- Лекция 3

1. Возбудители воздушно – капельных бактериальных инфекций. Бордетеллы – возбудители коклюша и паракоклюша – характеристика

ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ПРОФЕССИОНАЛЬНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ
«КРАСНОДАРСКИЙ КРАЕВОЙ БАЗОВЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ КОЛЛЕДЖ»
МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ КРАСНОДАРСКОГО КРАЯ
Возбудители воздушно – капельных бактериальных инфекций.
Бордетеллы – возбудители коклюша и паракоклюша –
характеристика биологических свойств.
Методы микробиологической диагностики. Легионеллы.
Нокардии
Лекция №3

2. Исторические данные

Возбудители коклюша и паракоклюша относятся к роду Bordetella.
Этот род представлен тремя видами:
• Bordetella pertussis – возбудитель коклюша, описан Борде
и Жангу в 1906 г.
• Bordetella parapertussis – возбудитель паракоклюша, были
описаны Элдерингом и Кондриком в 1937 г.
• Bordetella bronchiseptica – вызывает заболевание у животных,
у человека эти бактерии вызывают бронхопневмонию с
коклюшеподобным кашлем. Впервые у человека это
заболевание описано Брауном в 1926 г. (встречается редко).
О. Жангу
Ж. Борде

3. Морфология

Возбудители коклюша – мелкие палочки овоидной формы,
0,3-0,5 × 1-1,5мкм, возбудитель паракоклюша несколько большей
величины;
• при специальной окраске видна капсула;
• более интенсивно окрашиваются по полюсам;
• на ультрасрезах видны капсулоподобная оболочка,
зерна валютина, в нуклеоиде видны – вакуоли;
• не имеют спор, неподвижны;
• грамотрицательны.

4. Культивирование

Возбудители коклюша и паракоклюша – хемоорганотрофы, по типу
дыхания аэробы. Оптимальная температура 37°, оптимальная pH 6,8 – 7,4.
Очень требовательны к питательным средам. Для их выращивания
применяют среду Борде-Жангу (глицериново-картофельный агар с кровью).
В настоящее время используют среду КУА (казеиново-угольный агар).
Для угнетения роста посторонней флоры к среде добавляют пенициллин
по 0,25 - 0,5 ед на 1 мл среды или метициллин - 2,5-4 мкг на 1 мл.
Среда КУА (казеино-угольный агар)
Среда Борде-Жангу (картофельно-глицериновый
агар с кровью)

5. Культивирование

НА СРЕДЕ КУА:
• колонии B.pertussis мелкие 1-2 мм в диаметре; B.parapertussis несколько крупнее;
• колонии блестящие, серовато-кремового цвета;
• при снятии колоний остается вязкий, сметанообразный след;
• В.parapertussis образует ферменты уреазу и тирозиназу, поэтому в средах, которые
содержат тирозин происходит его расщепление и среда окрашивается в коричневый
цвет, а в средах, в которых содержится мочевина среда окрашивается в розовый цвет.
Изменение цвета среды является дифференциально-диагностическим признаком;
• в жидкой среде бактерии коклюша и паракоклюша образуют равномерную муть и
придонный осадок;
• на агаре с кровью они дают зону гемолиза;
• при изучении колоний в стереоскопическом микроскопе виден световой конус
(колонии отбрасывают тень), что имеет дифференциально-диагностическое значение.

6.

Ферментативные свойства.
Возбудители коклюша не расщепляют углеводы и не ферментируют белки.
Бактерии паракоклюша образуют ферменты уреазу и тирозиназу.
Патогенетические свойства.
Оба
вида
продуцируют
ферменты
патогенности:
гиалуронидазу,
плазмокоагулазу и лецитиназу.
В опытах на животных у коклюшной палочки были выявлены четыре токсина
белковой природы:
• термолабильный дермонекротический токсин;
• термостабильный эндотоксин;
• лейкоцитозостимулирующий фактор;
• гистаминсенсибилизирующий фактор.
Первые два типа токсина свойственны к возбудителю паракоклюша.

7. Антигенная структура 

Антигенная структура
Наиболее важными антигенами для лабораторной диагностики бактерий рода Bordetella
являются агглютиногены.
• Родовым агглютиногеном является - 7
• Видоспецифическими агглютиногенами для бордетелл:
- Pertussis - 1,
- Parapertussis - 14,
- Bronchiseptica - 12.
Кроме видоспецифических антигенов, у представителей Bordetella имеются
допонительные агглютиногены, которые определяют АГ- структуру.
Агглютиногенные факторы
Вид микробов
B.pertussis
Общий для рода
Специфический для вида
7
1
B.parapertussis
7
14
B.bronchiseptica
7
12
По сочетанию 2-х дополнительных агглютиногенов 2,3, определяемых в реакции
агглютинации с моноспецифическими сыворотками, В. pertussis различают несколько
серовариантов: 1,2,3; 1,2,0; 1,0,3; 1,0,0.

8. Устойчивость к факторам окружающей среды

Возбудители коклюша и паракоклюша мало устойчивы.
Очень чувствительны к высоким температурам – при 56°С они погибают
через 20-30 мин. Низкие температуры действуют на них губительно.
Прямой солнечный свет убивает их через 1-2 ч. Уф-лучи – через
несколько минут.
В сухой мокроте эти бактерии сохраняются в течение нескольких часов.
Обычные растворы дезинфицирующих веществ губят их быстро.
Оба вида микробов мало чувствительны к антибиотикам, не
чувствительны к пенициллину.

9. Патогенез

Источник инфекции - больной человек (особенно заразны
больные с катаральными явлениями).
Пути передачи – основной воздушно-капельный.
Возбудители коклюша и паракоклюша вызывают острое
респираторное
заболевание,
которое
сопровождается
конвульсивным кашлем.
Попав на слизистую оболочку верхних дыхательных путей,
бактерии размножаются там и частично разрушаются,
выделившийся токсин действует на ЦНС, раздражает нервные
рецепторы слизистой оболочки ВДП, что приводит в действие
кашлевой рефлекс. В результате возникают приступы
судорожного кашля.
В процессе заболевания наблюдается несколько периодов:
катаральный, спазматического кашля и разрешения процесса.

10.

Профилактика и лечение
Специфическая
профилактика
При ранних стадиях заболевания
иммунизация детей АКДС (коклюшно- применяют
противококлюшный
дифтерийно-столбнячной
вакциной). иммуноглобулин.
Вакцину вводят троекратно в возрасте до
Для лечения коклюша используют
6 месяцев с последующей ревакцинацией.
антибиотики
(эритромицин
и
Неспецифическая профилактика:
ампициллин и др.)
• выявление и изоляция больных;
• ослабленным детям, находившимся в
контакте с больным коклюшем, вводят
иммуноглобулин.

11. Микробиологическое исследование

Материал для исследования –
Методы диагностики:
слизь из носоглотки.
• микроскопический;
• микробиологический;
Способы сбора материала:
• серологический – РА,РСК;
• метод кашлевых пластин;
• экспресс-диагностика–
• заднеглоточный способ;
иммунофлюроресцентные методы, ПЦР.
• носоглоточный способ.

12. Микробиологический метод исследования

Мазки из нижних отделов носоглотки, мокрота.
Бактериологическое
исследование
1 этап
Посев на элективные среды: КУА,
Среда Борде-Жангу и др.
- Учет результатов посева;
- изучение культуральных признаков;
-мазок, окраска по методу Грама;
2 этап
Пересев типичных колоний на скошенный
КУА для получения чистой культуры
Идентификация чистой культуры
3 этап
Мазок, окраска по
методу Грама
Серологическая
идентификация
Определение
По биохимическим
чувствительности
признакам
Окончательный ответ
к антибиотикам

13.

Экспресс - диагностика
Иммунохимические и
иммунофлюроресцентные методы исследования
ПЦР - диагностика
Предварительный ответ
Серологический метод
Серодиагностика: РА, РСК и др.

14. Характеристика биологических свойств рода Legionella

Семейство Legionellaceae, род Legionella включает виды:
• L. pneumophila – вызывает «болезнь легионеров»;
• L. longbeachae – вызывает понтиакскую лихорадку.
Legionella – тонкие подвижные прямые или слегка искривлённые
палочковидные бактерии:
• размер 3 х 0,5—0,7 мкм;
• жгутик располагается монотрихиально;
• грамотрицательные;
• спор и капсул не образуют.

15.

Культивирование
Легионеллы хемоорганотрофы, по типу дыхания аэробы. Оптимальная
температура 35 °С, оптимальный рН 6,9 (бактерии очень чувствительны к
изменению кислотности среды).
В жидких средах обычно не растут. На твёрдых средах легионеллы через 3-5
суток образуют серые стекловидные колонии с ровными краями 3-4 мм в
диаметре. Для роста микроорганизмов необходимо присутствие цистеина и
железа. Обнаруживаются в культуре на буферном угольно-дрожжевом агаре
(БУДРАГ).
Легионеллы также выращивают в культурах амёб и в желточном мешке
куриного эмбриона.
Ферментативная активность
Ферментируют только крахмал, не восстанавливают нитраты и не разлагают
мочевину.
Продуцируют оксидазу и каталазу, расщепляют желатин.

16.

Патогенез
Путь передачи – воздушно-капельный.
Источники заражения — бассейны, домашние системы нагрева воды,
фонтаны, пруды, ручьи и т.д.
При вдыхании бактерии могут инфицировать альвеолярные макрофаги
и
размножаться там. Это приводит к болезни легионеров или
понтиакской лихорадке.
Инкубационный период длится до двух недель.
Продромальные симптомы похожи на грипп, включая лихорадку, озноб
и сухой кашель.
В последующих стадиях болезнь вызывает проблемы с желудочнокишечным трактом и нервной системой, появляется тошнота и диарея.
Также присутствуют другие симптомы воспаления лёгких.

17. Микробиологическая диагностика

Материал для исследования:
• мокрота;
• промывные воды бронхов;
• плевральный экссудат;
• кровь.
Методы диагностики:
• микроскопический;
• микробиологический
–
производят
посевы на буферном угольно-дрожжевом
агаре (БУДРАГ);
• серологический:
– реакция микроагглютинации;
– непрямой иммунофлюоресценции;
– прямой иммунофлюоресценции;
– ПЦР.
• биологический.

18.

Характеристика биологических свойств рода Nocardia
Семейство Nocardiaceae, род Nocardia представлен более 30 видами.
Поражения у человека вызывают Nocardia astemides (80—90% всех случаев),
N. brasiliensis (5-6% случаев) и N.caviae (около 3% поражений).
Клетки нокардии прямые или изогнутые с частым ветвлением, на ранних
стадиях образуют развитый мицелий:
• диаметр гиф 0,5–2,0 мкм;
• неподвижны;
• могут образовывать споры;
• относительно кислотоустойчивы;
• окраска по Граму вариабельна;
В патологическом материале представлены грамположительными короткими
нитями, в старых культурах можно обнаружить грамотрицательные
диссоциированные элементы.
• капсул не образуют.

19. Культивирование

Нокардии хорошо растут на простых питательных средах (МПА,
МПБ, среда Сабуро и др.). Оптимальная температура роста 28-37 °С.
На жидких средах образуют тонкую прозрачную пленку, которая
напоминает растекшуюся каплю жира, постепенно приобретают кремовожелтый цвет. Возможен придонный рост в виде комочков ваты или
плотных зерен.
На плотных средах через 45-72 ч образуют мелкие гладкие влажные
колонии мягкой консистенции. Через 72 ч поверхность колоний меняется,
на 10-14-е сутки принимают вид с приподнятым и извитым центром и
фестончатыми краями. Продуцируют пигменты от кремового до
красного, которые диффундируют в питательную среду.

20. Патогенез

Источник инфекции – почва.
Путь передачи: контактный, воздушно-капельный, воздушнопылевой, алиментарный.
Механизм заражения.
Первичный воспалительный очаг образуется в легких. Генерализация
инфекции возникает на фоне иммунодефицита. Возбудитель
распространяется с кровотоком и локализуется в разных внутренних
органах (почки, надпочечники, селезенка, печень), образуются очаги,
которые, напоминают очаги как при туберкулезе легких или при
системных микозах. При генерализации процесса нередко возникают
абсцессы мозга.

21. Профилактика. Лечение

Специфическая профилактика нокардиоза не разработана.
Неспецифическая профилактика направлена на повышение
иммунного статуса.
Для лечения применяют сульфаниламидные препараты или комбинации
их с гентамицином или левомицетином.
Если инфекция возникает и распространяется, может потребоваться
хирургическое вмешательство для удаления зараженных участков.
При отсутствии лечения, нокардиоз, который поражает легкие или
распространился по организму приводит к летальному исходу.

22. Микробиологическая диагностика

Методы диагностики:
микроскопический – (окрашенные мазки
по Граму, Цилю-Нильсену);
микробиологический
(ср. Сабуро, кровяной агар, МПА);
серологический – РСК, ПЦР, РА, РП;
аллергический – кожно-аллергические
реакции;
• экспресс-диагностика –
р-я иммунофлюоресценции
• биологический.
Материал для исследования:
• мокрота;
• гнойное отделяемое;
• ликвор;
• биоптат.

23. Спасибо за внимание!