Цитология в дерматологии

1. Цитология в дерматологии: применение на практике.

ЦИТОЛОГИЯ В ДЕРМАТОЛОГИИ:
ПРИМЕНЕНИЕ НА ПРАКТИКЕ.
Г. Абакан 12.11.2015
Кобякова Галина.

2. Цитология кожи.

ЦИТОЛОГИЯ КОЖИ.
Это быстрый и информативный способ
получить информацию.
Прост в исполнении
Незаменим для диагностики (высокая
значимость при наличии знаний)
Уши, пустулы, себорейные, экссудативные
поражения.

3. Получение образца

ПОЛУЧЕНИЕ ОБРАЗЦА

4. Материал для исследования

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
Мазки отпечатки / скотч-тест
Аспирационная цитобиопсия
Соскоб (глубокий и поверхностный)
Мазки отделяемого из ушей, глубоких кожных
складок

5. Отпечаток на стекле / скотч тест

ОТПЕЧАТОК НА СТЕКЛЕ / СКОТЧ ТЕСТ
Для влажных, жирных, шелушащихся
поражений.
С изъязвленной или эрозивной кожи.
Предметным стеклом или скотч лентой.
Идентификация:
Malassezia sp.
Бактерии
Клещи
Блохи
Можно исследовать после окрашивания
(объектив*100)

6. Поверхностный соскоб

ПОВЕРХНОСТНЫЙ СОСКОБ
С влажных и жирных поражений
Межпальцевая область

7. Кожные соскобы

КОЖНЫЕ СОСКОБЫ
Поверхностный:
Чесоточные клещи
Demodex gatoi
Cheylitiella
Совет: используйте каплю
вазелинового масла.
Глубокий соскоб
• Чесоточные клещи
• Demodex catis
• Оценка клеточных реакций
• Микроорганизмы
• Опухолевые клетки

8. Глубокий соскоб скальпелем

ГЛУБОКИЙ СОСКОБ СКАЛЬПЕЛЕМ

9. Глубокие соскобы

ГЛУБОКИЕ СОСКОБЫ
Все пациенты с алопецией
Пациенты с папулами, пустулами,
межпальцевыми поражениями, корками.

10. При правильном взятии глубокого соскоба в образце должны присутствовать форменные элементы крови

ПРИ ПРАВИЛЬНОМ ВЗЯТИИ ГЛУБОКОГО
СОСКОБА В ОБРАЗЦЕ ДОЛЖНЫ
ПРИСУТСТВОВАТЬ ФОРМЕННЫЕ ЭЛЕМЕНТЫ
КРОВИ

11. Мазки ватной палочкой

МАЗКИ ВАТНОЙ ПАЛОЧКОЙ
Цитология из ушей
Экссудативные поражения
Интертриго комплекс
Идентификация:
При окраске (об.*100): дрожжи, бактерии,
воспалительные клетки.
Нативный мазок (об. *4, *10): клещи.

12. Аспирационная цитобиопсия (АПТИ)

АСПИРАЦИОННАЯ ЦИТОБИОПСИЯ
(АПТИ)
Пустулы, везикулы, внутрикожные и
подкожные образования.

13. Получение цитобиоптата

ПОЛУЧЕНИЕ ЦИТОБИОПТАТА
Аспирация проводится шприцом объемом 5 мл
иглой 20-25G.
Перед извлечением иглы аспирацию
прекращают.
Для удаления биоптата из иглы необходимо:
отсоединить иглу от шприца, набрать в шприц
2-3 мл воздуха, присоединить иглу, аккуратно
выдавить содержимое на обезжиренное
предметное стекло.
Распределить полученный биоптат по стеклу
иглой либо другим стеклом.

14. Получение цитобиоптата

ПОЛУЧЕНИЕ ЦИТОБИОПТАТА

15. Подготовка проб

ПОДГОТОВКА ПРОБ
Гнойный или геморрагический экссудат –
высушить на воздухе/фен.
Жирный материал (ушная сера и т.п.) –
фиксация над пламенем спиртовки.

