The subject and tasks of biochemistry. The importance of biochemical research in medicine

1. SPB GBPOU "MK № 3" Specialty 31.02.03 “Laboratory diagnostics” PM. 03. Conducting: laboratory biochemical studies Discipline:

SPB GBPOU "MK № 3"
Specialty 31.02.03 “Laboratory diagnostics”
PM. 03. Conducting: laboratory biochemical studies
Discipline: Foreign language
Interdisciplinary student Conference
"Preanalytical stage of biochemical research"
2022 year
1
1

2. The subject and tasks of biochemistry. The importance of biochemical research in medicine.

Biochemistry is the science of the gualitive and quantitative content and transformations in
chemical reactions of compounds forming living tisiy.
• Static biochemistry studies the structure of organic molecules and their properties.
• Dynamic biochemistry studies the metabolism in the body.
• Functional biochemistry studies the functions and pecularities of metabolism in individual
organs and systems of the body.
The importance of biochemical research in clinical medicine.
• Screening is the detection of the disease in the preclinical stage.
• Diagnosis is the process of recognizing a disease and establishing its cause.
• Monitoring is the control over the treatment of the disease.
• Prognosis is the assessment of the outcome of the disease and the consequences of the
disease.
2
2

3. Stages of laboratory research

1. Preanalytical- purpose of analysis, preparation.
Patients for examination, taking biological material, transportation to
the laboratory, sample preparation storing.
2. Analytical-
3

4. Order MH RF №380 Laboratory medical technical

• Record the material proceeding into the laboratory;
Maintain proceeding necessary documentation;
• Prepare reagents for research;
• Possess of biochemical methods of analysis;
• To carry collection blood from finger;
• Participate in quality control of biochemical studies;
• Improve professional qualifications;
• Keep safety precautions.
5
4

5. Системы для взятия крови

Вакуумные пробирки.
Система S-Monovette.
Системы для взятия артериальной крови.
Системы для взятия капиллярной крови.
Для исследования используют:
1) Плазму крови, для получения которой кровь собирают с добавлением
антикоагулянтов.
2) Сыворотку крови (не содержит фибриногена и др. факторов свертывания
крови), для получения которой кровь собирают без добавок/антикоагулянтов.
3) Цельную кровь, получают с использованием антикоагулянтов.
Далее мы познакомимся с основными современными системами для взятия
крови.
5
13

6.

4.1.1. Вакуумные пробирки.
Лабораторный медицинский техник должен владеть знаниями о
целевом назначении вакуумных пробирок!
Цвет крышек указывает на вид наполнителя и назначение пробирок.
Цветовая кодировка пробирок соответствует международному стандарту
ISO 6710:
красный, желтый – исследование сыворотки;
голубой – исследование коагуляции,
зеленый – исследование плазмы в клинической химии, иммунологии;
фиолетовый - исследование цельной крови в гематологии и иммунологии,
серый – исследование глюкозы.
Идентификационное кольцо :
6
14

7. Пробирки с белой крышкой и черным идентификационным кольцом - стандартные. Без наполнителя/добавок.

Пробирки с белой крышкой и черным идентификационным кольцом стандартные. Без наполнителя/добавок.
Пробирки с белой крышкой и черным
идентификационным кольцом стандартные.
Используются в качестве пробирок для
получения биожидкостей, отличных от
сыворотки, а также для хранения
биоматериалов и первой пробирке на
выброс.
7
16

8. Объем пробирок

При использовании современных анализаторов достаточны следующие объемы образцов:
- для биохимических исследований: 4-5 мл; при использовании гепаринизированной плазмы: 34 мл;
- для исследования свертывающей системы: 2-3 мл цитратной крови;
- для иммуноисследований, включая исследование белков и др.: 1 мл цельной крови для 3-4
иммуноаналитов;
- для исследования газов крови: артериальная кровь с гепарином – 1 мл; капиллярная кровь –
50 мкл.
Рационально применение пробирок для взятия крови небольшого объема (4-5 мл) при
соотношении диаметра и высоты пробирки 13 на 75 мм. Использование плазмы вместо
сыворотки дает увеличение на 15-20% выхода анализируемого материала при одном и том же
объеме взятой у пациента крови. Взятие венозной крови (флеботомия) облегчается
применением вакуумных пробирок. Под влиянием вакуума кровь из вены быстро поступает в
пробирку, что упрощает процедуру взятия и сокращает время наложения жгута.
Важно! Пробирки для взятия крови должны точно соответствовать цели исследования.
Медицинский лабораторный техник обязан знать целевое назначение пробирок, т.к. именно
он принимает и регистрирует биоматериал для исследования.
8
15

9. Пробирки для получения сыворотки крови с активатором свертывания для биохимических исследований (без

добавок/наполнителей/антикоагулянта). Активатор свертывания не считается добавкой/наполнителем.
Цвет крышки
Цвет кольца
Содержимое
Красный
черный
Кремнезем (SiO2)
Красный
желтый
Кремнезем + гель
Желтый
Красный
Оранжевый
Кремнезем + гель
Белый
Кремнезем + гель
Тромбин + гель
Кремнезем – активатор свертывания (коагулянт), микрочастицы которого нанесены на
стенки пробирки. Пробирки после взятия крови необходимо выдержать в течение 25-30
мин для завершения процесса свертывания.
Пробирки с белым кольцом рассчитаны на взятие малого объема крови (1 -2 мл); используются в педиатрии, для
пациентов с тонкими венами и пожилых пациентов.
Разделительный гель легче сгустка крови, но тяжелее сыворотки; в процессе центрифугирования он
располагается между сгустком и сывороткой крови. Некоторые пробирки могут содержать гранулы.
Тромбин – естественный активатор свертывания крови, которое наступает через 3-5 минут; используется с целью
быстрого получения сыворотки крови при экспресс-исследованиях, а также для пациентов, находящихся на
терапии антикоагулянтами.
9
17

10. Специальные пробирки с серой крышкой для определение глюкозы. Содержат антикоагулянт (Na2-ЭДТА или К2-оксалат) и стабилизатор

глюкозы фторид
натрия (KF) или Li-йодацетат –
ингибиторы гликолиза
(стабилизируют уровень глюкозы
в цельной крови на период до 24
часов).
10
18

11. Пробирки с голубой крышкой. Специальные пробирки для получения плазмы крови для исследования показателей коагуляции.

• Содержат забуференный раствор тринатрий
цитрата (3,2%- или 3,8%-ный), который
связывает ионы кальция и, таким образом,
препятствует свертыванию крови.
• Пробирки со СTAD системой содержат, помимо
цитрата натрия, теофилин, аденозин и
дипирамидол, ингибирующие активность
тромбоцитов. Используются для получения
плазмы плазмы пациентов, получающих
антикоагулянтную терапию.
• Соотношение цитрат натрия : кровь - 1:9 при
нормальном гематокрите (0,5).
• Пробирки должны заполняться кровью строго
по метку, ±10%.
11
19

12. Пробирки с зеленой крышкой. Внутренние стенки пробирки покрыты сухим лития гепарином, аммония гепарином или натрия гепарином.

Антикоагулянт гепарин активирует антитромбины и, таким образом, процесс свертывания крови. Зеленая
крышка, желтое идентификационное кольцо или бледно-зеленая крышка – гепарин+гель.
Гепаринизированная плазма
используется для исследования
алкоголя в крови, некоторых
биохимических показателей
(кардиомаркеры, тропонины и
др.).
Нельзя использовать пробирки с Liгапарином для определения лития, с
аммония-гепарином для определения
аммиака.
Нельзя использовать эти пробирки для
лекарственного мониторинга.
12
20

13. Пробирки с фиолетовой крышкой. Внутренние стенки пробирки покрыты либо К2 ЭДТА либо К3 ЭДТА. ЭДТА (этилендиаминтетрауксусная

кислота) связывает ионы кальция и, таким образом,
препятствует свертыванию крови, т.о. получают образец цельной крови.
Используются для:
Гематологических исследований
ПЦР-диагностики
Исследования групп крови
Определения гликированного
гемоглобина
Исследования типов гемоглобина
методом электрофореза
Исследования ферментов
эритроцитов и других клеток крови
13
21

14.

Система
S-Monovettе
Европейская
цветовая
кодировка
14

15.

Методы взятия венозной крови с помощью системы S-Monovette. Сочетает 2 метода взятия
крови – шприцевой и вакуумный.
15
27

16. Системы Microvette ® производства фирмы SARSTEDT, Германия

Microvette ® 200 и Microvette ® 100 имеют встроенный в
крышку капилляр
Microvette ® объемом 300 и 500 мкл идеальны для
взятия капиллярной крови по принципу
"самотека", причем можно использовать любую
часть кромки.
Предлагается широкий спектр Microvette ® с
ЭДТА для гематологии, а также для выделения
сыворотки, плазмы, с фторидом для
определения глюкозы и с цитратом для
СОЭ. Цветные крышки и надписи,
соответствующие международной цветовой
кодировке, позволяют легко определять
добавки и объем (Microvette ® 200,300,500).
30
16

17. Идентификация пациента. Как минимум два идентификатора – ФИО, дата рождения.

Штрих-кодирование пробирок. Штрих-код –
последовательность черных и белых полос, каждый
символ кодируется последовательностью и толщиной
этих полос.
Автоматизация штрих-кодирования пробирок
17
35

18. Идентификация пациента. Автоматизация штрих-кодирования пробирок

Системы штрихкодирования устанавливаются в помещении, где
производится взятие крови, и выполняет идентификацию образца крови
пациента перед взятием крови.
Запрос на проведение исследования стационарного пациента должен быть
введен в ЛИС за день до взятия крови.
•BC ROBO подготавливает пробирки путем пакетной обработки.
Курьер/медсестра/пневматическая система доставляет лоток из лаборатории
в больницу.
18
37

19. Для получения из образцов крови вариантов проб для различных видов исследований рекомендуется следующая последовательность

наполнения вакуумных пробирок пробирок, или
систем S-Monovette (по Европейской цветовой системе)
№
п/п
Биоматериал
Цвет крышки вакуумной
пробирки
Цвет колпачка
Мonovette
белый
белый
1.
кровь без наполнителей/добавок
2.
кровь без антикоагулянтов с активатором
свертывания/активатор+гель для получения сыворотки для
биохимических, иммунохимических исследований и
лекарственного мониторинга.
красный
желтый
бежевый/
светлокоричневый
3.
кровь с цитратом для получения плазмы для проведения
коагулогических исследований
голубой
зеленый
4.
кровь с гепарином/гепарин+гель – для получения плазмы для
биохимических исследований
зеленый/бледнозеленый
оранжевый
5.
кровь с ЭДТА – для получения плазмы для проведения
гематологических и некоторых биохимических исследований
Фиолетовый
розовокрасный
6.
плазма крови для определения глюкозы
серый
желтый
19
54

20. Взятие капиллярной крови

Подушечка пальца
Пятка
Мочка уха
20
57

21. Взятие капиллярной крови из пальца

С помощью капилляра.
Самотеком
21
58

22. Транспортировка биоматериала. Регистрация. Центрифугирование.

Биологический материал для исследований в лабораторию
должен доставляться в закрытых контейнерах, биксах или в
сумках-холодильниках, промаркированных с помощью
международного знака «Биологическая опасность».
На дно контейнера для транспортировки укладывают
адсорбирующий материал (марлевую салфетку, ткань, вату).
В некоторых ЛПУ используется пневмо-почта.
Чтобы исключить контакт бланков-направлений с биологическим
материалом, их вкладывают в отдельный полиэтиленовый пакет.
Не допускается доставка материала в хозяйственных сумках,
чемоданах, портфелях и других предметах личного пользования.
62
22

23. Регистрация биоматериала в лаборатории.

• При приёме биологического материала необходимо проверить
соответствие штрих-кода на пробирке и направлении, чтобы избежать
ошибки. Все направления регистрируют в ЛИС.
23
63

24. Центрифугирование пробирок

Пробирка
Цвет крышки
Время, мин
Ускорение, g
Активатор свертывания
Красный
10
1500
Рекомендуемое время свертывания до центрифугирования – 30 мин при 18-37оС
Активатор
свертывания+гель
Желтый
10
1200
Рекомендуемое время свертывания до центрифугирования – 30 мин при 18-37оС
Натрия цитрат
Голубой
10
2000
Гепарин
Зеленый
10
1000-1500
ЭДТА
Сиреневый
10
В зависимости от
протокола анализа
Фторид+оксалат
Серый
10
1500
Центрифугирование пробирок необходимо провести не позднее 1 ч после взятия крови.
Если необходимо быстрее подготовить образцы, можно применить более высокое ускорение. Максимальное
ускорение с закрытой крышкой – 4000 g. При открытой крышке ускорение до 12000 g. Данная процедура
должна быть разработана индивидуально для всех требуемых параметров.
24
64

25. Факторы, которые необходимо контролировать. После центрифугирования необходимо оценить цвет и прозрачность сыворотки/плазмы

крови. В норме сыворотка/плазма бледно-желтая, прозрачная,
сгустки/нити фибриногена отсутствуют.
На что надо обратить внимание: 1. цвет; 2. мутность. 3. наличие сгустков.
К изменению цвета и прозрачности сыворотки/плазмы крови могут привести:
гемолиз, липемия, иктеричность.
В инструкциях к наборам реагентов для определения биохимических аналитов в
разделе – биоматериал, всегда указывается интерференция данных факторов на
определение конкретного аналита. На это надо обращать внимание при приеме
биоматериала на исследование.
25
66

26.

Оценка пригодности биоматериала для исследования.
Дальнейшему биохимическому исследованию не подлежат пробы сыворотки
крови с видимым гемолизом, хилезностью и сгустком.
67
26

27. В пробах сыворотки крови с выраженным гемолизом проводить биохимические исследования нельзя!!!

Следует повторить взятие крови.
Причины гемолиза: турникет более 1 мин, длительное хранение цельной крови
- более 2-х ч, сильное встряхивание, перенос крови шприцем в пробирку,
патологические изменения (например, гемолитическая анемия).
Внутриклеточная концентрация некоторых клеточных компонентов в 10 раз
выше их внеклеточной концентрации. Гемолиз служит причиной увеличения
концентрации таких аналитов, как калий, фосфаты, лактатдегидрогеназа,
аланинаминотрансфераза.
68
27

28.

69
28

29. Липемия - мутность (хилезность). Причина липемии - повышенная концентрация жиров, наблюдается при концентрациях триглицеридов

свыше
3,4 ммоль/л.
Интерференция, вызываемая липемией: создает помехи путем рассеяния света
и нарушения пропускания света при прохождении через реакционную смесь.
При сильной мутности никакие измерения невозможны в силу ограниченной
линейности спектрофотометра. Это относится к ферментативным методам,
используемым для измерения глюкозы, холестерина, триглицеридов и мочевой
кислоты.
29
70

30.

30

31. Сгустки Процесс свертывания крови при получении сыворотки крови начинается сразу же после взятия пробы: микроскопические

сгустки образуются уже через 15 секунд
и могут привести к неоднородности пробы и получению
неверных результатов. Сгустки могут нарушить работу
прибора и также привести к неправильным результатам,
без какого-либо указания на их ошибочность, что может
отразиться на лечении больного.
При взятии крови для получения плазмы крови сгустки
могут образовываться при плохом перемешивании крови.
Обнаружить их можно визуально. На стенках пробирки мы
видим отпечатки микросгустков, которых быть не должно.
31
71

32.

32
72

33. Критерии для отказа в принятии лабораторией биоматериала на исследование.

• Расхождение между данными заявки и этикетки (инициалы, дата, время и
т.д.).
• Отсутствие этикетки на емкости для взятия пробы. Лаборатория не имеет
права принимать немаркированные емкости!
• Невозможность прочесть на заявке и/или этикетке паспортные данные
пациента.
• Отсутствие названия отделения, номера истории болезни, фамилии
лечащего врача, подписи процедурной сестры, четкого перечня
необходимых исследований.
• Гемолиз (за исключением исследований, на которые гемолиз не влияет).
• Хилез (за исключением исследований, на которые хилез не влияет).
• Взятый материал находится в несоответствующей емкости (т.е. материал
взят не с тем антикоагулянтом, консервантом и др.).
• Наличие сгустков в пробах с антикоагулянтом.
• Материал взят в вакуумные емкости с просроченным сроком годности.
33
73

34. Автоматическая сортировка биоматериала современнная автоматическая станция пре- и постаналитической обработки образцов крупного

производителя Beckman Coulter, которая позволяют увеличить производительность и эффективность работы
в клинической лаборатории за счет автоматизации трудозатратных операций.
34
74

35. Далее проводим постановку пробирок в штативы для анализатора

Установка пробирок в анализатор. На мониторе
видно: в каком штативе стоит образец с
присвоенным штрих-кодом, сколько назначений у
данного образца. И есть ли образцы с нарушениями.
Важно правильно расположить пробирку: (штрихкодом в прорезь держателя).
Далее проводим постановку
пробирок в штативы для
анализатора
• Поэтому очень важно, чтобы на стадии взятия
крови штрих-код был наклеен верно.
• Штрих-код наклеивать на пробирку строго
вертикально цифровой надписью сверху
вниз, на имеющуюся наклейку. Оставить
прозрачную зону для контроля за
состоянием сыворотки крови. Криво
наклеенные штрих-коды не будут
считываться сканерами приборов!
• Минимальный просвет видимой сыворотки
по вертикали (окно между штрих кодом и
этикеткой пробирки должен быть не менее
6 мм.
• Минимальное расстояние между крышкой
пробирки и наклейкой со штрих-кодом
должно составлять 8 мм.
• Штрих-код должен быть наклеен ровно и
плотно, строго вертикально (длинной
стороной вдоль пробирки).
35
75

36. Хранение биоматериала.

• Содержание электролитов, субстратов,
некоторых ферментов не изменяется при
хранении образцов сыворотки крови при
температуре 4оС до 4-х дней.
• Хранение образцов плазмы крови для
исследования свертывающей системы, в
условиях комнатной температуры более 4 ч не
рекомендуется.
• Исследование газов крови следует проводить
немедленно.
36
76

37. Источники информации

• http://docs.cntd.ru/document/1200072566 ГОСТ Р 53079.4-2008 Технологии лабораторные
клинические. Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 4.
Правила ведения преаналитического этапа
• Рекомендации по использованию трехкомпонентных вакуумных систем забора крови.
Ковальчук Ю.П.. Бикчентаев В.Р. Методическое пособие. СПб. - №1-2016 - 25 с.
• Н.К. Кондратова. Использование электронных идентификационных браслетов как
инструмент повышения безопасности пациента в ЛПУ. / Медицинские информационные
системы. 2015. № 3. – сс. 11-15. https://cyberleninka.ru/article/v/ispolzovanie-elektronnyhidentifikatsionnyh-brasletov-kak-instrument-povysheniya-bezopasnosti-patsienta-v-l-pu
• Яндекс.Картинки›идентификационные браслеты и прибор для печати...
• https://www.zdrav.ru/articles/4293659109-sop-18-m12-22-pravila-identifikatsii-patsientov-vmedorganizatsii
• Cокращение ошибок в лабораторной медицине
http://www.medteh.info/_fr/15/serum_indices.pdf
• Системы для взятия крови и мочи. «GREINTR BIO-ONE» Австрия. СПб, 2016.
• Системы для взятия крови. Sarstedt.
• РТСинжиниринг http://www.rts-engineering.ru/Med/Sarstedt/lbSAR_microvette_guide.shtml
• Биологическая безопасность в диагностических лабораториях медицинских организаций
«Санэпидконтроль. Охрана труда» №1 2019 / ЛПУ
https://www.profiz.ru/sec/1_2019/bezopasnost_LPU/
37
77

38. Спасибо за внимание!

38
78