Современная серологическая диагностика сифилиса

1. Серологическая диагностика сифилиса

2.

3.

Автор:
Попов В.Е.
Анимация:
Хруслов М.В.
У
Г.

4.

5.

Ингредиенты реакции:
• Антигены
• Испытуемая сыворотка
• Эритроциты барана
• Гемолитическая сыворотка
• Комплемент

6. Антигены делятся на: * специфические и * неспецифические

7. К специфическим антигенам относят:

8. Взвесь патогенной тканевой бледной трепонемы из пораженного яичка кролика, зараженного сифилисом.

9. В реакции Вассермана набольшее распространение получила культуральная трепонема штамма Рейтер, обработанная ультразвуком (соникат).

10. К неспецифическим антигенам относят кардиолипиновый антиген.

11. Кардиолипин – очищенный экстракт из мышц бычьего сердца; антиген отличается высокой чувствительностью, особенно при скрытых формах сифил

Кардиолипин –
очищенный экстракт из мышц
бычьего сердца; антиген
отличается высокой
чувствительностью, особенно
при скрытых формах
сифилиса; широко применяется
во всем мире в
серодиагностике сифилиса.

12. Антигены для реакции Вассермана должны удовлетворять следующим требованиям:

13. - не вызывать гемолиза эритроцитов;

14. - не инактивировать и не адсорбировать комплемент;

15. - не образовывать с сывороткой здоровых лиц комплекса, способного адсорбировать комплемент;

16. - при добавлении антигена в оптимальной дозе к сыворотке больных сифилисом образовывать комплекс, адсорбирующий комплемент.

17. Схема RW

Комплемент
Опыт
Аг +
Сыворотка
C3
C3
C3
C3
Индикаторная система
Гем. сыв. + Эритр. барана

18. Положительная RW

C3
+
+
Опыт
Аг +
Сыворотка
+
C3
C3
Комплемент связался
сывороткой больного и
антигеном
+
C3
Индикаторная система
Гем. сыв. + Эритр. барана

19. Отрицательная RW

Опыт
Комплемент не
связался сывороткой
больного и антигеном
Аг +
Сыворотка
C3
+
C3
C3
+
+
+
Индикаторная система
Гем. сыв. + Эритр. барана
C3

20.

21.

Антитело
(Ig)
Антиген
(Treponema pallidum)

22.

Ig

23.

Присоединение к иммунному
комплексу комплемента

24.

Не разрушает
эритроциты барана
Связавшийся комплемент

25.

Гемолиз отсутствует,
RW (+) положительная

26.

27.

Положительная
реакция Вассермана
2+
3+
4+
4+
4+

28.

4+
4+
4+
Резко положительная
реакция Вассермана

29.

30.

Не связавшийся
исследуемой сывороткой
комплемент
Эритроцит барана
Гемолитические Ig

31.

Комплемент соединяется с
гемолитической системой

32.

Наступает гемолиз
эритроцитов

33.

Наступает гемолиз
эритроцитов

34.

Наступает гемолиз
эритроцитов

35.

Наступает гемолиз
эритроцитов

36.

37.

Гемолиз
эритроцитов,
RW (-)
отрицательная

38.

Гемолиз
RW ( - )
отрицательная

39. Методика постановки реакции.

40. Испытуемая сыворотка по классической методике реакции Вассермана предварительно прогревается 30 минут при t0 560 для инактивирования компле

Испытуемая сыворотка по
классической методике реакции
Вассермана предварительно
прогревается 30 минут при t0 560
для инактивирования
комплемента и стабилизации
глобулиновых фракций.

41. Перед постановкой основного опыта минимальная доза комплемента, вызывающая гемолиз при добавлении гемолитической системы, оттитровывает

Перед постановкой основного
опыта минимальная доза
комплемента, вызывающая гемолиз
при добавлении гемолитической
системы, оттитровывается в
присутствии антигена и сыворотки
здорового человека

42. Каждый из пяти ингредиентов реакции добавляется в одинаковом объеме.

43. Точность разливки ингредиентов реакции имеет первостепенное значение.

44. Для этих целей используется аппарат Флоринского, с помощью которого за 20 минут можно осуществить строго дозированную разливку 200 сыворото

Для этих целей
используется аппарат
Флоринского, с помощью
которого за 20 минут
можно осуществить строго
дозированную разливку
200 сывороток.

45.

46. Для обеспечения оптимальных условий фиксации комплемента на образующемся комплексе (в случае взаимодействия исследуемой сыворотки с ант

Для обеспечения оптимальных
условий фиксации комплемента на
образующемся комплексе (в случае
взаимодействия исследуемой
сыворотки с антигеном) смесь
сыворотки, антигена и комплемента
выдерживают в термостате в течение
45-60 минут.
[1-я фаза реакции]

47. После чего добавляют гемолитическую систему, и пробирки вновь помещают в термостат.

48. 2-я фаза реакции

49. Учет реакции производят при наступлении гемолиза в контрольных пробирках основного опыта.

50.

Для уточнения диагноза
проводят специфические
серологические реакции.

51. Специфические серологические реакции:

52.

Реакция
иммунофлюоресценции
(РИФ)
Иммуноферментный
анализ
(ИФА)
Реакция
иммобилизации
бледных трепонем (РИБТ)

53.

Реакция
иммунофлюоресценции
(РИФ)

54.

Противотрепонемные антитела
выявляются с помощью меченных
флуоресцеином антител против
глобулинов человека

55.

56.

57.

58.

59.

60.

Люминисцентная микроскопия
(РИФ)

61.

Иммуноферментный анализ
(ИФА)

62.

Противотреонемные антитела выявляются с
помощью цветной реакции, которая
проявляется в присутствии пероксидазы хрена

63.

64.

65.

66.

67.

68.

69.

70.

71. Благодарим за внимание