16.

17. Микроскоп. Общий вид.

МИКРОСКОП. ОБЩИЙ ВИД.

18. Микроскопия

МИКРОСКОПИЯ
Сначала под малым увеличением, что бы
выбрать участок для подробного изучения
Затем иммерсия (увеличение 100 крат) – для
выявления микроорганизмов и изучения
клеточного состава.

19.

20. Кератиноциты

КЕРАТИНОЦИТЫ

21. Основные объекты исследований

ОСНОВНЫЕ ОБЪЕКТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Микроорганизмы
Грибы (например
Malassezia)
Кокки
Палочки
Клетки участвующие в
воспалении
Нейтрофил
Макрофаг
Эозинофил
Лимфоцит
Плазматическая
клетка

22. Нейтрофилы

НЕЙТРОФИЛЫ

23. Эозинофилы

ЭОЗИНОФИЛЫ

24. Эозинофилы и нейтрофилы

ЭОЗИНОФИЛЫ И НЕЙТРОФИЛЫ

25. Тучные клетки

ТУЧНЫЕ КЛЕТКИ

26. Тучные клетки, эозинофилы

ТУЧНЫЕ КЛЕТКИ, ЭОЗИНОФИЛЫ

27. Лимфоциты, моноциты

ЛИМФОЦИТЫ, МОНОЦИТЫ

28. Макрофаги

МАКРОФАГИ

29. Плазматическая клетка

ПЛАЗМАТИЧЕСКАЯ КЛЕТКА

30. Макрофаги и нейтрофилы

МАКРОФАГИ И НЕЙТРОФИЛЫ

31.

32. Микрофлора кожи

МИКРОФЛОРА КОЖИ

33. Бактерии – кокки

БАКТЕРИИ – КОККИ

34. Бактерии палочки.

БАКТЕРИИ ПАЛОЧКИ.

35. Бактериальные инфекции кожи кошек

БАКТЕРИАЛЬНЫЕ ИНФЕКЦИИ КОЖИ
КОШЕК

36. Прочие бактерии

ПРОЧИЕ БАКТЕРИИ

37. Actinomyces, Nocardia, Fosobacteriu spp.

ACTINOMYCES, NOCARDIA, FOSOBACTERIU
SPP.

38. Грибы.

ГРИБЫ.

39. Malassezia spp.

MALASSEZIA SPP.

40. Дерматофитозы

ДЕРМАТОФИТОЗЫ

41.

42.

43.

44. Прочие микозы

ПРОЧИЕ МИКОЗЫ

45. Криптококк

КРИПТОКОКК

46. Приблизительный размер объектов при цитологии

ПРИБЛИЗИТЕЛЬНЫЙ РАЗМЕР ОБЪЕКТОВ
ПРИ ЦИТОЛОГИИ

47. Паразиты.

ПАРАЗИТЫ.

48. Демодекоз

ДЕМОДЕКОЗ

49. Хелетиелла

ХЕЛЕТИЕЛЛА

50. Нотоэдроз

НОТОЭДРОЗ

51. Уши.

УШИ.

52. Микроскопия ушной серы или экссудата

МИКРОСКОПИЯ УШНОЙ СЕРЫ ИЛИ
ЭКССУДАТА
Малое увеличение (объектив 10 крат) – общее
количество клеток, с маслом – клещи.
Иммерсия (большое увеличение 100 крат) –
лейкоциты, эритроциты, клетки эпителия,
неоплазия (опухолевые, атипичные клетки),
бактерии, дрожжи.

53. Отодекоз

ОТОДЕКОЗ

54. Нормальная сера

НОРМАЛЬНАЯ СЕРА
Секрет апокриновый (церуминозных) и
сальных желез.
Содержит липиды, плохо прокрашивается
Содержит слущенные кератиноциты.
Содержит резидентные микроорганизмы
(Staphylococcus spp., Streptococcus spp., крайне
редко палочки).

55.

56. Полуколичественная оценка.

ПОЛУКОЛИЧЕСТВЕННАЯ ОЦЕНКА.
Среднее количество микроорганизмов в поле
зрения (иммерсия) микроскопа.
Позволяет оценить динамику.

57. Бактериальный/ дрожжевой перерост

БАКТЕРИАЛЬНЫЙ/ ДРОЖЖЕВОЙ
ПЕРЕРОСТ
Обнаружение в среднем 3-5 коков или
Malassezia в поле зрения, увеличение 100 крат
Пограничное состояние между нормой и
инфекцией.
Связанно с повышением влажности в слуховом
проходе, аллергической реакцией, попаданием
воды в ухо и т.п.
Морфологические изменения слухового канала
=> плохая вентиляция => нарушение
эпителиальной миграции.
При своевременном устранении причин,
ситуация обратима.

58.

59. Бактерии

БАКТЕРИИ

60. Церуминозный отит: причины

ЦЕРУМИНОЗНЫЙ ОТИТ: ПРИЧИНЫ
Повышение секреции серных и сальных желез +
эпидермальная гиперплазия в следствии
воспаления, новообразования, кисты в слуховом
канале = скопление серы + размножаются
бактерии и дрожжи = воспаление
Первичные нарушения процессов кератинизации у
собак некоторых пород (шар-пей, бассет-хаунд,
ирландский сеттер, немецкая овчарка,
американский коккер спаниель и пр.)
Полный цикл эпителия 8 дней вместо 22
Скопление церумина в слуховом канале
Развитие церуминозного отита
Вторичные нарушения кератинизации (гипотиреоз,
недостаток витамина А, цинка и жирных кислот)

61. Церуминозный отит.

ЦЕРУМИНОЗНЫЙ ОТИТ.
Кератиноциты в большом количестве и не
окрашенные сальные массы.
Единичные микроорганизмы

62. Гнойный отит. Цитология.

ГНОЙНЫЙ ОТИТ. ЦИТОЛОГИЯ.
Дебрис
Разрушенные лейкоциты
Фагоцитированные бактерии (кокки и/или
палочки)

63. Бактерии - палочки

БАКТЕРИИ - ПАЛОЧКИ

64. Бактерии - кокки

БАКТЕРИИ - КОККИ

65. Бактериальный отит

БАКТЕРИАЛЬНЫЙ ОТИТ

66.

67. Соскобы с кожи.

СОСКОБЫ С КОЖИ.
Диагностические критерии

68. Малацезия + кератиноциты = малассезиозный перерост

МАЛАЦЕЗИЯ + КЕРАТИНОЦИТЫ =
МАЛАССЕЗИОЗНЫЙ ПЕРЕРОСТ

69. Бактерии + кератиноциты = бактериальный перерост

БАКТЕРИИ + КЕРАТИНОЦИТЫ =
БАКТЕРИАЛЬНЫЙ ПЕРЕРОСТ

70. Нейтрофилы.

НЕЙТРОФИЛЫ.
Инфекции бактериальные
Иммуноопосредованные реакции
Травма
Микозы
Неопластические процессы (вторичное
воспаление)

71. Преобладание нейтрофилов указывает на воспаление

ПРЕОБЛАДАНИЕ НЕЙТРОФИЛОВ
УКАЗЫВАЕТ НА ВОСПАЛЕНИЕ

72. Нейтрофилы дегенеративные и не дегенеративные = воспаление

НЕЙТРОФИЛЫ ДЕГЕНЕРАТИВНЫЕ И НЕ
ДЕГЕНЕРАТИВНЫЕ = ВОСПАЛЕНИЕ

73. Дегенеративные нейтрофилы + бактерии = пиодермия

ДЕГЕНЕРАТИВНЫЕ НЕЙТРОФИЛЫ +
БАКТЕРИИ = ПИОДЕРМИЯ

74. Фагоцитоз

ФАГОЦИТОЗ

75. Макрофаги

МАКРОФАГИ

76.

77. Эозинофилы практически в каждом поле зрения

ЭОЗИНОФИЛЫ ПРАКТИЧЕСКИ В КАЖДОМ
ПОЛЕ ЗРЕНИЯ
Атопия, БАД
Комплекс
эозинофильной
гранулемы (кошки)
Эозинофильный
фурункулез
Паразитарные
узелки
Некоторые опухоли
+ атипичные
клетки

78.

79.

80. Тучные клетки

ТУЧНЫЕ КЛЕТКИ
БАД (+ эозинофилы)
Укусы насекомых (+эозинофилы)
Мастоциомы

81.

82. Мастоцитома

МАСТОЦИТОМА

83.

84. Акантолитические клетки + недегенеративные нейтрофилы в большом количестве = аутоиммунный дерматит (листовидная пузырчатка и

АКАНТОЛИТИЧЕСКИЕ
+ НЕДЕГЕНЕРАТИВНЫЕ
НЕЙТРОФИЛЫ В БОЛЬШОМ КОЛИЧЕСТВЕ = АУТОИММУННЫЙ
ДЕРМАТИТ (ЛИСТОВИДНАЯ ПУЗЫРЧАТКА И Т.П.)
КЛЕТКИ

85. Нодулярные поражения

НОДУЛЯРНЫЕ ПОРАЖЕНИЯ

86. Дифференциальные диагнозы

ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНЫЕ ДИАГНОЗЫ
Воспаление или опухоль
Доброкачественная или злокачественная
Мезенхимальная/ эпителиальная/
круглоклеточные (гемопоэтические)

87. Очаговый кальциноз кожи

ОЧАГОВЫЙ КАЛЬЦИНОЗ КОЖИ

88. Воспалительные нодулярные поражения – гранулемы.

ВОСПАЛИТЕЛЬНЫЕ НОДУЛЯРНЫЕ
ПОРАЖЕНИЯ – ГРАНУЛЕМЫ.
Бактериальные
Грибковые
Паразитарные
Стерильные гранулемы
Пиогранулемы

89. Лимфоциты плазматические клетки + макрофаги = хроническая пиодермия, микозы, демодекоз, плазмоцитарный пододерматит.

ЛИМФОЦИТЫ ПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ КЛЕТКИ +
МАКРОФАГИ = ХРОНИЧЕСКАЯ ПИОДЕРМИЯ,
МИКОЗЫ, ДЕМОДЕКОЗ, ПЛАЗМОЦИТАРНЫЙ
ПОДОДЕРМАТИТ.

90.

91. Эозинофильная гранулема

ЭОЗИНОФИЛЬНАЯ ГРАНУЛЕМА

92. Дифференциальная диагностика.

ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА.
Индолентная язва:
Плоскоклеточная карцинома
• Герпесвирусная или кальцивирусная инфекция
• Мастоцитома
• Криптококкоз
Эозинофильная бляшка
Мастоцитома
Плоскоклеточная карцинома
Демодекоз
Подкожный микоз
Эпителиальная лимфома

93. Прочие не опухолевые образовагия кожи

ПРОЧИЕ НЕ ОПУХОЛЕВЫЕ ОБРАЗОВАГИЯ
КОЖИ
Киста
Гранулема
Серома
Прочее…

94.

95. Кисты кожи.

КИСТЫ КОЖИ.
Эпидермальные – обилие безядерных
плоскоэпителиальных клеток, чешуйки
плоского эпителия, бесструктурные массы
Эпидермоидные кисты – чешуйки плоского
эпителия, жир, кристаллы жирных кислот,
роговые массы, мелкие мономорфные клетки
железистого эпителия.
Атеромы – кристаллы холестерина

96.

97. Кальциноз кожи

КАЛЬЦИНОЗ КОЖИ

98. Неоплазия

НЕОПЛАЗИЯ

99. Круглоклеточные опухоли

КРУГЛОКЛЕТОЧНЫЕ ОПУХОЛИ
Мастоцитома
Гистиоцитома
Венерическая саркома
Плазмоцитома
Лимфома

100. Мастоцитома

МАСТОЦИТОМА
Много клеток
Диаметр 1035мкм
Ядро от круглого
до овального
Агрегаты
хроматина
Цитоплазматичес
кие гранулы –
круглые,
овальные, хорошо
окрашенные,
разных размеров

101. Мастоцитома кошки

МАСТОЦИТОМА КОШКИ

102.

103. Гистиоцитома

ГИСТИОЦИТОМА
Часто собаки до 2х
лет, возвышающееся
образование без
шерсти
Округлы, овальные
клетки
Ядра большие светло
окрашенные
Ядрышко не видно
Хроматин кружевной
Цитоплазма бледно
голубая, возможны
вакуоли
Часто плазматические
клетки, ли мфоцитыособенно при
воспалении.

104. Плазмацитома

ПЛАЗМАЦИТОМА
Чаще собаки
Кожа пальцев,
губы, морда, уши
Возможно ротовая
полость, жкт.
Плазматические
клетки (округлоовальные 12-30
мкм)
Хроматин мелко
конденсированный
возможны
ядрышки.

105. Лимфома

ЛИМФОМА
Крайне редко
Однородная
популяция
низкодифференциро
ванных лимфоидных
клеток
Клетки больше
нейтрофила, с
разным количеством
голубой цитоплазмы.
Ядра круглые,
хромотиом, могут
содержать несколько
ядрышек.
Дифф. Диагноз
гиперплазия
лимфоидной ткани.

106. Эпителиальные опухоли

ЭПИТЕЛИАЛЬНЫЕ ОПУХОЛИ
Кератоакантома
Плоскоклеточный рак.
Эпителиальные клетки обычно имеют
форму от овальной до полигональной
и склонны к образованию слоев или
конгломератов по средствам
мембранных структур.

107. Аденома сальных желез

АДЕНОМА САЛЬНЫХ ЖЕЛЕЗ
Доброкачественная
эпителиальная
опухоль
Мелкие ядра с
конденсированным
хроматином
Цитоплазма
обильная,
вакуолизированная
Пластами и
группами
Нет цитологических
критериев
дифференцировки
аденомы от
гиперплазии.

108. Морфология клеток признаки злокачественности

МОРФОЛОГИЯ КЛЕТОК ПРИЗНАКИ
ЗЛОКАЧЕСТВЕННОСТИ
Цитоплазматические критерии Ядерные клетки
Макроцитоз
Неоднородное восприятие
красителя (изменение
степени базофилии)
Анизоцитоз клеток
Атипичные включения
Макрокариоз
Анизокариоз
Изменение формы ядра
Патологические
вакуолизация
Изменения специфических
гранул
Изменение ядерноцитоплазматического
индекса.
Разрежение или
гиперхромазия хроматина
Анизохромазия
Высокий митотический
индекс
Множественные или
патологические ядрышки.

109. Плоскоклеточный рак

ПЛОСКОКЛЕТОЧНЫЙ РАК

110. Мезенхимальные опухоли

МЕЗЕНХИМАЛЬНЫЕ ОПУХОЛИ
Липома
Фиброма
Саркомы
Маланома/меланоцитома

111. Липома

ЛИПОМА

112. Меланома и меланоцитома

МЕЛАНОМА И МЕЛАНОЦИТОМА
Маланома содержит в
цитоплазме гранулы
пигмента меланина
Ядра полиморфные,
грубоглыбчатые, часто
с увеличенными
ядрышкамию
Существуют
безпигментные
меланомы – пигмент
выявляется лишь в
некоторых клетках в
виде аспидно-серого
облачка в цитоплазме.

113.

Цитология важный и не заменимый
инструмент врача дерматолога, но
ее результаты следует
интерпретировать в соответствии
соответствии с общей клинической
картиной!

114. Ваши вопросы?

ВАШИ ВОПРОСЫ?