Функциональная диагностика системы крови

1.

Функциональная диагностика
системы крови

2.

СИСТЕМА КРОВИ
(Г.Ф. Ланг, 1939 г.)
Включает в себя:
• периферическую кровь,
циркулирующую по сосудам
(коллоидный раствор)
• депо крови
• органы кроветворения
• органы кроверазрушения
• регулирующий нейрогуморальный
аппарат

3.

ГОМЕОСТАТИЧЕСКИЕ КОНСТАНТЫ КРОВИ
ЖЕСТКИЕ
МЯГКИЕ
Колебание допустимо в
очень
небольших
диапазонах.
Значительное
отклонение
приводит
к
нарушению
жизнедеятельности.
Могут
отклоняться
в
относительно
широких
пределах без существенных
нарушений жизнедеятельности.

4.

5.

МЯГКИЕ КОНСТАНТЫ КРОВИ
ОЦК: 5.2 л у мужчин, 3.9 л у женщин
Гематокрит
Количество форменных элементов
Количество гемоглобина
СОЭ

6.

ГЕМАТОКРИТ
- отношение объема форменных элементов
к объему крови (%)
Норма:
мужчины: 40 - 52%
женщины: 36 - 48%
Главный компонент
- эритроциты

7.

Определение гематокрита
1. Используют предварительно обработанный
антикоагулянтом (например, гепарином), высушенный
капилляр. Капилляр градуирован.
2. Капилляр заполняют кровью до отметки 100.
3. Центрифугируют.

8.

Определение количества форменных элементов крови
1. С использованием гематологических анализаторов:
подсчет отдельно эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов
(в зависимости от заданных пороговых параметров
размеров).
Возможные ошибки: при агглютинации эритроцитов,
микроцитозе, гигантских тромбоцитах и др.

9.

2. Подсчет в счетной камере Горяева
1. Эритроциты разводят в 200 раз 0,9%
NaCl или 3% NaCl, лейкоциты – в 20
раз 5% р-ром уксусной кислоты +
метиленовый синий.
2. Подсчитывают число клеток
под
микроскопом: эритроцитов – в 5,
лейкоцитов – в
100 больших
квадратах.
3. Пересчитывают число клеток на 1 л
крови с учетом объема квадратов и
разведения крови.

10.

Эритроциты считают в 5 больших квадратах, разделенных на малые
(в 80 малых), лейкоциты – в 100 больших квадратах, не разделенных
на малые.
В квадрате считают клетки, лежащие внутри его, а также касающиеся
левой и верхней границ. Клетки, касающиеся
правой и нижней границ, при подсчете не учитываются.
л
э

11.

Определение количества гемоглобина в крови
• Наиболее точные – колориметрические методы
(спектрофотометрия)
• Перед анализом добавляют реагент для образования
производного гемоглобина
• Наименьшую ошибку дают методы:
1) гемиглобинцианидный: раствор содержит дигидрофосфат калия
(для поддержания рН), детергент (для усиления гемолиза эритроцитов и
предотвращения мутности, связанной с белками плазмы), феррицианид
калия - окисляет все формы гемоглобина в метгемоглобин,
образуется гемиглобинцианид (HbCN), имеющий красноватый цвет.
2) гемихромный: раствор, вызывающий превращение гемоглобина в
окисленную форму - гемихром (HbChr), имеющий красноватый цвет .

12.

Количество гемоглобина:
130-164 г/л муж., 120-150 г/л жен.
Среднее содержание гемоглобина в эритроците MCH
(mean corpuscular hemoglobin) : 24 – 34 пг
Гемоглобин ( г / л)
MCH
Количество эритроцитов 1012 ( л)
Цветовой показатель крови - среднее содержание гемоглобина
в одном эритроците по отношению к норме: 0.86-1.05
Средняя концентрация гемоглобина в эритроците MCHC
(mean corpuscular hemoglobin concentration): 300 – 380 г/л
Определяют для эритромассы!
Гемоглобин ( г / дл)
MCHC
100 ( г / л)
Гематокрит (%)

13. Скорость оседания эритроцитов

СОЭмужчины = 1-10 мм/час
СОЭженщины = 2-15 мм/час

14. МЕХАНИЗМ СОЭ

Белки: фибриноген, гамма-глобулины и др.
БЕЛКИ
++++ +
+ + + + +
+++++
-
-
-
-
-
-
+++++++
- +
+
- +
+
- +
+
- +
+
- +
+
++++++
+++++
+
+
-
+++++
----
-
-
-
ЭРИТРОЦИТЫ
+
+
-----
-
-
-
-
-

15. Белки, влияющие на СОЭ

Агломерины:
фибриноген, глобулины, гаптоглобин,
церулоплазмин, белки распада тканей
Антиагломерины:
альбумины, жирные и желчные кислоты

16.

ЖЕСТКИЕ КОНСТАНТЫ КРОВИ
Осмотическое давление плазмы = 7.6 атм =
= 5770 мм рт ст (Осмолярность = 299 мосм/л)
Онкотическое давление плазмы = 0.03-0.04 атм
Количество белков плазмы = 7-8%
рН = 7.35 (венозная) – 7.40 (артериальная)
Постоянство ионного состава плазмы
Содержание кислорода и углекислого газа.
О2 = 18-20 об.% (артер.), 12-14 об% (вен. кровь)
СО2= 50-52 об%
55-58 об%

17.

Белки крови
1) Альбумины (54%)
2) Глобулины (38%) :
• α-глобулины (α1, α2)
• β-глобулины
• γ-глобулины – антитела
(иммуноглобулины)
3) Фибриноген (7%)
4) Протромбин (<1%)

18.

Функции белков крови
1. поддержание онкотического давления
2. обеспечение вязкости крови
3. обеспечение буферных свойств
4. питательная (резерв белков)
5. транспортная (транспорт жирных кислот, билирубина,
микроэлементов, гормонов и др.)
6. защитная:
иммунная (белки острой фазы, иммуноглобулины)
гемостатическая (фибриноген, факторы свертывания крови)
7. ферментативно-метаболическая

19.

Форменные элементы крови
• ЭРИТРОЦИТЫ
4-5.5*1012/л
• ЛЕЙКОЦИТЫ
4-9*109/л
• ТРОМБОЦИТЫ
180-320*109/л

20. Эритроциты

Двояковогнутые
безъядерные диски,
диаметр - около 7,5 мкм
44% объема крови
Период жизни: 120 дней
Ретикулоциты
(молодые формы):
2-12% - норма

21.

ХАРАКТЕРИСТИКИ ЗРЕЛЫХ ЭРИТРОЦИТОВ
Изменение формы

22.

Гемолиз эритроцитов - процесс разрушения обо-
лочки эритроцитов и выход гемоглобина в наружную
среду.
гипотонический
раствор
Гемолиз
изотонический
раствор 0,9%NaCl
Норма
гипертонический
раствор
Плазмолиз

23. Осмотическая резистентность эритроцитов

(в забуференных растворах NaCL)
NaCL,% доли
% Гемолиза
0,34
97-100
0,35
90-99
0,40
50-95
0,45
5-45
0,50
<6
0,55
0
Резистентность:
минимальная - % раствора, в котором минимальный гемолиз
(норма 0,46 - 0,50%)
максимальная - % раствора, в котором полный гемолиз
(норма 0,32 – 0,34%)

24.

ТИПЫ ГЕМОГЛОБИНА
• А (95-98%)
• А2 (2-3%)
• F (1-2%)
ВИДЫ ГЕМОГЛОБИНА
физиологические
• Оксигемоглобин (HHbO2)
• Восстановленный гемоглобин (HHb)
• Карбгемоглобин (HHbCO2)
патологические
• Карбоксигемоглобин (HHbCO)
• Метгемоглобин ( Fe+++ - O2)

25.

Главный регулятор эритропоэза: эритропоэтин
кровь
+
эритро
поэтин
• Т3, Т4,
• глюкокортикоиды,
андрогены,
+
• адреналин
Симпатический
рефлекс
+
хеморецепторы
Снижение О2

26.

ЭРИТРОЦИТОЗ - увеличение количества эритроцитов.
Физиологический эритроцитоз - при стрессе и
высотной гипоксии
• Патологический эритроцитоз:
1) Первичный (эритремия ) - заболевание системы
красной крови: эритроцитов более 6.5*109/мл
2) Вторичный (симптоматический) - временно при
определенных заболеваниях, состояниях:
абсолютный - увеличение эритропоэза
относительный (гемоконцентрационный) - снижение
объема плазмы при нормальном объеме эритроцитов

27.

ЭРИТРОПЕНИЯ - уменьшение количества
эритроцитов (при беременности, анемии)

28. Лейкоциты

Общее количество: 4 - 9 * 109 / л
Время жизни: 4-5 дней
ГРАНУЛОЦИТЫ
АГРАНУЛОЦИТЫ

29.

ФУНКЦИИ ЛЕЙКОЦИТОВ
I. Уничтожение чужеродной клетки:
1. Фагоцитоз:
• нейтрофилы
• эозинофилы
• моноциты
2. Выделение деструктивных веществ:
• Т-лимфоциты
• Натуральные киллеры
II. Маркирование антигена: синтез антител (В-лимфоциты)
III. Регуляция иммунных реакций:
• секреция
цитокинов,
• секреция медиаторов воспаления
(базофилы, эозинофилы).

30.

ЛЕЙКОЦИТАРНАЯ ФОРМУЛА
ГРАНУЛОЦИТЫ
48-70% Нейтрофилы
Юные
Палочкоядерные
Сегменто
ядерные
0-1
2–5
55 - 68
СДВИГ ВЛЕВО
СДВИГ ВПРАВО
Базофилы
0–1
АГРАНУЛОЦИТЫ
Эозинофилы
Лимфоциты
Моноциты
0.5 –5
20 – 40
2 -10
в ответ на инфекцию значительное увеличение
продукции нейтрофилов -> больше незрелых
форм - палочкоядерных
при мегалобластных анемиях,
заболеваниях печени и почек

31.

ЛЕЙКОЦИТОЗЫ:
• Физиологические: пищевой, миогенный,
эмоциональный, при беременности
• Патологические: при инфекциях, воспалении,
заболеваниях крови и др.
ЛЕЙКОПЕНИИ:
Патологические - при нарушениях
лейкопоэза (облучение, СПИД и др.)

32.

ГРУППЫ КРОВИ
IV
I
III
II

33.

Система АВО
II (А)
Агглютиногены
(эритроциты)
Агглютинины
(плазма)
III (В)
IV (АВ)
I (0)

34.

Реципиент - II группа (А, бета)
Донор – III группа (В, альфа)
Реакция антиген-антитело
Активация белков
системы комплемента крови
фагоцитоз
Гемолиз!
Агглютинация!
При переливании
несовместимой крови –
гемотрансфузионный
шок!

35.

Виды антигенов системы резуса: D, C, c, E, e
Резус-антиген

36.

Определение групп крови
Реагент – цоликлоны
(антитела к антигенам эритроцитов)
ДОБАВЛЕНИЕ К КАПЛЕ КРОВИ
АНТИТЕЛ К Rh
(анти-D)

37.

Защитную функцию
крови поддерживают:
Иммунная система крови:
предотвращение экспансии
чужеродного агента и его
уничтожение.
Система Регуляции
Агрегатного Состояния
Крови (РАСК):
• поддержание жидкого
состояния крови в норме;
• предотвращение
кровопотери при
повреждении стенки
сосуда (свертывание).

38.

СИСТЕМА РЕГУЛЯЦИИ АГРЕГАТНОГО
СОСТОЯНИЯ КРОВИ (РАСК)
СВЕРТЫВАЮЩАЯ
СИСТЕМА
• образование тромба
ПРОТИВОСВЕРТЫВАЮЩАЯ
СИСТЕМА
• рассасывание тромба,
• препятствует образованию
тромба внутри сосуда.
Показателем агрегатного состояния крови является
гемостатический потенциал
ГСП = тромбин / плазмин

39.

СТАДИИ СВЕРТЫВАНИЯ КРОВИ
I. Тромбоцитарно-сосудистый гемостаз:
сужение сосуда, адгезия и агрегация тромбоцитов.
II. Коагуляционный гемостаз:
1. Образование протромбиназы.
2. Образование тромбина.
3. Образование фибрина.
III. Послефаза гемокоагуляции:
ретракция (уплотнение) тромба и фибринолиз.

40.

I. ТРОМБОЦИТАРНО-СОСУДИСТЫЙ ГЕМОСТАЗ
Кратковременный
спазм сосудов
(первичный).
Адгезия тромбоцитов
(3-10 с).
(из эндотелия)
PGI2, NO
-
(из тромбоцитов)
АДФ, Тромбоксан А2
+
Начальная
агрегация
тромбоцитов
+
Активация
тромбоцитов

41.

Адреналин,
серотонин
тромбоксан А2
Вторичный
спазм
сосудов.
РЕАКЦИЯ ВЫСВОБОЖДЕНИЯ
Факторы агрегации
Агрегация
тромбоцитов:
обратимая и
необратимая.
Факторы свертывания
+
+
Активация
коагуляционного
гемостаза
Ретракция тромба:
уплотнение и
закрепление в стенке
сосуда.

42.

II. КОАГУЛЯЦИОННЫЙ ГЕМОСТАЗ

43.

1. ОБРАЗОВАНИЕ ПРОТРОМБИНАЗЫ
ВНЕШНИЙ ПУТЬ
(тканевой тромбопластин,
тканевой фактор III - TF )
5-10 сек
ВНУТРЕННИЙ ПУТЬ
(кровяной
тромбопластин – Ф3)
5-10 мин
Xакт. + Vакт. + Ca +
ТРОМБОПЛАСТИН
протромбиназа

44.

2. ОБРАЗОВАНИЕ ТРОМБИНА
протромбиназа
ПРОТРОМБИН
Протромбиназа
ТРОМБИН

45.

3. ОБРАЗОВАНИЕ ФИБРИНА
XIII фактор
Нерастворимый фибрин

46.

III. Ретракция кровяного сгустка
Тромбостенины
(из тромбоцитов)
Фибрин
Уплотнение сгустка

47.

ПРОТИВОСВЕРТЫВАЮЩАЯ СИСТЕМА
ФИБРИНОЛИЗ:
рассасывание
образовавшегося
тромба
АНТИКОАГУЛЯНТЫ:
препятствуют
образованию тромба
ФИБРИН
ПЛАЗМИН
ПРОДУКТЫ
ДЕГРАДАЦИИ
ФИБРИНА
Плазминоген
Активатор
плазминогена

48.

АНТИКОАГУЛЯНТЫ:
Первичные присутствуют в крови:
• Антитромбины
• Гепарин
• Протеин С
Синтезируются клетками
соединительной ткани и
крови
Вторичные образуются при
свертывании
• Фибрин
• Продукты деградации
фибрина, тромбина

49.

КЛИНИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ОЦЕНКИ ГЕМОСТАЗА
Показатель
Что отражает
Нормы
Время кровотечения
(проба Дюке)
течение
тромбоцитарнососудистого гемостаза
1, 5 – 2 мин
Время свертывания
течение
коагуляционного
гемостаза
(преимущественно
внутреннего пути)
5 – 10 мин
Протромбиновое
время (ПВ)
активность внешнего
пути свертывания
крови
8-14 с
Активированное
частичное
тромбопластиновое
время (АЧТВ)
активность
внутреннего пути
свертывания крови
25-39 с

50.

Время кровотечения (проба Дюке): укол кончика пальца на
глубину 4 мм, после чего каждые 10—30 сек. фильтровальной
бумагой, не касаясь ранки, снимают каплю крови; счет времени
ведут от момента появления первой капли до остановки
кровотечения.
Время свертывания крови (по Сухареву): в капилляр набирают
столбик крови высотой 25−30 мм и переводят её в середину
капиллярной трубки. Включают секундомер и через каждые 30 с
наклоняют капилляр под углом 30−45°. Кровь свободно
перемещается внутри капилляра. С началом свёртывания её
движение замедляется. В момент полного свёртывания кровь
перестаёт двигаться.
Малочувствительный, неспецифичный тест.
Укорочению ВС способствуют многие факторы
Удлинение – при гемофиллии или лечении гепарином.

51.

Протромбиновое время (ПВ) – время образования сгустка
фибрина в цитратной плазме пациента после добавления к
ней смеси тканевого тромбопластина и Са++ (в норме 8 -14
сек).
зависит от концентрации протромбина в крови пациента,
характеризует активность внешнего пути свертывания
крови
В капилляре смешивают цитрат натрия и кровь, переливают
в пробирку, далее в пробирку добавляют хлорид кальция и
раствор тромбопластина. Засекают время до образования
сгустка крови.
Производные ПВ – Протромбиновый индекс (%) и МНО
(международное нормализованное отношение)
СНПВ – среднее нормальное ПВ
МИЧ - международный индекс
чувствительности тромбопластина для
данного тестовой смеси тромбопластина

52.

Активированное частичное тромбопластиновое
время = время активации частичного
тромбопластина (АЧТВ) – время образования
тромба при добавлении Са и контактного
активатора.
Характеризует преимущественно эффективность
внутреннего пути свертывания (в норме чаще 25-39
сек).
Контактный активатор – фосфолипиды: заменители
тромбоцитов, т.е. кровяного тромбопластина
(например, цефалины или аналоги)

53.

АППАРАТНЫЕ МЕТОДЫ
Электрокоагулография – метод регистрации изменения
электрического сопротивления крови в процессе ее
свертывания.
По коагулограмме определяют:
• Время начала свертывания: Т1
• Время окончания свертывания: Т2
• Продолжительность свертывания: Т2-Т1
• Время начала ретракции и фибринолиза
Тромбоэластография – метод оценки процесса свертывания
крови по внутреннему пути путем регистрации изменений
вязкости крови.