Генетический полиморфизм цитокинов у доношенных новорожденных детей с гипоксическими событиями

1.

Генетический полиморфизм
цитокинов у доношенных
новорожденных детей с
гипоксическими событиями
М.С. Панова, ассистент кафедры пропедевтики детских болезней
ФГБОУ ВО ЧГМА
Научный руководитель: д.м.н., доцент А.С. Панченко

2.

АКТУАЛЬНОСТЬ
В структуре причин перинатальной смертности 2-е место занимает
гипоксия плода
(Кузнецов П.А., Козлов П.В., 2017 г)
В проведении первичных реанимационных мероприятий в
родильном зале нуждается от 0,5% до 2% доношенных
новорожденных детей
По данным ВОЗ в 70-80% причинами нервно-психических
заболеваний у детей являются перинатальные поражения головного
мозга гипоксического генеза
(Шабалов Н.П., 2016 г)

3.

ЦЕРЕБРАЛЬНАЯ ИШЕМИЯ
Период новорожденности
жизни
I
Возбудимость ЦНС или
угнетение не более 5-7 суток
-Возбудимость/угнетение
II
III
ЦНС,
смена фаз церебральной активности
более 7 суток
-Судороги
-ВЧ гипертензия
-Вегето-висцеральные расстройства
-Угнетение ЦНС /кома
-Судороги, эпистатус
-Стволовая дисфункция
-Поза
декортикации
или
децеребрации
-ВЧ гипертензия
-Вегето-висцеральные расстройства
Первый год
-Доброкачественная внутричерепная
гипертензия
- Расстройство вегетативной автономной
нервной системы
-Гиперактивное
поведение,
гипервозбудимость
- Нарушение (задержка) моторного
развития
- Сочетанные формы задержки
Симптоматические
судороги
и
ситуационно
обусловленные
пароксизмальные
расстройства
-ДЦП
-Эпилепсия
-Гидроцефалия
- Органические формы
психического развития
нарушений

4.

ПАТОГЕНЕЗ ГИПОКСИЧЕСКОГО
ПОРАЖЕНИЯ ГОЛОВНОГО МОЗГА
(Терапевтическая гипотермия у новорожденных. Клинические рекомендации, 2019)

5.

ЦИТОКИНЫ
(Utpal S. Bhalala et al, 2015)

6.

ГЕНЕТИЧЕСКИЙ ПОЛИМОРФИЗМ
ЦИТОКИНОВ
Гены цитокинов
полиморфизма
обладают
чрезвычайно
высокой
степенью
(Пузырева Л.В. и др., 2016)
Тесная ассоциация полиморфизма генов с разнообразной патологией
ЦНС у новорожденных: церебральная ишемия, ПВЛ
Возможное участие цитокинов в потенцировании воспаления в
головном мозге, ведущее к повреждению нервной ткани и
предопределяя течение заболевания
(Gabriel ML et al, 2016; Merino ST et al, 2015; Князева А.С., 2015; Chae JW et al, 2016; Xia L et al, 2018; Hu W, 2017 )

7.

ГЕНЕТИЧЕСКИЙ ПОЛИМОРФИЗМ
ЦИТОКИНОВ
Полиморфизм генов цитокинов в группах доношенных
новорождённых, которые перенесли гипоксию (хроническую
внутриутробную/острую в родах) практически не изучен
В большинстве случаев генетическое исследование
проводилось у детей – имеющие неврологические диагнозы
(Gabriel ML et al, 2016; Merino ST et al, 2015; Пузырева Л.В. и др., 2016)
Важна
ранняя
лабораторная
предрасположенности к патологии ЦНС
диагностика

8.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ
Выявить частоту генетического полиморфизма
цитокинов Ил-1β(С-511Т), Ил-1β(С3953Т), Ил4(С589Т), Ил6(C174G), Ил-10(C819T), Ил10(G1082A) у новорождённых с гипоксическими
событиями и у детей, не испытывавших
гипоксию

9.

Материалы и методы
Группы пациентов
1 группа (n=48) –
дети, перенесшие
внутриутробную
гипоксию
2 группа (n=80) –
3 группа (n=52) –
дети, перенесшие
асфиксию
здоровые
доношенные дети

10.

Критерии включения
1-я группа:
2-я группа:
ХВГП, зафиксированная во время
беременности
оценка по шкале Апгар 7 баллов и
ниже на первой минуте жизни
< 8 баллов по данным
кардиотокографии (КТГ) (тахикардия
плода, наличие децелераций,
монотонный низковариабельный
ритм, единичные акцелерации или их
отсутствие)
наличие ацидоза и дефицита
оснований
данные биофизического профиля
плода (суммарная оценка < 8 баллов)
данные ультразвуковой
допплерографии (нарушение маточноплацентарного кровотока 1В 2 ст.)
отклонения в неврологическом
статусе
Критерии исключения
-недоношенность
-наличие генерализованных инфекций
-наличие хромосомных и генетических
заболеваний
-отказ родителей от участия в
исследовании

11.

Характеристика детей
Масса тела
Срок гестации
3401,4
3243,8
38,77
3135,3
1 группа
2 группа
3 группа
1 группа
Шкала Апгар
2 группа
3 группа
Длина тела
51,87
8,81
8,45
39,6
39,5
5,22
51,1
50,9
АПГАР 1 МИНУТА
1 группа
2 группа
3 группа
1 группа
2 группа
3 группа

12.

Степень тяжести ГИЭ определялась по модифицированной классификации H.
Sarnat и M. Sarnat (1976) в модификации
B. Stoll и R. Kliegman (2004)
0%
2
ГРУППА
22,50%
77,50%
25%
1
ГРУППА
2,08%
72,92%
0,00%
10,00%
20,00%
30,00%
40,00%
50,00%
НОРМ.НЕВРОЛОГИЧЕСКИЙ СТАТУС
60,00%
ГИЭ II
ГИЭ I
70,00%
80,00%
90,00%

13.

Неврологический статус группы контроля
ТРАНЗИТОРНЫЙ ХАРАКТЕР ОТКЛОНЕНИЯ
48%
НОРМ.НЕВРОЛОГИЧЕСКИЙ СТАТУС
46%
52%
47%
48%
49%
50%
51%
52%
53%

14.

Метод исследования
Полимеразная цепная реакция с детекцией в режиме
реального времени, а также с помощью электрофореза в
агарозном геле с последующей визуализацией результата
в ультрафиолетовом свете.
Использовались
комплекты
SNP-наборов,
соответствующих заявленному полиморфизму Ил-1β(С511Т), Ил-1β(С3953Т), Ил-4(С589Т), Ил-6(C174G), Ил10(C819T), Ил-10(G1082A) (НПФ «Литех», Москва)

15.

Статистическая обработка
Проводили при помощи пакетов программ Microsoft Excel
2010, Statistica 10.0 (StatSoft Inc., США)
Риск развития событий оценивали по отношению шансов
(odds ratio (OR)) с расчётом 95% доверительного
интервала (ДИ), также использовался критерий χ2
Статистически значимые различия рассматривались при
значении уровня p < 0,05

16.

Результаты исследования
Частота аллеля, генотипа ИЛ-1β(С-511Т) в группах исследования
1 группа
3 группа
2 группа
16%
12%
23%
34%
38%*
33%
С/С
С/С
С/С
С/T
С/T
С/T
T/T
Т/Т
Т/Т
44%
50%
50%
1 группа
2 группа
3 группа
41%
38%
55%
63%*
C
T
59%*
С
T
45%
С
T
* p<0,05, критерий χ2 , отношение шансов
У детей 1 группы преобладали генотип ТТ (p=0,04) и аллель T Ил-1β(С-511Т) (р = 0,01) по сравнении с группой контроля.
Относительная вероятность выявления аллеля Ил-1β-511Т и генотипа Ил1β-511ТТ у детей, перенёсших внутриутробную
гипоксию, в сравнении со здоровыми детьми, была выше в 2 раза
У детей 2 группы преобладал аллель T Ил-1β(С-511Т) по сравнению с контрольной группой (p = 0,03)

17.

Результаты исследования
Частота аллеля, генотипа ИЛ-1β(С3953Т) в группах исследования
15%
1 группа
2 группа
3 группа
9%
13%
56%
С/С
С/T
29%
С/С
26%
61%
T/T
С/T
С/С
31%
60%
Т/Т
1 группа
2 группа
70%
Т/Т
3 группа
26%
30%*
С/T
25%
C
C
C
T
T
T
74%
75%
* p<0,05, критерий χ2 , отношение шансов
В 1 группе исследуемых при изучении полиморфизма гена Ил-1β преобладал аллель T (р = 0,03) в точке С3953Т, в
отличие от группы контроля.
Относительная вероятность выявления аллеля Ил-1β-3953Т у
сравнении со здоровыми, была выше в 2,33 раза
детей, перенёсших внутриутробную гипоксию, в

18.

Результаты исследования
Полиморфные варианты генов Ил-4(С589Т),
Ил6(C174G),
Ил-10(C819T),
Ил-10(G1082A)
статистически значимо не различались

19.

ВЫВОДЫ
Выводы
Повышенные частоты носительства генотипов Ил-1β-511ТT и Ил-1β-3953ТT,
аллелей Ил-1β511Т и Ил-1β-3953Т, обнаруженные у новорождённых
перенёсших асфиксию и хроническую внутриутробную гипоксию, указывают
на возможное их участие в активировании воспаления в головном мозге,
ведущее к нейроповреждению
Формирование исходов поражения головного мозга и его прогрессирование
зависит не только от выраженности нарушения мозгового кровотока,
процессов анаэробного гликолиза и гемостатических изменений, но и от
усиленной выработки провоспалительных интерлейкинов, в том числе и
генетически обусловленной
Исследование частоты аллелей и генотипов генетического полиморфизма
цитокинов у детей с гипоксическими событиями позволит выявлять
вероятную предрасположенность к развитию патологии со стороны нервной
системы

20.

СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ!