Возбудитель туберкулёза и дифтерии

1.

Возбудитель туберкулёза и
дифтерии

2.

Туберкулез – первично-хроническое заболевание человека и животных,
сопровождающееся поражением различных органов человека и систем.
Основу патологического процесса составляет образование специфических
гранулем, представляющих собой воспалительную реакцию тканей, имеющих
вид узелка, бугорка.
Вызывают туберкулез микобактерии объединенные в комплекс Mycobacterium
tuberculosis, включающий следующие виды М. tuberculosis, M. bovis, M.
africanum.

3.

Морфология
Характерен выраженный полиморфизм. M. africanum и М.
tuberculosis имеют форму длинных, тонких или более
коротких толстых M. bovis прямых или слегка изогнутых
палочек с гомогенной или зернистой цитоплазмой. Гр+,
неподвижны, спор не образуют.
Клеточная стенка имеет сложное строение. Первичный
каркас клеточной стенки образуют перекрестно связанные
пептидогликаны. Его дублирует слой арабиногалактанов,
формирующий полисахаридную строму клетки,
характеризующуюся относительно постоянным составом. Он
имеет точки связывания с пептидогликаном, а также
миколовыми кислотами и их производными. Наружные слои
представлены в основном липидами и имеют меняющийся
химический состав.
Из-за большого количества липидов в клеточной стенке,
солержащих миколовую кислоту, они плохо воспринимают
анилиновые красители. Для их выявления применяют
окраску кислото-. спирто и щелочеустойчивых бактерий по
Цилю-Нельсену, в основу которой положен принцип
термокислотного протравливания.
В препаратах микобактерии обнаруживаются в виде яркокрасных кислотоустойчивых палочек, расположенных
поодиночке или небольшими скоплениями из 2-3 клеток в
виде римской цифры пять.

4.

Культуральные свойста.
Облигатные аэробы. Растут медленно из-за
наличия в клеточной стенке липидов,
замедляющих обмен веществ с окружающей
средой. Оптимальная температура роста
37-38ºС. Оптимальное значение рН 6,8-7,2.
Микобактерии требовательны к питательным
средам, глицеринзависимые.
Элективные питательные среды для
микобактерий среды Левенштейна-Йенсена,
Финна-2;
На плотных средах на 15-20 день
инкубирования микобактерии образуют
шероховатые плотные колонии кремового
цвета бородавчатого вида (напоминают
цветную капусту).
В жидких средах через 5-7 дней на поверхности
образуется толстая сухая морщинистая пленка
кремового цвета. При этом бульон остается
прозрачным.

5.

Биохимические свойства.
М. tuberculosis – обладает каталазной активностью, уреазой, никотинаминидазой, восстанавливает
нитраты, накапливает в среде ниацин( ниациновый тест Конно – среда желтеет).
M. bovis – тоже обладает уреазой, но не восстанавливает нитраты, не продуцирует никотинаминидазу
и не накапливает ниацин.
Факторы патогенности.

6.

Резистентность.
В высохшей мокроте больного клетки сохраняют
жизнеспособность и вирулентность в течение 5-6 месяцев.
На предметах больного сохраняются более 3 месяцев. В
почве сохраняются до 6 месяцев, в воде – до 15 месяцев.
Солнечный свет вызывает гибель микобактерий через 1,5
часа, УФЛ – через 2-3 минуты. При пастеризации погибают
через 30 минут. Хлорсодержащие препараты вызывают
гибель возбудителей туберкулеза в течение 3-5 часов,
5%- ный раствор фенола - через 6 часов.

7.

Эпидемиология.
Туберкулез распространен повсеместно.
Основной источник инфекции - больной человек с туберкулезом
органов дыхания, выделяющий микробы в окружающую среду с
мокротой.
Источниками инфекции могут также быть люди с внелегочными
формами туберкулеза и больные животные (крупный рогатый скот,
верблюды, свиньи, козы и овцы).
Основной механизм заражения – аэрогенный.
Пути передачи возбудителя - воздушно-капельный и воздушнопылевой. Входными воротами при этом является слизистая
оболочка полости рта, бронхи и легкие

8.

Патогенез

9.

Проникнув в организм человека, микобактерии фагоцитируются.
В фагоцитах формируются фагосомы, внутри которых микобактерии остаются живыми
и размножаются. В фагоцитах микобактерии транспортируются в регионарные
лимфатические узлы, сохраняясь длительное время в “дремлющем” состоянии
(незавершенный фагоцитоз). При этом происходит воспаление лимфатических путей
(лимфангоит) и лимфатических узлов (лимфаденит).
Вместе внедрения возбудителя формируется очаг воспаления. Это воспаление в
течение нескольких недель приобретает специфический характер (развивается
реакция гиперчувствительности замедленного типа), в результате чего формируется
гранулема. В последующем происходит трансформация макрофагов в эпителиоидные
клетки.
При слиянии эпителиоидных клеток образуются гигантские многоядерные клетки.
Вокруг очага воспаления формируется соединительнотканная капсула,
некротизированные ткани обызветвляются.
В результате этого происходит формирование первичного туберкулезного комплекса,
внутри которого находится казеозная некротизированная ткань и остаются живые
микобактерии.

10.

Диагностика.
Клинический материал – мокрота, слизь с задней стенки глотки, гной, с/м
жидкость.
Методы:
1) Микроскопия – окраска по Цилю-Нильсену.
2) Бактериологический – посев на плотные среды Ливенштейна- Йенсена. В
среднем, при посеве диагностического материала для получения роста МБТ на
плотных питательных средах требуется 21-36 дней, на жидких питательных
средах - 12-22 дня.
Для дифференциации видов микобактерий внутри рода применяют: тест на
наличие способности продуцировать никотиновую кислоту (ниациновый тест);
тест на наличие нитратредуктазной активности; тест на наличие
термостабильной каталазы. Определяют чувствительность выделенной
культуры к антибиотикам
3) Аллерг. методы:
Туберкулинодиагностика (реакция Манту с туберкулином) представляет собой
внутрикожную пробу, направленную на выявление наличия специфического
клеточного иммунного ответа на введение туберкулина. Реакция Манту — это
иммунологический тест, основанный на гиперчувствительности замедленного
типа (ГЗТ).
Туберкулин представляет собой смесь фильтратов убитых нагреванием культур
микобактерий туберкулеза человеческого и бычьего видов, очищенных
ультрафильтрацией, осажденных трихлоруксусной кислотой, обработанных
этиловым спиртом и эфиром для наркоза и растворенных в стабилизирующем
растворе (0,85 % растворе натрия хлорида с фосфатным буфером, с Твином80).
Активный компонент препарата - аллерген туберкулопротеин вызывает при
осуществлении внутрикожной туберкулиновой пробы у инфицированных или
вакцинированных БЦЖ/БЦЖ-М лиц специфическую реакцию
гиперчувствительности замедленного типа в виде местной реакции гиперемии и инфильтрата (папулы).

11.

Дифтерия - острое антропонозное инфекционное
заболевание, вызываемое токсигенными штаммами
Corynebacterium diphtheriae, передающееся
преимущественно воздушно-капельным путем
характеризующееся местным фибринозным воспалением
преимущественно зева и носа, а также явлениями общей
интоксикации и поражением сердечно-сосудистой,
нервной и выделительной систем.

12.

Морфология.
Прямые или слегка изогнутые тонкие Грам+
неподвижные полиморфные палочки с
заостренными или булавовидными концами
0,3-,8х1,5-8,0мкм. Спор и капсул не образуют.
Они утолщены на концах за счет зерен
Бабеша-Эрнста, что придает им вид булавки
или булавы.
Не обладает кислотоустойчивостью, имеет
микрокапсулу с входящим в ее состав кордфактором. В состав клеточной стенки входит
большое количество липидов, в том числе
некислотоустойчивые коринеформные
миколовые кислоты.
При окраске по Леффлеру и Нейссеру
выявляются включения волютина на полюсах
клеток.

13.

Культуральные свойства.
Факультативные анаэробы, культивируются при
37 С, требователен к условиям культивирования.
На простых питательных средах не растет, для
первичного посева материала используют
диф-диагн среды, содержащие
гемолизированную кровь ( барана, лошади) и
0,03-0,04% теллурита Кальция или натрия,
которые подавляют рост сопутствующей
микрофлоры( среду клауберга) образуют
колонии черного или черно-серого цвета в
течении 24-48 часов.
Элективные среды для накопления используют
агар с добавлением 10% нормальной лошадиной
сыворотки, на таких средах через 8-14 часов
вырастает в виде изолированных точечных,
выпуклых желтовато-кремовых колоний с
гладкой или слегка зернистой поверхностью.

14.

Биохимические свойства.
Ферментируют глюкозу и мальтозу с образованием кислоты и не разлагают сахарозу, не продуцируют уреазу и не
образуют индол.
Отсутствие способности ферментировать сахарозу и разлагать мочевину, является важным диф-диагн признаком,
отличающим возбудитель дифтерии от других.
Способность продуцировать фермент цистиназу, расщепляющую цистин или цистеин до водорода ( положительная
проба Пизу)
Факторы патогенности.

15.

1.Поверхностные структуры способствуют адгезии микроорганизмов в месте входных ворот
инфекции и препятствуют фагоцитозу:
- корд-фактор липидной природы;
- микрокапсула, содержащая миколовые кислоты.
2.Ферменты агрессии и инвазии:
- нейраминидаза – расщепляет нейраминовую кислоту слизи;
-гиалуронидазу - разрушает гиалуроновую кислоту.
3. Токсины:
-гемолизин – разрушает эритроциты крови;
-дермонекротоксин – вызывает некроз клеток в месте локализации возбудителя;
-дифтерийный экзотоксин (гистотоксин) – основной фактор патогенности дифтерийного
микроба. Он является одним из наиболее сильных биологических ядов. Представляет собой
термолабильный полипептид - разрушается при 56-60ºС в течение 1-2 часов, при 80ºС - в
течение нескольких минут. Инактивация токсина происходит под влиянием прямого
солнечного света, УФ лучей (в течение 1-2 часов), кислорода воздуха.
Токсин состоит из двух фрагментов - А и В. Фрагмент В обеспечивает адсорбцию и
проникновение фрагмента А в клетку. Дифтерию вызывают только токсигенные штаммы,
которые несут в своем геноме гены умеренного бактериофага.

16.

Патогенез .
Входные ворота - слизистые оболочки верхних дыхательных путей (миндалины, зев,
носоглотка, гортань, трахея), реже – конъюнктива глаз, кожа, слизистая половых органов.
Инкубационный период - 2-10 дней (в среднем 5-7 дней).
В месте входных ворот происходит адгезия возбудителя, его
размножение и продуцирование дифтерийного токсина. В
результате этого наблюдается некроз эпителия, выход
фибриногена из сосудистого русла, превращение фибриногена в
фибрин и образование фибринозной пленки.
Пленка представляет собой скопление нитей фибрина,
некротизированных клеток эпителия, эритроцитов, лейкоцитов,
бактерий. В полости рта, зеве, глотке, где слизистая выстлана
многослойным эпителием, образуется дифтеритическая пленка,
плотно соединенная с подлежащей тканью. На слизистой
дыхательных путей, покрытых однослойным эпителием,
возникает крупозная пленка, рыхло связанная с подлежащей
тканью.
Экзотоксин оказывает не только местное, но и общее действие.
Развивается токсинемия. При этом поражаются различные
органы, но в наибольшей степени страдают сердечная мышца,
нервная ткань, надпочечники и почки (в этих тканях происходит
дегенерация паренхимы, жировая инфильтрация, некроз, иногда
возникают обширные кровоизлияния).

17.

Лабораторная диагностика.
Клинический материал – слизь с зева, носа, пленки.
Методы:
•Бактериоскопия – мазок окрашивают по Грамму, Нейсеру, Леффлеру
•Экспресс методы – ПЦР
•Бактериологическое – посев на среду с теллурином и кровяным агаром