Дифтерия, коклюш, гемофильная инфекция

1.

Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии
Занятие 1
ВОЗБУДИТЕЛИ ДИФТЕРИИ,
КОКЛЮША,
ПАРАКОКЛЮША

2.

ВОПРОСЫ ДЛЯ ОБСУЖДЕНИЯ
1. Характеристика возбудителя дифтерии.
2.Источник инфекции, пути передачи при дифтерии,
патогенез.
3.Основные клинические формы дифтерии.
4.Микробиологическая диагностика дифтерии.
5.Специфическая профилактика и серотерапия
дифтерии.
6.Характеристика возбудителей коклюша.
7.Источник инфекции, пути передачи коклюша,
патогенез.
8.Клинические проявления коклюша.
9. Специфическая профилактика коклюша.
10.Характеристика возбудителя гемофильной
инфекции.

3. ВОЗБУДИТЕЛЬ ДИФТЕРИИ

4.

5. Общая классификация коринебактерий

• Семейство Corynebacteriaceae
• Род: Corynebacterium
– C. diphtheriae – возбудитель дифтерии
• var. gravis
• var. mitis
• var. intermedius
– Дифтероиды («коринеформные бактерии»)
– C.

6. Леффлер Нейссер

7. Морфологические свойства

Грамположительные тонкие палочки средних
размеров, не образующие макрокапсул и спор и
располагающиеся в мазке попарно, под углом
друг к другу в виде римских цифр V и X.
Характерны включения зёрен волютина (БабешаЭрнста), для выявления которых используют
окраску по Лёффлеру (явление метахромазии)
или по Нейссеру (тёмные зёрна на фоне жёлтой
цитоплазмы).

8.

9.

10. Дифтероиды: отличия от дифтерийной палочки

морфологические – имеют не два зерна
волютина, расположенные по полюсам, а:
–
–
–
несколько по всему протяжению бактериальной
клетки,
одно
или вовсе лишены зерен волютина,
в мазке располагаются не по двое, а
«частоколом»
биохимические – отрицательная проба
Пизу и положительная проба Закса

11. Классификация и роль в патологии человека

Сапрофиты
• C. pseudodiphtheriticum (C. hofmannii)
–нормальный обитатель носоглотки,
у детей – влагалища, может
присутствовать на раневой
поверхности
• C. xerosis – колонизирует
конъюнктиву, раньше считалась
возбудителем конъюнктивита

12. Условно-патогенные

• C. ulcerans – вызывает дифтериеподобные
поражения зева и поражения кожи
• C. jeikeium – вызывает госпитальные
инфекции с развитием бактериемии, чаще
встречается у мужчин
• C. cistitidis – вызывает урологическую
патологию, чаще втречается у женщин
• C. minutissimum – возбудитель эритразмы
(проявляется в виде красновато-коричневой
сыпи, преимущественно в подмышечной и
паховой областях)

13. Эритразма

14. Культуральные свойства

Растут на сложных питательных средах при
37ОС (на среде Ру – 10-12 ч, на др. средах –
сутки).
– жидкие среды: пленка + осадок (var. gravis) или
муть + осадок (var. mitis)
– среда Ру (свернутая лошадиная сыворотка):
колонии не сливаются (рост в виде «шагреневой
кожи»)
– теллуритовые среды (например, среда Клауберга
– кровяно-теллуритовый агар): серовато-черные
колонии R (похожие на цветок маргаритки из-за
неровного края и радиальной исчерченности – var.
gravis) или S (мелкие – var. mitis)

15.

16.

17. Биохимические свойства

Для идентификации
вида C. diphtheriae:
• цистиназная
активность(проба
Пизу) –
положительная
• уреазная
активность (проба
Закса) –
отрицательная
Для идентификации
биовара gravis:
• ферментация
крахмала
• ферментация
гликогена
+

18.

19.

20. Серологические свойства

• О-антиген (общий с микобактериями и
нокардиями)
• К-антиген (в РА – около 10 сероваров)
Однако, антигенный состав дифтерийной
палочки неоднороден и её
серологическая классификация не
общепринята

21. Факторы патогенности

• токсин
• ферменты вирулентности

22. Дифтерийный токсин

Основной фактор патогенности
дифтерийной палочки (так как
дифтерия вызывается именно
токсином, то её можно считать
токсикоинфекцией)

23. Дифтерийный токсин блокирует синтез белка на стадии элонгации и в результате токсинемии поражает клетки миокарда,

надпочечников, почек и
ганглиев периферической нервной системы

24.

25.

26. В нервной ткани этот токсин вызывает демиелинизацию нервных волокон и, как результат – развитие парезов и параличей

Местно
дифтерийный
токсин вызывает
некроз и отек
тканей

27. Ген, детерминирующий синтез дифтерийного токсина, принадлежит умеренному фагу

Следовательно,
токсигенностью
обладает лишь
лизогенная культура
(типичный пример
фаговой конверсии)

28. Ферменты вирулентности

• гиалуронидаза
• нейраминидаза

29. Резистентность во внешней среде

Достаточно высока, что позволяет
дифтерийной палочке сохраняться
• несколько дней на предметах (на
игрушках – до 15 дней) и в воде
• но она чувствительна к дезинфектантам
(5% раствор карболовой кислоты
убивает её в течение 1 минуты)

30. ДИФТЕРИЯ

31. Эпидемиология

Человек (больной
или носитель
Источник инфекции
токсигенного
штамма)
Аэрогенный
Основной механизм
(воздушно(путь) передачи
капельный)
Дополнительный
Контактный (в том
механизм (путь)
числе и непрямой)
передачи

32. Клинические проявления

• интоксикация
• фибринозное воспаление в месте
проникновения возбудителя

33. Патогенез

В месте проникновения возбудителя (в
настоящее время чаще встречается
дифтерия зева) в результате действия
токсина образовывается фибринозная
пленка, которая
• или тесно спаяна с подлежащей тканью (в
месте многослойного плоского эпителия)
• или (в месте однослойного цилиндрического
эпителия – в нижних отделах дыхательных
путей) легко отслаивается от подлежащих
тканей – «дифтерийный круп».

34. При дифтерийном крупе:

отслоившиеся фибриновые пленки
могут быть причиной асфиксии, тем
более, что токсин вызывает еще и
местный отек

35. В результате токсинемии поражаются другие органы (чаще всего – миокард), что обуславливает осложнения заболевания

36.

37.

38.

39.

40. Иммунитет

Постинфекционный иммунитет не
стойкий (хотя в ряде случаев
регистрируются повторные
заболевания). Ведущую роль играет
антитоксический иммунитет (его
напряженность выявляется с помощью
РНГА, положительная реакция в титре
1:20 и выше говорит о выраженном
иммунитете).

41. Микробиологическая диагностика

Плёнки, слизь из зева
мазок
(ориентировочный)
питательные среды
Ру
Клауберга
идентификация рода
• зёрна волютина
• культуральные св-ва
идентификация вида
• биохимические св-ва
определение токсигенности

42. Патологический материал (пленки, слизь из зева) должен быть доставлен в лабораторию не позднее, чем через 3 часа

43. Микроскопический метод

Имеет ориентировочное значение, так как
не позволяет определить токсигенность
штамма.

44. Культуральный метод

Основной.
• Посев производят на среды Ру, Клауберга;
• идентификацию до рода проводят по
– морфологическим (наличие зерен волютина) и
– культуральным (характер и скорость роста на
среде Ру, характер роста на среде Клауберга)
признакам;
• идентификацию вида проводят
– по биохимическим (пробы Пизу и Закса)
признакам;
• биовар gravis идентифицируют по
– культуральным (колонии в виде цветком
маргаритки) и
– биохимическим (ферментация крахмала и
гликогена) признакам.

45. Определением токсигенности

• in vivo: заражают морскую свинку
(подкожно или внутрибрюшинно), при
вскрытии павшего животного обращают
внимание на увеличенные и
гиперемированные надпочечники,
• in vitro: ставят реакцию преципитации
по Оухтерлони.

46.

47.

48.

49.

50. Профилактика

Неспецифическая
• выявление и изоляция для
лечения больных
• санация бактерионосителей
• дезинфекция игрушек,
которыми пользовались
больные дети
Специфическая
• Введение анатоксина
(АКДС, АДС, АДС-М,
АаКДС)
• при необходимости
сохранения
антитоксического
иммунитета у взрослых
необходима
ревакцинация
анатоксином каждые 10
лет

51. Этиотропная терапия

антитоксическая сыворотка (её введение
необходимо начинать как можно раньше,
пока токсин не связался с тканью миокарда
и нервной системы),
• антибиотики ( -лактамные, тетрациклины,
хинолоны; носителей санируют
эритромицином).
Выписка из стационара возможна после
двукратного отрицательного
бактериологического исследования.

52. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА БОРДЕТЕЛЛ

53. Отдел: Gracilicutes Род: Bordetella Патогенные виды: В. pertussis – вызывает коклюш B. parapertussis – вызывает паракоклюш;

сходен с
коклюшем, но протекает легче; паракоклюш
составляет 15% от числа заболеваний с диагнозом
коклюш; перекрестный иммунитет при этих
болезнях не возникает.
B. bronchiseptica –вызывает бронхисептикоз, у
человека встречается редко, в основном у
работников собачьих питомников и кролиководов
(этот микроорганизм вызывает респираторные
заболевания у собак, кошек и кроликов); у человека
клинически протекает как острая респираторная
вирусная инфекция, под этим диагнозом, как
правило, и регистрируется.

54. Дифференциация патогенных видов бордетелл

• подвижность (B. bronchiseptica)
• уреазная активность (B. bronchiseptica и
B. parapertussis)
• РА с видоспецифическими сыворотками

55.

56. ВОЗБУДИТЕЛЬ КОКЛЮША

57. Морфологические свойства

Окраска по Граму
Форма
Размер
грамотрицательные
коккобактерии
Эндоспора
отсутствует
Макрокапсула
Жгутики
образуется, но трудно
выявляется
атрихи
Расположение в мазке
беспорядочно

58.

59.

60. Культуральные свойства

Питательные потребности
Сложные (среды с кровью или
древесным углем, а также
аминокислотами)
Оптимальная toC
37оС
Условия аэрации
Аэробные
Скорость роста
3 – 5 дней
Характер роста
На среде Борде-Жангу
(картофельно-глицериновый
агар с добавлением крови) –
мелкие колонии, похожие на
капельки ртути,
На среде КУА (казеиновоугольный агар) – мелкие
сметанообразные колонии
Селективная питательная среда
Отсутствует

61. Биохимические свойства

Возбудитель коклюша биохимически
инертен

62. Серологические свойства

О-антиген – по нему дифференцируют
патогенные бордетеллы, а также
различают серовары
гемагглютинин
токсин
протективный антиген пилей

63.

64.

65.

66.

67.

68. Токсин (основной фактор патогенности)

Является сложным многокомпонентным
веществом, включающим:
• эндотоксин,
• белковый несекретируемый токсин,
• небелковый цитотоксин – производное
пептидогликана клеточной стенки.

69.

70. Действие токсина:

• оказывает местное действие,
приводящее в результате раздражения
нервных рецепторов слизистой
оболочки дыхательных путей к
спастическому кашлю
• в результате токсинемии, вызывает:
– возбуждение дыхательного центра
– спазм мелких бронхов

71. Резистентность во внешней среде

Микроорганизм крайне неустойчив во
внешней среде, поэтому дезинфекция
против коклюша не проводится

72. КОКЛЮШ

73. Эпидемиология коклюша

• Источник инфекции – больной человек
(заразен в течение 1 – 1,5 месяцев
болезни)
• Единственный механизм (путь)
передачи – аэрозольный (воздушнокапельный)

74.

75. Клинические проявления коклюша

Катаральная стадия (1 – 2 недели):
–
–
Пароксизмальная стадия (2 – 4 недели):
–
–
–
гриппоподобное состояние
слабый, но упорный кашель
спастический кашель
частая рвота
угнетение сознания
Стадия выздоровления (4 – 6 недель):
–
постепенное исчезновение симптомов коклюша
В настоящее время преобладают (95%)
умеренно выраженные и стертые формы
заболевания

76. Патогенез коклюша

Обусловлен:
• воспалительным ответом на
размножение возбудителя (слизистая
оболочка готани, бронхов, бронхеол и
альвеол)
• действием факторов вирулентности
B. pertussis

77.

78. Постинфекционный иммунитет при коклюше

После перенесенного заболевания
формируется пожизненный иммунитет
• гуморальный
• клеточный
• развивается ГЗТ

79.

80. Микробиологическая диагностика коклюша

слизь из в/д путей
РИФ
питательные
среды
чистая
культура
serum
нарастание
титра Ig
(«парные
сыворотки»)
• РСК
• РНГА
• РА

81. Культуральный метод диагностики

Основной: слизь из верхних дыхательных
путей, которую берут с помощью метода
«кашлевых пластинок» (во время приступа
кашлю ко рту ребенка подставляют чашку
Петри с питательной средой) или
носоглоточным тампоном, засевают на
питательные среды, идентифицируя
выделенную культуру по морфологическим,
культуральным, биохимическим и
серологическим свойствам.

82.

83. Профилактика коклюша

Неспецифическая
• Выявление и изоляция
больных для лечения
Специфическая
• убитая коклюшная
вакцина в составе
АКДС, АаКДС
• нормальный
человеческий
иммуноглобулин (при
контакте с больным
детям до года и
неиммунизированным)

84. Этиотропная терапия

• легкие формы – пребывание на свежем
воздухе
• тяжелые формы – антибиотики,
нормальный человеческий
иммуноглобулин, антигистаминные
препараты, холодный свежий воздух

85. ГЕМОФИЛЬНЫЕ БАКТЕРИИ

86.

87. Классификация гемофильных бактерий

Отдел: Gracilicutes
Семейство: Pasteurellaceae
Род: Haemophilus
Патогенные для человека виды:
– H. influenzae – возбудитель воспалительных
процессов, чаще всего дыхательных путей
– H. ducreyi – возбудитель мягкого шанкра
Остальные гемофилы (всего род включает 16
видов) – сапрофитические обитатели полости
рта и носоглотки

88. Общая характеристика гемофильной палочки

Коккобактерия
может образовывать капсулу,
спор и жгутиков не образует;
растет на средах со свежей кровью (МПА с
добавлением лизированных эритроцитов);
• по биохимическим свойствам выделяют 6
биоваров (I – VI),
• а по капсульным антигенам – 6 сероваов (a –
f), главный патоген для человека – серовар b.

89.

90.

91.

92.

93.

94. Общая характеристика эпидемиологии

Антропоноз, передающийся аэрогенным
путем; широко распространено
носительство: 90% взрослых, у детей –
от 3-5% (капсульных штаммов) до 3050% (бескапсульных штаммов).

95. Клинические проявления

Гемофильная палочка вызывает две группы
заболеваний:
• острые гнойно-воспалительные процессы – у
детей эпиглотит (поражается надгортанник) и
менингит (сопровождающийся стойкими
неврологическими нарушениями); у взрослых
пневмонии
• хронические, при которых H.influenzae выступает
как этиологический фактор вторичной или один из
сочленов смешанной (в ассоциации с
пневмококками, стафилококками и аденовирусами)
инфекции.
Острые инфекции чаще вызываются капсульными
штаммами I биовара, а хронические –
бескапсульными штаммами II и III биоваров.

96.

97. Микробиологическая диагностика

Основана на выделении чистой культуры,
но идентифицировать её очень сложно

98.

99. Вакцина

Применяется химическая
полисахаридная вакцина на основе
капсульного антигена серовара b,
входит в число обязательных прививок
для детей из групп риска
3-4,5-6; 18 мес
ХИБ
ХИБерикс
Пентаксим (АаКДС+ИПВ+ХИБ)

100. Благодарю за внимание