Сапонины 2020

1.

САПОНИНЫ
ТРИТЕРПЕНОВЫЕ САПОНИНЫ
1. Пентациклические
тип β-амирина (олеонана)
тип α-амирина (урсана)

2.

тип лупеола (лупана)
HO
2.Тетрациклические
21
24
22
25
20
27
23
19
12
11 18 13
14
2
3
28
1
10
26
9
8
5
4
17
16
15
6
7
30
29
тип даммарана
тип ланостана

3.

O
O
тип галостана
№
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Агликон (Олеан-12-ен)
β-амирин
Олеаноловая к-та
α-Босвеллиевая к-та
Глицерритиновая к-та
Гипсогенин
Хедерагенин
Квиллаевая к-та
Медикагеновая к-та
Баррингтогенол С
-ОН
3β
3β
3α
3β
3β
3β, 23
3β, 16α
2β, 3β
3β, 16α,
21β, 22α, 28
=О
11
23
23
-СООН
28
24
30
28
28
28
23, 28
Прочие

4.

№
1
2
3
4
5
Агликон (Урсан-12-ен)
α-амирин
Урсоловая к-та
Мадазиатиковая к-та
Азиатиковая к-та
Мадеказиковая к-та
-ОН
3β
3β
2α, 3β, 6β
2α, 3β, 23
2α, 3β, 6β,
23
=О
№
Агликон (Лупан-20(29)-ен)
1 Лупеол
2 Бетулин
3 Бетулиновая к-та
-ОН
3β
3β, 28
3β
=О
-СООН
Прочие
28
28
28
28
-СООН
28
Прочие

5.

OH
HO
OH
HO
HO
OH
(20S)-протопанаксадиол
(20S)-протопанаксатриол
O
O
OH
Xyl_O
шенгманол-ксилозид

6.

O
C
O
CH2OH
O
O
COOH
O
Ara_O
OH
OH
OH
OH
OH
аралозид А

7.

OH
OH OH
O
Glu__OH2C
OH
O
OH
OH OH
O
CH2OH
O
OH
HOH2C
O
OH
O
OH
O__Glu
гинзенозид Rb1
HO
CH2OH
O
OH
OH
OH
O
гинзенозид Rg1

8.

COOH
O
COOH
O
O
O
C
O
OH
OH
O
HOOC
глицирризиновая к-та
O__CCH3
O
CH2OH O
OH
OH
OH
OH
CH2OH
O
__
Glu O
O
OH
O__Glu
CH2OH
β-эсцин

9.

СТЕРОИДНЫЕ САПОНИНЫ
21
O
20
22
18
12
E
11
1
C
14
9
2
A
3
HO
13
19
10
5
17
D
27
24
O
16
15
8
B
23
25
26
F
спиростанолы (спиростаны)
7
4
H
6
27
H 23
25
E
C
A
B
HO
H
24
26
O
D
фуростанолы (фуростаны)

10.

O
25
F
E
25
O
F
E
O
D
O
D
аксиальная (25S)
экваториальная (25R)
O
O
HO
диосгенин

11.

O
O
HO
H
тигогенин
O
O
OH
HO
(25S)рускогенин

12.

OH
O__Glu
O
глюкозидаза
CH2OH
O
Rha__O
O
протодиосцин
OH
O
__
O Rha
O
CH2OH
O
Rha__O
O
OH
O__Rha
диосцин

13. э

Обезжиривание сырья
хлористым этиленом
Экстракция 80%
этанолом
Промывание экстракта
циклогексаном
или СCl4
Циклогексановый
экстракт
Упаривание до
1/3 объема
Экстракция СHCl3
Хлороформный экстракт (содержит малополярные гликозиды)
Экстракция водного
раствора н-бутанолом
Бутанольный экстракт
содержит среднеполярные гликозиды
Водная фаза
содержит сильнополярные сапонины

14.

Схема получения препарата «САПАРАЛ»
1. Измельченные корни экстрагируют кипящим метанолом.
2. Вытяжку упаривают под вакуумом (при температуре 50–55°С) до 1/10
первоначального объема и остаток растворяют в 15-кратном количестве воды.
3. Полученный раствор обрабатывают сначала этилацетатом (в отношении 1:3
к объему водной фазы). После отделения этилацетатного раствора, водную
фазу обрабатывают н-бутанолом.
4. Водный раствор профильтровывают и подкисляют раствором НСl до рН=3–4
и трижды обрабатывают н-бутанолом.
5. К объединенному бутанольному раствору добавляют 25% раствор аммиака
до рН=7–8. Затем отгоняют растворитель в вакууме до получения густого
остатка.
6. Остаток растворяют в метаноле при кипячении, и добавляют к раствору
активированный уголь.
7. Отфильтровывают активированный уголь и к раствору добавляют
четырехкратное количество этилацетата.
8. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают этилацетатом и
высушивают.

15.

Схема получения диосгенина из травы якорцев стелющихся
1. Сухую траву якорцев стелющихся обезжиривают хлороформом в течение 30
часов, затем экстрагируют 70% водным метанолом 48 часов при комнатной
температуре. Водно-метанольный раствор отделяют от сырья и упаривают под
вакуумом досуха.
2. Экстракт растворяют в воде и обрабатывают тремя порциями бутанола.
3. Бутанол упаривают под вакуумом досуха.
4. Сухой остаток помещают на колонку с окисью алюминия и элюируют смесью
хлороформ-метанол-вода
(65:35:10).
Собранный
элюат,
содержащий
стероидные сапонины, упаривают, остаток растворяют в воде и пропускают
через колонку с сефадексом G-25.
5. К элюату добавляют 10% серную кислоту (1:2 от объема элюата) и нагревают
с обратным холодильником при 110 ˚С в течение 10 часов.
6. После этого смесь охлаждают, выпавший осадок отфильтровывают и
растворяют в диэтиловом эфире.
7. После отгонки эфира, остаток дважды перекристаллизовывают из метанола,
получая химически чистый диосгенин.

16.

Качественная реакция с р. Эрлиха (п-ДМАБА) на фуростаноловые сапонины
OR1
O
RO
H3C
H3C
N
CH
OR1
O
RO

17.

H3C
H3 C
H3 C
+
N
H3 C
+
N
CH
CH
OR1
OR1
O
O

18.

Стандартизация сапонинсодержащего ЛРС Российской фармакопеей
ЛРС
Качественное
определение
Корни аралии
манчжурской
ТСХ, H2SO4 (красно-фиолетовое аралозиды)
Корни женьшеня ТСХ, ФВК (темнонастоящего
розовое – панаксозиды)
H2SO4 (от краснокирпичного до
фиолетового панаксозиды)
Корни солодки
ТСХ, темная флуоресценция при 254
нм – глицирризиновая к-та
Корневища с кор- ТСХ, ФВК (от конями синюхи го- ричневого до розолубой
во-фиолетового)
Количественное определение
Показатель
Метод определения
Сумма аралозидов
Потенциометрическое
титрование
Сумма панаксозидов Спектрофотометрия
при 526 нм после
реакции с H2SO4
Глицирризиновая
к-та
Спектрофотометрия
при 258 нм
Сумма
тритерпеновых
сапонинов
Спектрофотометрия
при 282 нм после
реакции с СНзСООН
и H2SO4
Примечание: ФВК – фосфорновольфрамовая к-та

19.

Стандартизация сапонинсодержащего ЛРС Европейской фармакопеей
ЛРС
Качественное
определение
Корни астрагала
монгольского
Трава центеллы
азиатской
Количественное определение
Показатель
Метод определения
Астрагалозид IV
ТСХ, АА (от синезеленого до фиолетового)
ТСХ, АА (серо-фиолетовое)
Гинзенозиды Rb1 и
Rg1
ВЭЖХ
(СФ-детекция при 203 нм)
Корни
женьшеня ТСХ, АА (серо-фиоложного
летовое)
Гинзенозиды Rb1 и
Rg1
ВЭЖХ
(СФ-детекция при 203 нм)
Корни солодки
Глицирризиновая
к-та
ВЭЖХ
(СФ-детекция при 254 нм)
Корневище иглицы ТСХ, В (желтое)
шиповатой
Сумма сапонинов
ВЭЖХ
(СФ-детекция при 203 нм)
Ладан
индийский ТСХ,
(гашение
(смола
босвеллии флуоресценции при
пильчатой)
254 нм)
11-кето-βбосвелловая к-та и
ацетил-11-кето-βбосвелловая к-та
ВЭЖХ
(СФ-детекция при 250 нм)
Гедеракозид С
ВЭЖХ
(СФ-детекция при 205 нм)
Корни женьшеня
Листья плюща
ТСХ, АА (фиолетовое)
ТСХ, H2SO4 (пурпурное)
Сумма сапонинов
ВЭЖХ (испарительный детектор светорассеяния)
ВЭЖХ
(СФ-детекция при 200 нм)
Примечание: АА – анисовый альдегид, В – ванилин