕРПРИТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ПРИ
ПРИМЕНЕНИИ ПЕРЕКРЕСТНОГО МЕТОДА
анти-АВ
анти-В
анти-А
СТАНДАРТНЫЕ
ЭРИТРОЦИТЫ
0
+
+
+
- - +
+ + +
-
А
+
+
-
ГРУППА
КРОВИ
В
+
+
-
0
(анти-АВ)
А
(анти-В)
В
(анти-А)
АВ

24. ЭРИТРОТЕСТ ГРУППОКАРТ служат для проведения экспресс-тестирования групп крови. Основным компонентом набора являются специальные

карточки. На рабочей поверхности расположены лунки с
нанесенными и высушенными моноклональными антителами
ЦОЛИКЛОН IgM класса.

25.

Помимо карточки в состав Набора ЭРИТРОТЕСТГРУППОКАРТ входят:
Пипетка для внесения
воды в лунки;
Скарификатор;
Палочки для
смешивания (5 шт.);
Инструкция по
применению.

26.

В каждую лунку на высушенные
ЦОЛИКЛОНЫ
добавляется по 1 капле воды.

27.

В каждую лунку добавляется по 1 капле
исследуемой крови.
Отдельной для каждой лунки палочкой кровь
перемешивается с растворенными
ЦОЛИКЛОНАМИ.

28.

Сразу после смешивания в части тест-лунок
начинается агглютинация эритроцитов.
Агглютинация через 30 сек.

29.

Агглютинация через 2 мин 55 сек.
В контрольной лунке агглютинации нет.
Результат тестирования: Анти-А +, Анти-В +, Анти-АВ +,
Анти-D +.
Группа крови тестируемого лица: АВ(IV) Rh+.

30. ОШИБКИ ПРИ ИССДЕДОВАНИИ ГРУППОВОЙ ПРИНАДЛЕЖНОСТИ

Неправильная маркировка пробирок с кровью, взятой для
исследования (перепутывание);
Ошибочный порядок нанесения цоликлонов на пластинку,
неправильная регистрация результатов исследования;
Нарушение техники исследования (неправильное соотношение
моноклонального реагента и исследуемых эритроцитов,
использование реагентов с истекшим сроком годности; сокращение
времени наблюдения за реакцией; нарушение температурного
режима окружающей среды).
Ошибки, связанные с аномальными свойствами тестируемых
эритроцитов, слабые формы антигена А (чаще).
Ошибки, связанные с аномальными свойствами исследуемой
сыворотки: стандартные эритроциты в присутствии исследуемой
сыворотки образуют монетные столбики, что может быть принято за
положительный результат. Добавление 1-2 капель физраствора в
пробирку и мягкое покачивание обычно разрушает монетные
столбики, но не истинные агглютинаты.

31. ПРАВИЛА, КОТОРЫЕ НАДО СОБЛЮДАТЬ ПРИ ИССЛЕДОВАНИИ ГРУППЫ КРОВИ:

использовать для исследования реактивы, в качестве
которых нет сомнения;
определение групповой принадлежности производить
перекрестным методом;
применять только стандартные эритроциты,
цоликлоны;
использовать моноклональный реагент АВ для
контроля специфичности реакции агглютинации;
кровь для исследования брать до проведения больному
гемотрансфузий;
кровь для исследования брать до переливания
плазмозамещающих растворов ( для исключения
ошибок, вызванных склеиванием эритроцитов в
монетные столбики);
обращать внимание на диагноз.

32. СИСТЕМА АНТИГЕНОВ РЕЗУС

Это
одна
из
наиболее
полиморфных
антигенных систем эритроцитов человека. В
состав ее входит около 50 различных
антигенов, которые
содержатся только в
эритроцитах человека и некоторых видов
высших обезьян.
Располагаются они на мембране эритроцита и
являются ее структурными белками. Данный
вид полипептидов несет резус-специфичность,
являясь сильными иммуногенами.

33.

Открытию системы послужили наблюдения Ландштейнера и его ученика Винера, что сыворотки морских свинок и
кроликов после иммунизации эритроцитами обезьян Macacus Rhesus агглютинируют не только эритроциты макак, но и
эритроциты людей.
Этот антиген, определяемый у 85% людей белой расы, был назван резус-фактор. Его определение обозначили Rh+, не
выявление-Rh-. Антитела соответственно получили название анти-резус.
Открытии резус-фактора явилось крупным
достижением в развитии иммуносерологии.

34. В соответствии с приказом №2 МЗРФ от 09.01.98г « Об утверждении инструкций по иммуносерологии»

Среди людей выделяют две группы крови по
системе резус:
-резус положительная (Rh+) c наличием
антигена Д на эритроцитах
-резус отрицательная(Rh-) без него на
эритроцитах.

35. ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС-ПРИНАДЛЕЖНОСТИ КРОВИ РАЗНОВИДНОСТЬ АНТИГЕНА D

ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУСПРИНАДЛЕЖНОСТИ КРОВИ
РАЗНОВИДНОСТЬ АНТИГЕНА D
НОРМАЛЬНО ВЫРАЖЕННЫЙ D:
• на эритроцитах присутствуют все
эпитопы (большинство индивидов)
D СЛАБЫЙ:
• сниженное количество антигенных
детерминант
D ВАРИАНТНЫЙ:
• количество антигенных детерминант не
снижено, но они отличаются

36. Определение резус–принадлежности при помощи цоликлона анти-D Супер

ОСНАЩЕНИЕ:
моноклональные антитела анти-D супер (IgM);
смачиваемая пластинка;
раствор натрия хлорида 0,9%;
стеклянные или пластмассовые палочки.
ПОРЯДОК ПРОВЕДЕНИЯ:
1.
2.
3.
4.
Нанести по 1 большой капле (около 0,1 мл) каждого реагента на
пластинку;
Нанести по 1 маленькой капле ( около 0,03 мл) исследуемой крови
(эритроцитов) рядом с каждым реагентом;
Смешать отдельными чистыми стеклянными палочками каждую каплю
крови (эритроцитов) с соответствующим реагентом;
Покачивать пластинку, результат реакции учитывать через 3 мин после
окончания смешивания.
Результат трактуется как положительный при
наличии агглютинации, как отрицательный при
отсутствии агглютинации.

37.

Положительный результат (+) выражается в агглютинации эритроцитов,
агглютинаты видны невооруженным глазом в виде крупных агрегатов. Кровь
относится к Rh0(D)+(полож.)
При отрицательном результате (-) капля остаётся равномерно окрашенной в
красный цвет, агглютинации в ней не обнаруживается. Кровь Rh0(D)-(отр.)

38. Нормативная документация:

"Требования к проведению
иммуногематологических исследований
эритроцитов доноров и реципиентов на СПК и в
ЛПУ. Методические указания N 2001/109"
(утв. Минздравом РФ 11.04.2002)
2. Приказ Министерства Здравоохранения РФ
от 9 января 1998 года № 2 «Об утверждении
инструкций по иммуносерологии»
3. Приказ Министерства Здравоохранения РФ
от 02 апреля 2013 года № 183н «Об утверждении
правил клинического исследования доноров крови
и (или) ее компонентов»
1.

39. СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ!