Пиогенные кокки. Стафилококки, стрептококки, менингококки, гонококки

1. ФГБОУ ВО «Ульяновский государственный университет»

Пиогенные кокки.
Стафилококки, стрептококки,
менингококки, гонококки
Лектор:
доктор медицинских наук, профессор
Н.И.Потатуркина-Нестерова

2. ГНОЕРОДНЫЕ КОККИ – возбудители гнойно-воспалительных заболеваний

Грамположительные факультативные анаэробы
Стафилококки
Стрептококки
Грамотрицательные
аэробы
Менингококки
Гонококки

3. Стафилококки

Открыты в 1880 г. Л.Пастером и Огстеном
Сем: Micrococcaceae
Род: Staphylococcus
Виды: S. aureus (патогенные)
S. Epidermidis (условно патогенные)
S. Saprophyticus (сапрофитные)
Являются представителями нормальной микробиоты.
Локализация – верхние дыхательные пути, кожа, кишечник.
Попадают в окружающую среду.

4. Морфологические и тинкториальные свойства

Шаровидные клетки, располагаются чаще скоплениями
неправильной формы – «гроздья винограда» (Staphilusгроздь), реже – одиночно, попарно
Имеют микрокапсулу, неподвижны, могут образовывать
L-формы
В состав клеточной стенки входит протеин А (фактор
иммунодепрессии), блокирующий FC-фрагмент IgG
Грамположительные

5. Культуральные свойства

К питательным средам не требовательны:
МПБ –равномерное помутнение (рис 1, в пробирке)
МПА –круглые пигментированные средних
размеров колонии (рис.2)
Кровяной агар (КА) – только патогенные виды
образуют гемолиз (рис 3)
Элективная среда : ЖСА (желточно-солевой агар - содержит МПА,
желток куриного яйца, повышенные концентрации хлорида натрия
(8-10%), которые не препятствуют размножению стафилококков и
обеспечивают для них элективность среды. Вокруг колоний
лецитиназопозитивные стафилококки образуют зоны помутнения с
перламутровым оттенком – лецитиназная активность (рис. 4)

6. Биохимические свойства

Биохимически активны, факультативные анаэробы
Положительная реакция Фогеса-Проскауэра (проба на
ацетилметилкарбинол) – розовое окрашивание, при
отрицательной – желтое (см. клебсиеллы)
Проба Кларка с метилрот положительная (тест на образование К
при ферментации Г) – красное окрашивание
Содержат цитохромы, обычно оксидазоотрицательные
Образуют каталазу, сероводород, аммиак, восстанавливают
нитраты
Продуцируют сахаролитические ферменты. Родовое свойство –
ферментация глюкозы в анаэробных условиях.
Патогенные – ферменты агрессии (коагулаза, фибринолизин,
лецитиназа и др.)

7. Антигены

Всего известно около 50 антигенов – родовые, видовые и
типовые
Антигены клеточной стенки
1) родоспецифический (пептидогликан) - общий для
стафилококков,
2) видоспецифические :
а) тейхоевые кислоты (полисахариды) – S.aureus
содержит полисахарид A, S. epidermidis – полисахарид В);
б) белок А – в клеточной стенке золотистого
стафилококка,
3) типоспецифический – агглютиноген.

8. Факторы патогенности

Микрокапсула (адгезия, защита от фагоцитоза)
Компоненты клеточной стенки, способствующие
развитию воспалительной реакции
Ферменты агрессии: плазмокоагулаза,
фибринолизин, лецитиназа, фосфатазы, фосфотидазы,
экзонуклеазы, протеазы.
Механизмы множественной лекарственной
устойчивости
Токсины

9. Токсины

Экзотоксины. Белки, которые разрушают мембраны клеток
мишеней
1) Гематолизины (альфа-, бета-, дельтатоксин и др.) - гемолиз
эритроцитов, лейкоцитов, макрофагов и др.
2) Дермонекротоксин – некроз кожи
3) Токсин синдрома токсического шока (TSST) – развитие
токсического шока
4) Лейкоцидин – состоит из двух фракций, для одной
мишенями являются макрофаги, для другой –
полиморфноядерные лейкоциты
5) Экзофолиативный экзотоксин – вызывает отслойку
эпителия кожи с образованием пузырей
6) Энтеротоксины (А, В, С, D, Е) – пищевые
токсикоинфекции у детей

10. Синдром ошпаренной кожи – результат действия эксфолиативного токсина

11. Эпидемиология

Устойчивы во внешней среде
Источник заболевания – больной или
бпктерионоситель (носоглотка)
Пути передачи - контактный, аэрогенный,
алиментарный. ПАНТРОПНЫ!
Заболевания – ГВЗ (гнойно-воспалительные
заболевания):
а) локальные, б) генерализованные

12. Патогенез

Формирование очага гнойно-воспалительного поражения
различной локализации и степени тяжести
Патогенез связан с действием факторов патогенности
На фоне иммунодефицита как ЭНДОГЕННАЯ инфекция
Возможна генерализация процесса с развитием сепсиса или
септикопиемии
Иммунитет - низкой напряженности, может развиться ГЗТ

13. Вызываемые стафилококками заболевания

1. Болезни кожи и подкожной клетчатки – абсцесс,
панариций, фурункул, пиодермии, эксфолиативный
дерматит (синдром «ошпаренной кожи»).
Болезни органов дыхания – бронхит, пневмония,
плеврит и др.
Болезни нервно системы и органов чувств – менингит,
отит, конъюнктивит.
Болезни органов пищеварения – энтерит, энтероколит,
перитонит, стоматит.
Болезни мочеполовой системы – пиелит, цистит,
уретрит, эндометрит, орхит и др.
Сепсис и многие другие

14. Стафилококковые заболевания

Флегмона руки с
переходом на грудную
клетку
Гангрена стоп

15.

Пустулезные высыпания
Герпетическое
поражение века

16. Лабораторная диагностика

Исследуемый материал – гной, кровь, моча, мокрота,
фекалии, отделяемое носоглотки и др.
Бактериологический – основной
Серологические методы (при хр. Инфекции) –ИФА,
РН, РНГА)
Фаготипирование с эпидемиологической целью
Выявление энтеротоксинов при стафилококковой
интоксикации (биопроба или реакция преципитации в
геле).

17. Бактериологический метод

1 день – посев на ЖСА (выявление лецитиназной
активности), кровяной агар (КА) – зона гемолиза (для
определения патогенности), сахарный бульон (для
дальнейшего выявления антигенов – серотипирование)
2 день – микроскопия, пересев на скошенный агар для
получения чистой культуры, коагулазная проба
(выявление патогенности)
3 день – определение биохимических свойств,
антибиотикограмма, РА для выявления а/г,
фаготипирование (с эпидемиологической целью)
4 день – учет результатов, оформление ответа

18. Специфическая профилактика, лечение

1. Специфическая профилактика: анатоксин,
стафилококковые Ig и/или донорская гипериммунная
плазма, фаги
2. Лечение:
а) Химиотерапия – а/б (цефалоспорины, фторхинолоны, ванкомицин), сульфаниламиды.
б) Фаготерапия – поливалентные фаги.
3. Иммунотерапия:
а) стафилококковые анатоксины;
б) аутовакцины;
в) сыворотки.

19. Стрептококки

Впервые обнаружены Билротом в 1874 г.
Семейство Streptococcaceae (Streptus - цепь)
Род Streptococcus
Виды:
S. pyogenes
S. рneumoniaе
S. faecalis

20. Морфологические и тинкториальные свойства

Кокки расположенные в цепочку
или диплококки ланцетовидной
формы (пневмококки)
Полисахаридная капсула
Адгезины – фимбрии,
липотейхоевая кислота
Неподвижны, спор не образуют
Могут образовывать L-формы
Грамположительные

21. Культуральные свойства

К питательным средам требовательны – растут на средах с
добавлением крови (КА), сыворотки (СА-, СБ-сывороточные
агар и бульон), углеводов (СБ-сахарный бульон).
На плотных средах – в виде мелких бесцветных колоний. На
кровяном агаре возможно образование зоны гемолиза:
α-гемолиз – неполный гемолиз, вокруг колонии образуется
зона позеленения, т.к. Hb (гемоглобин) превращается в MetHb
(метгемоглобин, который имеет зеленый цвет)
β-полный гемолиз – образуется зона просветления вокруг
колонии
γ – отсутствие гемолиза
В жидких средах дают пристеночно- придонный рост

22. Гемолитические стрептококки на кровяном агаре (гемолиз)

23. Антигены

Классификация по антигенам Р.Лэнсфильд (1933 г.)
По С-полисахаридному (групповому а/г)
стрептококки разделены на 20 серогрупп, которые
обозначаются А, В, С, Д, Е...и так до V. Патогенные для
человека стрептококки чаще относятся к группе А.
В пределах каждой группы по М, P, T- белковому
типоспецифическому антигену стрептококки делят на
серовары. Известно более 80 вариантов белка М,
который снижает эффективность гуморального
иммунитета, ингибирует фагоцитоз, вызывает
выработку антител

24. Факторы патогенности

Факторы адгезии и колонизации:
1. М-белок (фимбриальный) – антифагоцитарное и др. действия
2. Капсула – защищает от фагоцитоза
3. Тейхоевые кислоты
Ферменты агрессии:
стрептолизин О- и S, гиалуронидаза (обеспечивает высокую
инвазивность), ДНК-аза, стрептокиназа (фибринолизин) и др.
Агрессины:
1. Белок М,
2. С5а-пептидаза – угнетает хемотаксис фагоцитов
Токсины (экзотоксины): эритрогенный (пирогенный),
кардиогепатический
Бактериоцины

25. Вызываемые заболевания

Источник – экзогенные: больные, бактерионосители;
эндогенно
Раневые инфекции: поражение кожи и мягких тканей
Острые заболевания – скарлатина, ангина, рожа,
импетиго, острый гломерулонефрит, эндокардит,
послеродовой сепсис, менингит, пневмония)
Хронические заболевания - хронический тонзиллит,
ревматизм, хронический гломерулонефрит
Иммунитет нестойкий и ненапряженный, возможно
развитие ГЗТ.

26. Патогенез

Аналогичен патогенезу стафилококковых инфекций
Обусловлен действием факторов патогенности
Характерны отсроченные осложнения
Большое значение имеет состояние иммунной системы
Тонзиллит

27. Белый земляничный язык

Скарлатина
Характерный бледный
носогубный треугольник

28.

Рожистое воспаление
Кольцевая эритема при
сенсибилизации
организма к
стрептококкам

29. Лабораторная диагностика стрептококковых инфекций

Исследуемый материал: гной, кровь, моча, мокрота,
отделяемое зева, ликвор и др.
Методы:
Бактериологический (выделение чистой культуры)
При пневмонии для выделения чистой культуры –
предварительное внутрибрюшинное заражение белых
мышей, т.к. они очень чувствительны к пневмококкам.
Далее выделение чистой культуры из органов
погибшего животного
Серологические чаще при хронических процессах
(РСК, РН – выявление а/г, при ревматизме выявление
антистрептолизина-О, антигиалуронидазы).
Внутрикожная проба Дика – для выявление ГЗТ при
скарлатине.

30. Проба Дика (антитоксическая проба)

Внутрикожный тест на выявление в организме
человека антитоксических антител к эритрогенному
токсину S. pyogenes, т.е. выявление антитоксического
иммунитета к скарлатине.
При постановке внутрикожно на внутренней стороне
предплечья вводят 0,1 мл эритрогенного токсина. При
отсутствии к нему антител через 1-4 часа на месте
введения воспаление диаметром 10 мм и более. Значит
иммунитета нет.
При наличии антитоксических антител они
нейтрализуют введенный токсин и воспаления не
образуется. Отрицательная реакция.

31. Бактериологический метод

1 день – Посев исследуемого материала на КА для
получения колоний, СБ.
2 день – Микроскопия материала из выросших
колоний.
Пересев на скошенный агар для получения чистой
культуры.
Серотипирование РА на стекле, коагглютинации и РП
с типовыми сыворотками (по классификации Лансфильд).
3 день – Микроскопия выросшей чистой культуры,
пересев для изучения биохимических свойств,
антибиотикограмма.
4 день – Учет результатов, оформление ответа.

32. Специфическая профилактика. Лечение

Для специфической профилактики пневмококковых
инфекций разработана поливалентная вакцина из 23
полисахаридных сероваров возбудителя. Иммунизация
групп риска проводится двукратно с 5-10 летним
интервалом.
Лечение – антибиотики природные и полусинтетические
пенициллины, цефалоспорины, макролиды. В связи с
малой чувствительностью возбудителей не применяют
аминогликозиды и фторхинолоны.
При хронических формах рекомендуют использование
аутовакцин и убитых поливалентных вакцин из
вирулентных штаммов возбудителя.
Для лечения может быть использован стрептококковый
бактериофаг жидкий, представляющий собой фильтрат
фаголизата стрептококка.

33. Грамотрицательные аэробные пиогенные кокки. Нейссерии

Сем. Neisseriaceae
Род Neisseria
Вид N. meningitidis
Вегетируют на слизистых оболочка человека и
животных

34. Биологические свойства

Диплококки бобовидной формы
жгутиков нет
спор не образуют
имеют капсулу
Грамотрицательные
Требовательны к питательным средам
Элективные среды – шоколадный
или сывороточный агар с а/б ристомиЦином. Повышенное содержание СО2
стимулирует рост.
Колонии нежные, полупрозрачные,
мелкие (до 1 мм)

35. Биохимические свойства

Биохимически малоактивны
Расщепляют глюкозу и мальтозу до кислоты (Г, Мз до
К)

36. Антигенная структура

Родовой антиген (род Neisseria) – полисахаридный Оантиген
Видовой антиген (вид N.meningitidis) – протеиновый
Внутри вида полисахаридный группоспецифический
(капсульный ) антиген. По нему делят на 13 серогрупп:
A,B,C,D,X, и т.д.). Эпидемии вызывают гр. А.
В, С и др. – спорадические случаи
Белковый антиген, связан с наружной мембраной. По
нему менингококки внутри групп делят на серовары
1,2,3 и т. д.

37. Токсин

Эндотоксин – пирогенное действие, повышает
проницаемость сосудов (кровоизлияние)
Факторы патогенности
Факторы адгезии –пили, белки наружной мембраны
Капсула – защита от фагоцитоза
Эндотоксин
Адгезины (пили)
Ферменты агрессии (нейраминидаза, гиалургонидаза)
IgA-протеазы (расщепляют IgA, что защищает
бактерии от его действия )

38. Эпидемиология и вызываемые заболевания

Источник заражения: больные и носители.
Экологическая ниша – носоглотка
Механизм передачи – аэрогенный, путь - воздушнокапельный
Возбудитель очень неустойчив в окружающей среде,
быстро погибает
Вызываемые заболевания:
- Локализованные формы – бактерионосительство,
назофарингит
- Генерализованные – эпидемический
цереброспинальный менингит, менингококцемия
(сепсис)
В редких случаях : миокардит, эндокардит

39. Патогенез

Попадает через слизистые оболочки носоглотки,
первичный очаг воспаления
По окончаниям обонятельного нерва воспалительнй
процесс может распространяться на оболочки мозга
Внутрисосудистая инвазия, токсическое поражение и
микроциркуляторные расстройства сосудов мозга,
повышение внутричерепного давления, септическая
интоксикация и пиогенные метастазы во внутренние
органы (менингококцемия)
Инфекция мозговых оболочек (гнойный менингит).
Большое значение играет эндотоксин
Патогенез включает поражения токсического,
септического и аллергического характера
Иммунитет – напряженный, длительный

40.

Ранняя
менингококковая
инфекция
Геморрагическая сыпь
у ребенка

41. Лабораторная диагностика

Исследуемый материал: отделяемое носоглотки,
кровь, ликвор, трупный материал. Транспортируют в
утепленных контейнерах
Методы диагностики
Бактериоскопический (ориентировочный) – препарат
окрашивают по Граму или/и метиленовой синью
бактериологический
серологический (РНГА, РИА, ИФА)
Ликвор получают люмбальной пункцией,
центрифугируют, полученный осадок микроскопируют
и делают посев на питательные среды

42. Бактериологический метод

1 день. Посев на питатательные среды в чашке Петри
при 8-10% СО2 для получения колоний
2 день. Микроскопия материала из колонии. Пересев на
скошенный агар для получения чистой культуры.
3 день. Микроскопия. Определение биохимических
свойств. Определения а/г РА. Антибиотикограмма.
4 день Учет результатов. Оформление ответа
Серологический метод
Для обнаружения бактериальных а/г в ликворе (РП, ИФА,
р. коагглютинации, РИА, иммуноэлектрофорез) или а/т в
сыворотке крови

43. Специфическая профилактика

Для создания пассивного иммунитета – детям
дошколного возраста однократно иммуноглобулин 1,53,0 мл
Активная иммунизация - вакцина менингококковая
химическая (из полисахаридных капсульных антигенов
серогрупп А и С)
Лечение
Препарат выбора – бензилпенициллин,
ампициллиноксациллин.
При непереносимости – рифамицины, левомицетин,
хлорамфеникол,.

44. Гонококки

Сем. Neisseriaceae
Род Neisseria
Вид N. Gonorrhoeae
Биологические свойства
Аэробы
Диплококки бобовидной формы,
в мазках располагаются в лейкоцитах
Образуют L-формы, формы Аша
Спор нет
Жгутиков нет
Микрокапсула
Грамотрицательные

45. Культуральные свойства

Требовательны к питательным средам (необходим нативный
белок)
Среда Бейли, СА, КА, КДС-1 (гидролизат казеина, нативная,
аутолизат дрожжей, сыворотка), шоколадный агар, требуют 5-10
% СО2 в атмосфере
На кровяном агаре гемолиза не образуют
Характер роста: мелкие прозрачные колонии в виде капелек
росы.
В жидких средах образуют диффузное помутнение и
поверхностную пленку

46. Биохимические свойства

Низкая активность
Биохимически малоактивны, расщепляют только
глюкозу до кислоты (Г до К)
Выделяют каталазу и оксидазу
Антигены
Антигены чрезвычайно изменчивы
Представлены белковыми и полисахаридными
комплексами, по которым делят на 16 сероваров.
В лаборатории серовары чаще не определяют, т.к. не
это не имеет диагностического значения
Иммунитет нестерильный

47. Факторы патогенности

Капсула – антифагоцитарная активность
Пили – адгезия к эпителию
Поверхностные белки наружной мембраны:
- 1 класс – придает устойчивость к бактерициным
факторам слизистой оболочки;
- 2 класс – прикрепление к эпителию, ингибирование
фагоцитоза
Протеазы – инактивируют антитела
Эндотоксин – ЛПС (увеличивает проницаемость
капилляров, вызывает склерозирование тканей), очень
токсичен для других микроорганизмов, кроме трихомонад.
Ферменты агрессии – гиалуронидаза, нейраминидаза

48. Эпидемиология

Источник заболевания: больной человек (острая форма
и хроническая бессимптомная)
Экологическая ниша – слизистые оболочки
мочеполовых путей человека
Механизм передачи – контактный, путь передачи –
половой, крайне редко – бытовой
половой, контактно-бытовой, возможно заражение в
родах.
В окружающей среде неустойчив, быстро
инактивируется
Вызываемые заболевания: гонорея, гонококковая
септикопиемия, бленнорея новорожденных

49. Формы заболевания

Гнойное
воспаление
слизистой
оболочки
мочеполовыз путей (гонорея), конъюнктивы глаз
(бленнорея), других органов
Патогенез
Инкубационный период – 2-4 дня.
Гонококки прикрепляются к клеткам цилиндрического
эпителия при помощи ресничек и размножаются в/кл
Через 3-4 дня переходят в подслизистый слой
Возможна генерализация
Возможны осложнения: эндокардит, артрит,
распространение процесса на верхние отделы
мочеполовой системы.
Иммунитет нестерильный

50.

Гонококковый
конъюнктивит
Препарат из гноя

51. Лабораторная диагностика

Исследуемый материал: гнойное отделяемое, при
хронических формах моча (провокация), сыворотка крови
Методы диагностики:
Микроскопический: 1) окр. по Граму, метиленовой
синькой; 2) иммунофлюоресценция
Выявляют грамотрицательные диплококки, находящиеся
в лейкоцитах (незавершенный фагоцитоз)
Бактериологический
Серологический – выявление антител (РНГА, ИФА, при
хронической гонорее - РСК)
ПЦР

52. Бактериологический метод

1 день Посев на питательные среды с добавлением
полимиксина, ристомицина, задерживающих рост
других бактерий (для получения колоний)
2 день Микроскопия, пересев на скошенный СА
(для получения чистой культуры)
3 день Микроскопия, определение биохимических
свойств, а/г. Антибиотикограмма
4 день Учет результатов. Оформление ответа

53. Специфическая профилактика и лечение

Специфическая профилактика не разработана
Гоновакцину используют для диагностики
Для профилактики бленнореи новорожденным
сразу после рождения в конъюнктивальный мешок
закапывают нитрат серебра или препараты
пенициллина
Лечение антибиотиками (препараты пенициллина,
цефалоспорины, азитромицин)

54. Благодарю за внимание !